欧美日韩亚洲一区二区精品_亚洲无码a∨在线视频_国产成人自产拍免费视频_日本a在线免费观看_亚洲国产综合专区在线电影_丰满熟妇人妻无码区_免费无码又爽又刺激又高潮的视频_亚洲一区区
公務(wù)員期刊網(wǎng) 精選范文 動(dòng)畫電影市場分析范文

動(dòng)畫電影市場分析精選(九篇)

前言:一篇好文章的誕生,需要你不斷地搜集資料、整理思路,本站小編為你收集了豐富的動(dòng)畫電影市場分析主題范文,僅供參考,歡迎閱讀并收藏。

第1篇:動(dòng)畫電影市場分析范文

夢工廠動(dòng)畫公司目前已經(jīng)制作發(fā)行了24部動(dòng)畫長片。此前其作品發(fā)行權(quán)一直歸派拉蒙公司所有,后者從夢工廠動(dòng)畫電影和家庭影音產(chǎn)品發(fā)行中可獲取8%的利潤分配額度。自2006年來,雙方成功合作發(fā)行了《怪物史萊克》系列、《馬達(dá)加斯加》系列、《功夫熊貓》系列以及《馴龍高手》等影片,在全球創(chuàng)造了超過65億美元的票房收入。

今年7月,夢工廠動(dòng)畫剛以1.55億美元的價(jià)格收購了著名動(dòng)畫制作及角色版權(quán)運(yùn)營公司Classic Media。該公司耳熟能詳?shù)淖髌钒ā锻谀睦铩罚╓here's Wally?)、《鬼馬小精靈》(Casper the Friendly Ghost)、《獨(dú)行俠》(The Lone Ranger)等知名動(dòng)畫系列,旗下總共擁有450部各類電視作品,總集數(shù)達(dá)到6100集。此外還擁有眾多漫畫作品的版權(quán),漫畫書刊的累計(jì)發(fā)行量超過20億冊。

8月,夢工廠動(dòng)畫的第二財(cái)季營收報(bào)告顯示,公司營收從2.183億美元下降到1.628億美元,跌幅達(dá)25%;而1280萬美元的盈利與去年同期的3410萬美元相比也下跌了63%。夢工廠總裁杰弗瑞·卡森伯格(Jeffrey Katzenberg)在營收報(bào)告中指出,夢工廠動(dòng)畫第二財(cái)季利潤主要來自于《馬達(dá)加斯加3:歐洲大圍捕》(Madagascar 3: Europe's Most Wanted)——該片全球票房收入截至目前超過5億美元,在年度票房榜上排名第七。家庭娛樂方面,兩部2011年上映的影片繼續(xù)發(fā)力:《穿靴子的貓》(Puss in Boots)在第二財(cái)季收入中貢獻(xiàn)了2280萬美元;《功夫熊貓2》(Kung Fu Panda 2)收入4640萬美元,主要源于本土付費(fèi)電視點(diǎn)播。

夢工廠動(dòng)畫與派拉蒙此前曾為延續(xù)發(fā)行協(xié)議進(jìn)行過談判,派拉蒙方面提出提高發(fā)行分成,但這個(gè)提議沒有得到卡森伯格的同意。另一方面,派拉蒙現(xiàn)在已經(jīng)有了自己的動(dòng)畫公司——派拉蒙動(dòng)畫(Paramount Animation),其動(dòng)畫片《蘭戈》(Rango)不僅票房優(yōu)異,還獲得了奧斯卡最佳動(dòng)畫電影獎(jiǎng)。此種情形下,雙方似乎早已先去了繼續(xù)合作的意愿。而對(duì)于下一個(gè)合作伙伴,夢工廠動(dòng)畫曾希望將利潤分配額度壓到7%左右。除??怂雇猓瑝艄鰟?dòng)畫此前曾經(jīng)與索尼公司進(jìn)行了數(shù)次洽談,但未能達(dá)成一致。

在新的合作協(xié)議中,??怂箤陌l(fā)行夢工廠動(dòng)畫電影和家庭影音產(chǎn)品的利潤中提取8%作為發(fā)行費(fèi)用,此外??怂惯€允許夢工廠動(dòng)畫在美國本土的電視窗口(包括付費(fèi)電視、有線電視和Netflix在內(nèi))發(fā)行其動(dòng)畫作品,而不再額外收取發(fā)行費(fèi)用;而對(duì)于夢工廠動(dòng)畫的新媒體發(fā)行收入(包括線上銷售、在線視頻點(diǎn)播和線上租賃),??怂怪荒芴岢?%。分析認(rèn)為,夢工廠動(dòng)畫和??怂购炗喌男掳l(fā)行協(xié)議對(duì)夢工廠一方較為有利??ㄉ駡?jiān)信新媒體發(fā)行將在未來大放異彩,雖然現(xiàn)在這部分收入所占比例還很低,但他顯然準(zhǔn)備牢牢握住這部分利益。

對(duì)于新的發(fā)行合作伙伴,卡森伯格表示夢工廠動(dòng)畫曾考慮過多家公司,甚至包括自主發(fā)行影片,但他最終選擇了具有“壓倒性優(yōu)勢”的??怂构荆骸案?怂箵碛袕V泛的發(fā)行平臺(tái),在全球范圍內(nèi)的影院和家庭影音行業(yè)都位于領(lǐng)先地位。福克斯建立了擁有專業(yè)力量和資源的世界級(jí)發(fā)行團(tuán)隊(duì),我們相信在接下來的五年內(nèi),夢工廠動(dòng)畫可借此充分發(fā)揮其作品的市場潛力?!?/p>

盡管20世紀(jì)??怂蛊煜?lián)碛凶约旱膭?dòng)畫公司——藍(lán)天工作室(Blue Sky),但分析人士認(rèn)為,夢工廠未來幾年與藍(lán)天工作室可能會(huì)形成有益的競爭態(tài)勢。以“慢工出細(xì)活”著稱的藍(lán)天工作室短期內(nèi)不會(huì)因?yàn)榕c夢工廠動(dòng)畫爭搶檔期而產(chǎn)生內(nèi)耗。前者出品的《樹葉人艾匹克》(Epic)和《里約大冒險(xiǎn)2》(Rio 2)將分別在2013年5月24日和2014年4月11日上映。

市場分析師們紛紛對(duì)??怂乖谌蚱狈康挠绊懥Τ挚隙☉B(tài)度。Cowen&Company公司分析師道格·克魯茲(Doug Creutz)說:“??怂乖诤M獍l(fā)行業(yè)務(wù)方面的規(guī)模和經(jīng)驗(yàn)將對(duì)夢工廠動(dòng)畫拓展國際市場發(fā)揮重要作用?!弊C券評(píng)級(jí)機(jī)構(gòu)Janney Montgomery Scott分析師托尼·韋伯(Tony Wible)則認(rèn)為這番合作的戰(zhàn)略意義遠(yuǎn)重于經(jīng)濟(jì)效益:“新聞集團(tuán)可能助力夢工廠動(dòng)畫發(fā)展新的動(dòng)畫頻道,這對(duì)夢工廠動(dòng)畫本身以及Classic Media的內(nèi)容推廣都將起到積極作用?!?/p>

在皮克斯的動(dòng)畫電影出現(xiàn)疲態(tài)的情況下,手握藍(lán)天工作室,又與夢工廠動(dòng)畫聯(lián)姻的20世紀(jì)??怂构荆谂c皮克斯、迪士尼陣營抗衡中無疑有了更重的砝碼。業(yè)內(nèi)預(yù)估此項(xiàng)合作將為新聞集團(tuán)帶來每年7500萬美元的收益。

夢工廠動(dòng)畫未來的動(dòng)畫電影項(xiàng)目

2012年(派拉蒙發(fā)行)

《守護(hù)者的崛起》(Rise of the Guardians) 11月21日上映

2013年(福克斯發(fā)行)

《克魯?shù)乱患摇罚═he Croods) 3月22日 上映

《蝸?!罚═urbo) 7月19日上映

《眼鏡狗和眼鏡男孩》(Mr. Peabody & Sherman) 11月8日上映

2014年

《我和我的影子》(Me and My Shadow) 3月14日上映

《馴龍記2》(Dragons) 6月20日上映

《斯麥克節(jié)快樂》(Happy Smekday?。?第四季度上映

2016年

《功夫熊貓3》(Kung Fu Panda 3)

夢工廠動(dòng)畫發(fā)行業(yè)務(wù)合約比較

合作方 合約要點(diǎn) 合約期限

派拉蒙 從夢工廠動(dòng)畫電影及家庭影音產(chǎn)品利潤中提成8%。 7年

從夢工廠動(dòng)畫電影及家庭影音產(chǎn)品利潤中提成8%,

第2篇:動(dòng)畫電影市場分析范文

[關(guān)鍵詞] 頭頸癌; 量子點(diǎn); 表皮生長因子受體; 成像; 體內(nèi)分布

[中圖分類號(hào)] R 739.8 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [doi] 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.06.003

對(duì)活體內(nèi)癌細(xì)胞可視化實(shí)時(shí)成像觀察在研究癌癥的發(fā)生發(fā)展和個(gè)體化治療中具有重要作用,同時(shí)也是抗癌領(lǐng)域里研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)。近年來發(fā)展起來的量子點(diǎn)(quantum dots,QDs)在該領(lǐng)域顯示出巨

大的發(fā)展前景[1-2]。

QDs是一種由Ⅱ~Ⅵ族元素或Ⅲ~Ⅴ族元素組成的納米微晶體,與目前傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料和熒光蛋白相比,QDs具有如下獨(dú)特的光學(xué)特性:QDs激發(fā)光譜寬且連續(xù)分布,發(fā)射光譜窄而對(duì)稱,熒光度強(qiáng),光化學(xué)穩(wěn)定性好,不易發(fā)生光漂白,通過改變粒子的尺寸和組成可獲得從紫外到近紅外范圍內(nèi)任意點(diǎn)的光譜[1-3]。QDs的這些光學(xué)特征是目前所有熒光探

針都不具備的。特別是近年來發(fā)展起來的發(fā)射波長在700~900 nm范圍內(nèi)的近紅外熒光量子點(diǎn)(near-infrared fluorescent quantum dots,NIRF-QDs),其不僅可以避免組織自發(fā)熒光(400~600 nm)的干擾,同時(shí)對(duì)組織具有強(qiáng)的穿透力,因而特別適合于體內(nèi)可視化成像研究[4-5]。

目前研究表明:頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞高表達(dá)表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,

EGFR)[6-7]。本研究將人頰鱗狀細(xì)胞癌BcaCD885細(xì)胞植入裸鼠的頦-頸交界部皮下,建立頦-頸部鱗癌模型,用最大發(fā)射波長為800 nm的QDs與EGFR單克隆抗體(monoclonal antibody,mAb)連接,制備QD800-EGFR mAb探針,通過靜脈注射QD800-EGFR mAb對(duì)頭頸部鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行原位可視化成像觀察,并觀察其體內(nèi)分布特征,為進(jìn)一步探索基于抗體靶向性的NIRF-QDs對(duì)頭頸部鱗狀細(xì)胞癌的可視化成像和個(gè)體化診治提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 主要材料

1.1.1 試劑和儀器 QD800抗體偶聯(lián)試劑盒(Invitro-

gen公司,美國),EGFR mAb(Abcam公司,英國),人頰鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株BcaCD885(四川大學(xué)口腔疾

病研究國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室),紫外分光光度計(jì)(DU600,Beckman公司,美國),冷凍離心機(jī)(Z233MK-2,

HERMLE公司,德國),激光掃描共聚焦顯微鏡(la-ser scanning confocal microscope,LSCM)(TCS-SP5,Leica公司,德國),Maestro活體成像系統(tǒng)(Maestro EX,Cri公司,美國)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的SPF級(jí)BALB/c nu/nu裸鼠12只為研究對(duì)象,鼠齡6~8周,體重20~25 g。恒溫恒濕條件下飼養(yǎng),墊料、飼料和飲水均經(jīng)滅菌處理。所有實(shí)驗(yàn)操作程序均經(jīng)過重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用管理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 QD800-EGFR mAb探針的制備和純化 根據(jù)QD800抗體偶聯(lián)試劑盒中實(shí)驗(yàn)手冊所提供的實(shí)驗(yàn)步

驟來進(jìn)行QD800-EGFR mAb探針的制備,本實(shí)驗(yàn)分為4步,具體如下。1)QDs的活化和洗脫:將濃度為

10 mmol·L-1的雙功能SMCC溶液14 μL以及濃度為

4 μmol·L-1的QD800液125 μL混合,在室溫下活化1 h后用脫鹽柱洗脫,收集有色洗脫液500 μL備用。2)抗體還原和分離:將濃度為1 mol·L-1的二硫蘇糖醇液體6.1 μL加入到300 μL濃度為1 mg·mL-1的EGFR單抗PBS液中,室溫下還原反應(yīng)30 min后加入染料指示液,用脫鹽柱洗脫,收集著色液500 μL備用。3)偶聯(lián)和滅活:將收集的以上兩種洗脫液混合,室溫下偶聯(lián)反應(yīng)1 h后加入3 μL濃度為10 mmol·L-1的2-巰基乙醇,室溫下滅活反應(yīng)30 min。4)濃縮和純化:將以上偶聯(lián)滅活后的液體加入超濾裝置管中7 000 r·min-1離心15 min,收集超濾離心膜內(nèi)側(cè)偶聯(lián)溶液,然后用Pierce柱行色譜分離,得純化的QD800-EGFR mAb探針。最后根據(jù)產(chǎn)品說明書提供的消光系數(shù)和測量波長兩個(gè)參數(shù),以及以此波長作為激發(fā)光在紫外分光光度計(jì)中測出相對(duì)應(yīng)的吸光度和比色杯的光程,計(jì)算出QD800-EGFR mAb探針的濃度。計(jì)算公式為:A=εcl,其中A為吸光度值,ε為消光系數(shù),c為分子濃度,l為光程。

1.2.2 QD800-EGFR mAb探針體外標(biāo)記BcaCD885活細(xì)胞 將生長良好的BcaCD885細(xì)胞以每毫升5×104個(gè)的濃度接種到9個(gè)35 mm玻璃底培養(yǎng)皿(直徑為15 mm)中,每個(gè)1 mL,培養(yǎng)24 h后,棄去培養(yǎng)基,PBS清洗3次。然后分為3組,每組3個(gè)培養(yǎng)皿。實(shí)驗(yàn)組加入濃度為100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探針100 μL;對(duì)照組Ⅰ加入100 μL濃度為100 nmol·L-1的QD800;對(duì)照組Ⅱ先加入濃度為1 μg·mL-1的EGFR mAb 200 μL以封閉EGFR,2 h后用PBS清洗3次,然后加入濃度為100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探針100 μL。以上各組在37 ℃下孵育30 min后用PBS沖洗3次,然后在LSCM下觀察QD800-EGFR mAb探針標(biāo)記BcaCD885細(xì)胞的情況。

1.2.3 裸鼠頭頸鱗狀細(xì)胞癌模型的建立 取對(duì)數(shù)生長期的BcaCD885細(xì)胞,采用0.5%胰蛋白酶進(jìn)行消化,在4 ℃下,800 r·min-1離心4 min,然后將BcaCD885細(xì)胞懸于PBS液中,將含有2×106個(gè)BcaCD885細(xì)胞的PBS懸液0.2 mL注射于12只裸鼠的頦-頸交界部皮下,從而建立了頭頸部鱗狀細(xì)胞癌模型,每日觀察腫瘤的生長情況,待腫瘤的最大徑達(dá)到0.8~1.0 cm時(shí)開始實(shí)驗(yàn)。

1.2.4 腫瘤活體可視化成像觀察 將頭頸部鱗狀細(xì)胞癌模型裸鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組6只,用2%戊巴比妥鈉(40 mg·kg-1)行腹腔注射麻醉后,實(shí)驗(yàn)組通過尾靜脈注射100 μL的QD800-EGFR mAb探針

(含100 pmol當(dāng)量的QD800)。對(duì)照組通過尾靜脈注射250 μL濃度為1 mg·mL-1的EGFR mAb,24 h后再注射100 pmol當(dāng)量的QD800-EGFR mAb探針100 μL。所

有動(dòng)物于注射QD800-EGFR mAb探針之后15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、9 h、24 h的7個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)用Maestro活體成像系統(tǒng)進(jìn)行可視化成像檢測,激發(fā)光/發(fā)射光為630 nm/800 nm,曝光時(shí)間為50 ms,像素為1 024×1 024。將采集的圖像用Maestro 2.10.0軟件進(jìn)行處理和數(shù)據(jù)分析,分別顯示自發(fā)熒光和目標(biāo)熒光信號(hào),然后測量其熒光值,并且計(jì)算熒光信噪比,即腫瘤熒光強(qiáng)度與背景自發(fā)熒光強(qiáng)度之比。將每種信號(hào)添加偽色彩,本研究將自發(fā)熒光設(shè)置為綠色,目標(biāo)熒光信號(hào)設(shè)置為紅色,最后將兩種色彩相疊加。

1.2.5 QD800-EGFR mAb熒光探針的體內(nèi)分布和器官的組織檢查 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別在3 h成像完畢后斷頸處死裸鼠3只,24 h成像后處死裸鼠3只,解剖取出裸鼠的腫瘤、心、肝、脾、肺、左腎、右腎、腦、腸、胃,各器官用PBS沖洗后切分為2塊,一塊器官組織稱重后剪成小碎片,放入玻璃勻漿器內(nèi)勻漿,取各器官勻漿液100 μL放入96孔培養(yǎng)板內(nèi),用Maestro活體成像系統(tǒng)進(jìn)行成像,根據(jù)各器官勻漿液的平均熒光和各器官重量對(duì)各器官內(nèi)QD800熒光行半定量分析。同時(shí)將各器官另一塊組織用冰凍切片包埋劑包埋并速凍,在-20 ℃下連續(xù)切割為7 μm厚的組織切片,每兩張連續(xù)的冰凍切片中,一張行常規(guī)HE染色,另一張冰凍組織切片在LSCM下觀察QD800在組織中的分布情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 13.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以x±s表示,對(duì)兩均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn),對(duì)3個(gè)均數(shù)以上間的比較采用方差分析,P

2 結(jié)果

2.1 QD800-EGFR mAb探針的制備和純化

收集純化的QD800-EGFR mAb探針樣本,按照產(chǎn)品說明書上提供的在550 nm下的消光系數(shù)ε550=1.7×106(mol·L-1)-1cm-1,以及在550 nm下測得的A為

3.442,l=1 cm,計(jì)算得到最終純化的QD800-EGFR mAb探針濃度為2.025 μmol·L-1。

2.2 QD800-EGFR mAb探針體外標(biāo)記BcaCD885活

細(xì)胞

在LSCM下,實(shí)驗(yàn)組BcaCD885細(xì)胞膜上可見明顯的QD800紅色熒光,對(duì)照組Ⅰ和對(duì)照組Ⅱ的BcaCD885細(xì)胞均未觀察到QD800的熒光(圖1)。

2.3 腫瘤活體可視化成像

裸鼠頦-頸交界處皮下接種BcaCD885細(xì)胞1周后即可見明顯的腫瘤生長,12只裸鼠全部成瘤。3周后腫瘤最大直徑達(dá)到0.8~1.0 cm時(shí)開始實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組在尾靜脈注射QD800-EGFR mAb探針15 min后腫瘤部位出現(xiàn)明顯的熒光信號(hào),30 min~6 h時(shí)腫瘤的熒光信號(hào)最完整,與腫瘤大小對(duì)應(yīng),在9 h時(shí)觀察到腫瘤的熒光成像明顯變小,24 h時(shí)只有很小的熒光成像(圖2)。30 min~6 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組熒光信噪比較高,9 h時(shí)熒光信噪比明顯降低,24 h時(shí)熒光信噪比接近基線水平(圖3)。對(duì)照組只在15 min時(shí)腫瘤部位可檢測到微弱熒光信號(hào),可能是BcaCD885癌細(xì)胞對(duì)QD800-EGFR mAb非特異性吞噬所導(dǎo)致,但30 min~24 h時(shí)未檢測到明顯區(qū)別于背景熒光的熒光信號(hào)(圖2、3)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組裸鼠肝脾相對(duì)應(yīng)的部位在靜脈注射QD800-EGFR mAb探針后15 min可見明顯的熒光信號(hào),一直持續(xù)到24 h(圖2)。

2.4 QD800-EGFR mAb探針的體內(nèi)分布和器官的組

織檢查

在3 h和24 h實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組成像完畢后,在光鏡下觀察腫瘤的HE染色切片均可見大量癌細(xì)胞,顯示腫瘤生長良好(圖4)。在LSCM下觀察腫瘤和各器官的冰凍組織切片可見:3 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的肝、脾組織以及實(shí)驗(yàn)組腫瘤中均有大量QD800聚集,左右腎組織中可見有散在QD800。在24 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的肝、脾組織中有大量QD800聚集,左右腎組

織和實(shí)驗(yàn)組腫瘤中可見有散在QD800(圖5)。在3 h和24 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的心、腦、腸、肺、胃和對(duì)照組腫瘤中均未見有明顯的QD800(圖5)。

cinoma

在3 h和24 h各器官組織勻漿的熒光半定量分析結(jié)果見圖6。由圖6可見,在3 h和24 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組肝中QD800的平均熒光均最高,顯著高于其他器官(P

均熒光在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>

0.05)。

3 討論

目前對(duì)癌癥成像檢測較好的方法如CT、MRI等傳統(tǒng)方法均不適合臨床醫(yī)師在術(shù)中對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)可視化檢查。近年來基于納米技術(shù)發(fā)展起來的NIRF-QDs在對(duì)體內(nèi)癌細(xì)胞的直接可視化成像檢測顯示出巨大的發(fā)展前景[1-5]。表面生物功能化的QDs標(biāo)記活

細(xì)胞后,在實(shí)驗(yàn)檢測所需濃度范圍內(nèi)對(duì)細(xì)胞沒有毒性,不影響活細(xì)胞的生長、增殖、凋亡和分化[3,8-10]。由于NIRF-QDs具有獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì),同時(shí)QDs作為納米粒還具有易于表面修飾連接和易于穿透腫瘤新生血管到達(dá)癌細(xì)胞的性質(zhì),因此,QDs在癌癥個(gè)體化手術(shù)治療方面顯示出獨(dú)一無二的優(yōu)勢[3-10]。

本研究體外結(jié)果表明:QD800不能與BcaCD885細(xì)胞結(jié)合,QD800-EGFR mAb探針能與BcaCD885細(xì)胞結(jié)合,但不能夠與被EGFR mAb封閉EGFR后的BcaCD885細(xì)胞結(jié)合,這就證明了mAb與QD800連接后,EGFR mAb的免疫活性沒有改變,QD800-EGFR mAb探針能通過特異性免疫識(shí)別BcaCD885細(xì)胞表達(dá)

的EGFR,從而使QD800結(jié)合到細(xì)胞表面。

筆者選擇高表達(dá)EGFR的BcaCD885細(xì)胞移植于頭頸部進(jìn)行活體可視化成像研究,主要是因?yàn)椋?)納米粒QDs進(jìn)入血液后易被體內(nèi)的單核吞噬系統(tǒng)細(xì)胞作為異物識(shí)別而吞噬,從而大量聚集于含單核吞噬系統(tǒng)細(xì)胞豐富的肝脾等器官,這對(duì)軀體部腫瘤的成像產(chǎn)生很大的干擾,但對(duì)頭頸部的成像無干擾,因此頭頸部是QDs可視化成像較理想的部位;2)各種靶向性探針經(jīng)靜脈注射后對(duì)腫瘤的靶向性本身與腫瘤的生長部位也密切相關(guān);3)頭頸部惡性腫瘤大多為鱗狀細(xì)胞癌,而90%以上的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞高表達(dá)EGFR[6-7],以EGFR為靶點(diǎn)用QDs進(jìn)行可視化

成像對(duì)頭頸部鱗狀細(xì)胞癌具有廣泛的適用性。

本研究基于頭頸部鱗狀細(xì)胞癌高表達(dá)EGFR為靶點(diǎn),用靜脈途徑注射QD800-EGFR mAb探針,檢查表明:QD800-EGFR mAb在體內(nèi)能通過EGFR mAb作為橋梁對(duì)表達(dá)EGFR的BcaCD885細(xì)胞靶向結(jié)合,即QD800的熒光能代表BcaCD885細(xì)胞的存在,QD800與細(xì)胞結(jié)合后的熒光在體外能夠清楚可見。本研究中在注射QD800-EGFR mAb探針15 min后能夠看到清楚的成像,但在30 min能檢測到較15 min熒光度更高和更完整的腫瘤成像,這種高熒光度能完整顯示腫瘤的成像,但是30 min~6 h無明顯變化,在9 h時(shí)腫瘤成像明顯變小,熒光度也明顯減低,提示用QD800-EGFR mAb探針行頭頸部鱗狀細(xì)胞癌個(gè)體化成像檢測的最佳時(shí)間為靜脈注射QD800-EGFR mAb探針后30 min~6 h這一時(shí)間段內(nèi),隨著時(shí)間的推移,在24 h時(shí)腫瘤成像進(jìn)一步變小,熒光度也更低。

前期研究也表明:在皮膚屏障存在的情況下,QD800標(biāo)記癌細(xì)胞后能可視化成像檢測到104個(gè)癌細(xì)胞,比目前的CT和MRI對(duì)最小癌灶檢測的敏感性提高了100倍,但如果在實(shí)際手術(shù)中,由于腫瘤暴露在開放的創(chuàng)面下,其檢測的敏感性將會(huì)進(jìn)一步提高[11]。Gao等[12]預(yù)測NIRF-QDs標(biāo)記癌細(xì)胞后能可視化檢測

到10~100個(gè)細(xì)胞的水平。隨著更高質(zhì)量、更強(qiáng)組織穿透力QDs的合成和光學(xué)成像技術(shù)的不斷發(fā)展,在暴露的創(chuàng)面下QDs對(duì)癌細(xì)胞的可視化成像檢測有望達(dá)到單個(gè)細(xì)胞水平,以后臨床醫(yī)師只需佩帶一個(gè)很小的激發(fā)光源探頭和近紅外光接受器,就可在手術(shù)中對(duì)腫瘤進(jìn)行真正“量體裁衣”的個(gè)體化手術(shù)切除。

目前對(duì)QD800-EGFR mAb探針進(jìn)入體內(nèi)后的代謝過程還不清楚,本研究結(jié)果可見:靜脈注射QD800-EGFR mAb探針后15 min~24 h,肝脾相應(yīng)部位均顯示出清楚的成像,提示肝、脾內(nèi)一直有大量QD800聚集。在注射QD800-EGFR mAb探針3 h和24 h后,QD800在肝、脾組織中分布最多,其次是腎,而心、腦、腸、肺、胃和對(duì)照組腫瘤中均未見有明顯QD800分布,但在3 h時(shí)實(shí)驗(yàn)組腫瘤中QD800顯著高于24 h時(shí)。

本研究結(jié)果表明:QD800-EGFR mAb探針靜脈注射后對(duì)高表達(dá)EGFR的頭頸鱗狀細(xì)胞癌能進(jìn)行清楚的可視化個(gè)體成像檢測,在非侵入可視化成像研究頭頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展和個(gè)體化治療等方面有著巨大的發(fā)展前景。但QD800-EGFR mAb探針進(jìn)入體內(nèi)后在肝、脾組織中大量聚集。如何減少Q(mào)D800-EGFR mAb探針進(jìn)入體內(nèi)后在肝、脾組織中聚集,以及研究如何代謝和清除是今后研究的重要方向。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Bentolila LA, Ebenstein Y, Weiss S. Quantum dots for in vivo

small-animal imaging[J]. J Nucl Med, 2009, 50(4):493-496.

[2] Ciarlo M, Russo P, Cesario A, et al. Use of the semiconductor

nanotechnologies “quantum dots” for in vivo cancer imaging[J].

Recent Pat Anticancer Drug Discov, 2009, 4(3):207-215.

[3] Michalet X, Pinaud FF, Bentolila LA, et al. Quantum dots for live

cells , in vivo imaging , and diagnostics[J] . Science, 2005, 307(5709):

538-544.

[4] Aswathy RG, Yoshida Y, Maekawa T, et al. Near-infrared quantum

dots for deep tissue imaging[J]. Anal Bioanal Chem , 2010, 397(4):

1417-1435.

[5] Jiang W, Singhal A, Kim BYS, et al. Assessing near-infrared quan-

tum dots for deep tissue, organ, and animal imaging applications

[J]. J Assoc Lab Autom, 2008, 13(1):6-12.

[6] Rogers SJ, Harrington KJ, Rhys-Evans P, et al. Biological signi-

ficance of c-erbB family oncogenes in head and neck cancer[J].

Cancer Metastasis Rev, 2005, 24(1):47-69.

[7] Kalyankrishna S, Grandis JR. Epidermal growth factor receptor

biology in head and neck cancer[J]. J Clin Oncol, 2006, 24(17):

2666-2672.

[8] 楊凱, 曹雨庵, 李志剛, 等. 肽段-量子點(diǎn)對(duì)鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞成

瘤及淋巴轉(zhuǎn)移能力影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[J]. 中華口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2010,

45(5):299-302.

Yang Kai, Cao Yu’an, Li Zhigang, et al. Effect of peptide-con-

jugated quantum dots on the tumorigenicity and lymph node meta-

stasis of human tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113

and mouse uterine cervix carcinoma U14 in vivo[J]. Chin J Sto-

matol, 2010, 45(5):299-302.

[9] Jaiswal JK, Mattoussi H, Mauro JM, et al. Long-term multiple co-

lor imaging of live cells using quantum dot bioconjugates[J]. Nat

Biotechnol, 2003, 21(1):47-51.

[10] Sun D, Yang K, Zheng G, et al. Study on effect of peptide-conju-

gated near-infrared fluorescent quantum dots on the clone forma-

tion, proliferation, apoptosis, and tumorigenicity ability of human

buccal squamous cell carcinoma cell line BcaCD885[J]. Int J Na-

nomedicine, 2010, 5:401-405.

[11] Yang K, Cao YA, Shi C, et al. Quantum dot-based visual in vivo

imaging for oral squamous cell carcinoma in mice[J]. Oral Oncol,

2010, 46(12):864-868.

[12] Gao X, Cui Y, Levenson RM, et al. In vivo cancer targeting and

干丝袜人妻中文字幕| 国产午夜福利久久久久久| 欧美日韩在线观看h| 日日撸夜夜添| 久久6这里有精品| 午夜激情欧美在线| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美最黄视频在线播放免费| 高清午夜精品一区二区三区 | 99久久无色码亚洲精品果冻| 免费看av在线观看网站| 日韩成人伦理影院| 亚洲av中文av极速乱| 久久久久久久久久黄片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 九九爱精品视频在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 毛片女人毛片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 永久网站在线| 少妇的逼好多水| 俺也久久电影网| 九九爱精品视频在线观看| 欧美激情久久久久久爽电影| avwww免费| 搡老妇女老女人老熟妇| 色视频www国产| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产极品精品免费视频能看的| 丰满的人妻完整版| 男插女下体视频免费在线播放| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲国产精品合色在线| 在线观看一区二区三区| 国产精品久久视频播放| 观看免费一级毛片| av在线蜜桃| 在线免费观看的www视频| 美女内射精品一级片tv| 亚洲国产精品国产精品| 成年女人看的毛片在线观看| 国产av不卡久久| 国产精品久久视频播放| 欧美一级a爱片免费观看看| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品1区2区在线观看.| 免费观看在线日韩| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 天堂网av新在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久精品夜色国产| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产精品永久免费网站| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 99热这里只有是精品50| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品一区二区性色av| avwww免费| 九色成人免费人妻av| 久久6这里有精品| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 亚洲av二区三区四区| 午夜福利在线在线| 天堂动漫精品| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久草成人影院| 亚洲图色成人| a级一级毛片免费在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 美女大奶头视频| АⅤ资源中文在线天堂| 嫩草影院入口| 久久久色成人| 亚洲成人久久爱视频| 内地一区二区视频在线| 亚洲欧美成人精品一区二区| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 欧美bdsm另类| 亚洲av免费在线观看| 两个人视频免费观看高清| 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲av不卡在线观看| 人妻久久中文字幕网| 可以在线观看的亚洲视频| 久久久久国内视频| 美女 人体艺术 gogo| 精品午夜福利视频在线观看一区| 精品久久久噜噜| 特级一级黄色大片| 午夜激情欧美在线| 99热这里只有是精品50| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲成人av在线免费| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 亚洲成人久久性| 日本 av在线| av免费在线看不卡| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 久久精品国产清高在天天线| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲av一区综合| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品一区www在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 赤兔流量卡办理| 在线观看免费视频日本深夜| 免费看a级黄色片| 深夜精品福利| 日本免费a在线| 性欧美人与动物交配| 成人欧美大片| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲人成网站在线播| 黄色日韩在线| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产精品一二三区在线看| 内射极品少妇av片p| 久久精品国产自在天天线| 亚洲精品久久国产高清桃花| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久人人精品亚洲av| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲专区国产一区二区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久草成人影院| 国语自产精品视频在线第100页| 日日撸夜夜添| 国产精品一二三区在线看| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产av不卡久久| 国产日本99.免费观看| 国产伦在线观看视频一区| 黄片wwwwww| 久久午夜福利片| 亚洲av成人精品一区久久| ponron亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 美女黄网站色视频| 午夜激情欧美在线| 小说图片视频综合网站| 综合色av麻豆| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日本成人三级电影网站| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久色成人| 国产毛片a区久久久久| 99热网站在线观看| 韩国av在线不卡| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲欧美成人精品一区二区| 精品乱码久久久久久99久播| a级毛色黄片| 黄色一级大片看看| 国产精品日韩av在线免费观看| 最新在线观看一区二区三区| 国产视频一区二区在线看| 国产av不卡久久| 亚洲一区高清亚洲精品| 免费在线观看影片大全网站| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 性插视频无遮挡在线免费观看| 成人亚洲精品av一区二区| 赤兔流量卡办理| eeuss影院久久| 欧美成人一区二区免费高清观看| 色5月婷婷丁香| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲国产精品成人久久小说 | eeuss影院久久| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲精品456在线播放app| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 五月伊人婷婷丁香| 久久久久九九精品影院| 成人永久免费在线观看视频| 国产精品人妻久久久影院| 可以在线观看的亚洲视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 淫秽高清视频在线观看| 一本精品99久久精品77| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久久国产成人免费| 欧美+日韩+精品| 在线免费观看的www视频| 99热这里只有是精品在线观看| av天堂中文字幕网| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲丝袜综合中文字幕| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 男插女下体视频免费在线播放| 中文资源天堂在线| 亚洲综合色惰| 国产精品伦人一区二区| 久久热精品热| 亚洲精品久久国产高清桃花| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| av在线观看视频网站免费| 国产成人影院久久av| 久久久久久久久中文| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲美女搞黄在线观看 | 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 最近中文字幕高清免费大全6| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| av国产免费在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 成人永久免费在线观看视频| 波多野结衣高清作品| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 最后的刺客免费高清国语| 久久久久久久久中文| 99热网站在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日韩欧美精品v在线| 99久久精品国产国产毛片| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲av成人av| 在线播放国产精品三级| 成人三级黄色视频| 国产成人aa在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久久精品94久久精品| 淫妇啪啪啪对白视频| 日本色播在线视频| 最近的中文字幕免费完整| 一个人看的www免费观看视频| 国国产精品蜜臀av免费| av在线老鸭窝| avwww免费| 久久人人爽人人片av| 成人特级黄色片久久久久久久| 精品免费久久久久久久清纯| 美女被艹到高潮喷水动态| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 99热这里只有是精品在线观看| 永久网站在线| 欧美成人一区二区免费高清观看| 婷婷亚洲欧美| 69人妻影院| 可以在线观看毛片的网站| 精品国产三级普通话版| 秋霞在线观看毛片| 12—13女人毛片做爰片一| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产精品日韩av在线免费观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲经典国产精华液单| 嫩草影院新地址| 日韩一区二区视频免费看| 香蕉av资源在线| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲成人久久性| 久久午夜福利片| 久久久久久久久久成人| 色综合站精品国产| 国产 一区 欧美 日韩| 黄片wwwwww| aaaaa片日本免费| 国产午夜福利久久久久久| 久久韩国三级中文字幕| 又黄又爽又免费观看的视频| 久久综合国产亚洲精品| 看黄色毛片网站| 日韩欧美三级三区| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 婷婷精品国产亚洲av在线| 最近在线观看免费完整版| 在线a可以看的网站| 免费大片18禁| 少妇的逼水好多| 97超视频在线观看视频| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久国产乱子免费精品| 桃色一区二区三区在线观看| 97碰自拍视频| 美女 人体艺术 gogo| 不卡一级毛片| 一区二区三区免费毛片| av天堂中文字幕网| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美+日韩+精品| 校园春色视频在线观看| 黄片wwwwww| 啦啦啦啦在线视频资源| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 午夜精品在线福利| 亚洲一区二区三区色噜噜| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲av二区三区四区| 日本a在线网址| 少妇的逼水好多| 久久精品影院6| 十八禁国产超污无遮挡网站| 97超视频在线观看视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 中出人妻视频一区二区| 婷婷色综合大香蕉| 色av中文字幕| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产亚洲欧美98| 老熟妇仑乱视频hdxx| 99久国产av精品国产电影| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产成人一区二区在线| 深爱激情五月婷婷| 欧美激情国产日韩精品一区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99热这里只有是精品50| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品一及| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲人成网站高清观看| 日韩欧美三级三区| 欧美一级a爱片免费观看看| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品一及| 99热这里只有是精品50| 长腿黑丝高跟| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久久久久国产a免费观看| 成人综合一区亚洲| 亚洲精品色激情综合| 国产 一区 欧美 日韩| 久久久久久伊人网av| 精品久久久久久成人av| 男女下面进入的视频免费午夜| 特大巨黑吊av在线直播| 欧美日韩精品成人综合77777| 成年女人毛片免费观看观看9| 色在线成人网| 桃色一区二区三区在线观看| 久久国产乱子免费精品| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产成年人精品一区二区| 国产 一区 欧美 日韩| 高清日韩中文字幕在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲av.av天堂| 欧美国产日韩亚洲一区| 免费av毛片视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | av专区在线播放| 九色成人免费人妻av| 99热精品在线国产| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 日本黄色片子视频| 五月伊人婷婷丁香| 久久久久久久久久久丰满| 丰满的人妻完整版| 国产成人a区在线观看| 免费电影在线观看免费观看| 国产精品久久久久久久久免| 男女啪啪激烈高潮av片| 最后的刺客免费高清国语| 午夜老司机福利剧场| 亚洲精品国产av成人精品 | 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲国产精品久久男人天堂| 美女大奶头视频| 99久国产av精品国产电影| 亚洲av二区三区四区| 日日干狠狠操夜夜爽| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲综合色惰| 性欧美人与动物交配| 精品一区二区三区人妻视频| 中国美女看黄片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 色哟哟·www| 国内精品久久久久精免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 岛国在线免费视频观看| 人人妻人人看人人澡| 国产精品三级大全| 联通29元200g的流量卡| 国产成人91sexporn| 晚上一个人看的免费电影| 男女啪啪激烈高潮av片| 国模一区二区三区四区视频| 国产午夜精品论理片| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 女人被狂操c到高潮| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲av免费在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 成年女人永久免费观看视频| 特级一级黄色大片| 国产精品久久视频播放| 人妻夜夜爽99麻豆av| 三级毛片av免费| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产单亲对白刺激| 国产精品久久久久久精品电影| 男女那种视频在线观看| 九九热线精品视视频播放| 看黄色毛片网站| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 99热这里只有是精品50| 一级毛片电影观看 | 亚洲国产精品成人久久小说 | 免费大片18禁| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 男插女下体视频免费在线播放| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 丝袜喷水一区| 成年女人永久免费观看视频| 国产探花极品一区二区| 亚洲五月天丁香| 高清午夜精品一区二区三区 | 看黄色毛片网站| 天美传媒精品一区二区| 婷婷精品国产亚洲av| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成人特级黄色片久久久久久久| 能在线免费观看的黄片| 久久国产乱子免费精品| 国产在视频线在精品| 五月玫瑰六月丁香| 尾随美女入室| 午夜福利在线观看吧| 国产视频一区二区在线看| av女优亚洲男人天堂| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 一个人看视频在线观看www免费| 毛片一级片免费看久久久久| 成年女人看的毛片在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 99国产极品粉嫩在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品av视频在线免费观看| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲av成人av| 欧美激情国产日韩精品一区| 99riav亚洲国产免费| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲国产精品sss在线观看| 校园春色视频在线观看| 国产男人的电影天堂91| 国产伦一二天堂av在线观看| 中国美女看黄片| 久久久久久九九精品二区国产| 干丝袜人妻中文字幕| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 男女那种视频在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久久久国产网址| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲自拍偷在线| 又爽又黄a免费视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产成人精品久久久久久| 欧美色欧美亚洲另类二区| 热99在线观看视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 91在线精品国自产拍蜜月| 成人特级黄色片久久久久久久| 热99re8久久精品国产| 亚洲成人中文字幕在线播放| 99热这里只有是精品50| 免费看美女性在线毛片视频| 插逼视频在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| av国产免费在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 久久综合国产亚洲精品| 国产精品久久久久久久电影| 午夜激情福利司机影院| 99久久精品热视频| 久久久久久久久中文| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久99热6这里只有精品| 一进一出好大好爽视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲内射少妇av| 99久久精品一区二区三区| 偷拍熟女少妇极品色| 女同久久另类99精品国产91| 久久国内精品自在自线图片| 悠悠久久av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 99精品在免费线老司机午夜| а√天堂www在线а√下载| 不卡一级毛片| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产高清视频在线观看网站| 免费看光身美女| 老司机影院成人| 亚洲自拍偷在线| 亚洲人成网站高清观看| 男女之事视频高清在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 极品教师在线视频| 久久精品影院6| 黄色配什么色好看| 日韩亚洲欧美综合| 久久精品国产自在天天线| 精品国内亚洲2022精品成人| 日本爱情动作片www.在线观看 | 男人狂女人下面高潮的视频| 国产不卡一卡二| 久久精品国产亚洲av天美| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲人成网站高清观看| 哪里可以看免费的av片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 床上黄色一级片| 国产精品野战在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 午夜日韩欧美国产| 亚洲最大成人av| 深爱激情五月婷婷| 天天一区二区日本电影三级| 美女内射精品一级片tv| 国产一级毛片七仙女欲春2| 男插女下体视频免费在线播放| av在线蜜桃| 美女 人体艺术 gogo| 国产三级在线视频| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 色av中文字幕| 日韩制服骚丝袜av| 国产色爽女视频免费观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 国产一区二区在线av高清观看| 欧美高清成人免费视频www| 欧美一区二区亚洲| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产在视频线在精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | www.色视频.com| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产精品人妻久久久影院| 波多野结衣巨乳人妻| 91久久精品国产一区二区三区| 国产伦在线观看视频一区| 久久韩国三级中文字幕| 在线天堂最新版资源| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产日本99.免费观看| 成人国产麻豆网| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 美女黄网站色视频| 日韩一区二区视频免费看| 久久综合国产亚洲精品| 白带黄色成豆腐渣| 天美传媒精品一区二区| 热99re8久久精品国产| 麻豆一二三区av精品| 91在线精品国自产拍蜜月| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 搡女人真爽免费视频火全软件 | 日产精品乱码卡一卡2卡三| 晚上一个人看的免费电影| 一a级毛片在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 99热网站在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 免费观看人在逋| 亚洲av二区三区四区| 久久久色成人| 男人舔奶头视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 精品乱码久久久久久99久播| 成人精品一区二区免费| 亚洲av熟女| 成年女人看的毛片在线观看| 99热6这里只有精品| 日韩欧美精品v在线| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲内射少妇av| 国产成人freesex在线 | 国产视频一区二区在线看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 天美传媒精品一区二区|