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關(guān)鍵詞 生物技術(shù) 創(chuàng)新型 創(chuàng)業(yè)型 人才培養(yǎng)
中圖分類(lèi)號(hào):G424 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
21世紀(jì)是生物的世紀(jì),我國(guó)目前無(wú)論是生物技術(shù)的研究及產(chǎn)品開(kāi)發(fā)人才,存在嚴(yán)重不足。在用人單位求賢若渴的同時(shí),大量生物技術(shù)畢業(yè)生卻不能找到合適的崗位,校園里以傳統(tǒng)教學(xué)方法培養(yǎng)出來(lái)的應(yīng)試人才不能滿足企業(yè)對(duì)人才的要求。隨著國(guó)家高等教育改革的不斷深化和當(dāng)今社會(huì)發(fā)展對(duì)人才的需求,高等院校培養(yǎng)人才的目標(biāo)和模式也面臨挑戰(zhàn)。生物技術(shù)是應(yīng)用型學(xué)科,與日常生活及生產(chǎn)實(shí)踐聯(lián)系密切,因此,如何培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力及創(chuàng)新意識(shí),要在本科培養(yǎng)計(jì)劃中扮演重要角色,同時(shí)要提供良好的條件和各種實(shí)踐平臺(tái),讓學(xué)生多接觸社會(huì),了解社會(huì),為日后的創(chuàng)業(yè)撒下種子。近年來(lái),我們結(jié)合湖北省“戰(zhàn)略產(chǎn)業(yè)人才培養(yǎng)計(jì)劃”,對(duì)生物技術(shù)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)型人才的培養(yǎng)模式進(jìn)行了探索與實(shí)踐,并取得一定的經(jīng)驗(yàn),現(xiàn)總結(jié)如下,供相關(guān)同行參考。
1 明確的目標(biāo)定位
江漢大學(xué)生命科學(xué)院生物技術(shù)自成立以來(lái)就以服務(wù)武漢,立足湖北,面向全國(guó)為己任,并圍繞“武漢國(guó)家生物產(chǎn)業(yè)基地”的建立和發(fā)展需求,培養(yǎng)符合武漢及周邊地區(qū)生物技術(shù)企業(yè)要求的應(yīng)用型創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)人才。近年,我院生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)成功申報(bào)了“湖北省戰(zhàn)略產(chǎn)業(yè)人才培養(yǎng)計(jì)劃”,更明確了“創(chuàng)新型”,“創(chuàng)業(yè)型”作為我院生物技術(shù)人才的培養(yǎng)目標(biāo)。
2 彈性的學(xué)分制教學(xué)
科學(xué)合理的課程體系是實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)目標(biāo),構(gòu)建學(xué)生知識(shí)結(jié)構(gòu)和綜合素質(zhì)的前提和保障。根據(jù)國(guó)家高等教育發(fā)展的趨勢(shì)和要求,經(jīng)湖北省教育廳批準(zhǔn),學(xué)校于2011年開(kāi)始實(shí)行學(xué)分制改革,我們同步參考國(guó)家對(duì)生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)的培養(yǎng)方針,結(jié)合本學(xué)院學(xué)科發(fā)展的特點(diǎn),采用彈性學(xué)分制原則,學(xué)生按要求修滿學(xué)分即可申請(qǐng)畢業(yè),學(xué)習(xí)年限在3~5年彈性變動(dòng)。同時(shí),對(duì)以往教學(xué)計(jì)劃中的理論課程進(jìn)行了優(yōu)化和整合,注重引導(dǎo)學(xué)生根據(jù)自身情況和特點(diǎn),主動(dòng)設(shè)計(jì)和選擇主攻方向,給學(xué)生更大的自主選擇空間。在專(zhuān)業(yè)課中,主干課程作為專(zhuān)業(yè)必修課程學(xué)分占全部學(xué)分的26%;專(zhuān)業(yè)選修課學(xué)分占總學(xué)分的22%,并根據(jù)學(xué)院師資隊(duì)伍及科研特色,將設(shè)置的專(zhuān)業(yè)選修課分為生物農(nóng)業(yè)技術(shù)、生物技術(shù)制品兩個(gè)方向的模塊課程供學(xué)生自主選擇,同時(shí)保證每個(gè)模塊中供學(xué)生選擇的課程科目學(xué)分兩倍于學(xué)分要求,每門(mén)課程選課人數(shù)超過(guò)專(zhuān)業(yè)人數(shù)1/3即開(kāi)課。
3 過(guò)硬的教學(xué)質(zhì)量
教學(xué)質(zhì)量是人才培養(yǎng)的核心環(huán)節(jié),我們每年都會(huì)結(jié)合學(xué)科發(fā)展趨勢(shì)和學(xué)院特色,全面修訂教學(xué)大綱,更新和調(diào)整教學(xué)內(nèi)容。其別注意課程內(nèi)容整合,明確每門(mén)課程的講授內(nèi)容和范圍;同時(shí)注意相關(guān)課程之間內(nèi)容的銜接,授課教師間的定期備課交流,避免出現(xiàn)一些學(xué)科交叉知識(shí)點(diǎn)的重復(fù)學(xué)習(xí);每年要求教師修改講授內(nèi)容,努力做到當(dāng)年學(xué)科新知識(shí)及前沿動(dòng)態(tài)在課堂教學(xué)內(nèi)容上有所體現(xiàn)。在課堂教學(xué)方法改革中,鼓勵(lì)教師進(jìn)行各種形式的探索,如“研討式”“PBL式”等各種不同形式的教學(xué)方法被廣泛用于課堂教學(xué)中,改變了過(guò)去傳統(tǒng)的“填鴨式”“滿堂灌”的教學(xué)方法。在很多專(zhuān)業(yè)課程的學(xué)習(xí)中,改變了期末考定成績(jī)的傳統(tǒng)方式,小組討論,辯論賽,口試,專(zhuān)業(yè)綜述寫(xiě)作,外文翻譯等不同環(huán)節(jié)被引入最后成績(jī)?cè)u(píng)定中,并占有一定比重;同時(shí)在期末考試中嘗試開(kāi)卷考試,注重考查學(xué)生根據(jù)已經(jīng)掌握的知識(shí)及使用參考資料,發(fā)現(xiàn),分析,并解決一些專(zhuān)業(yè)問(wèn)題,同時(shí)提出自己的想法和設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn),而不是簡(jiǎn)單地考幾個(gè)需要死記硬背的知識(shí)點(diǎn)。通過(guò)近幾年的實(shí)踐,學(xué)生學(xué)習(xí)熱情和興趣被充分調(diào)動(dòng),課堂氣氛活躍,對(duì)所學(xué)知識(shí)的把握能力也更強(qiáng),在學(xué)習(xí)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,分析問(wèn)題,想辦法解決問(wèn)題也成為一種學(xué)習(xí)習(xí)慣。
4 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)
所有實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行整合和更新,制打破傳統(tǒng)割裂式教學(xué),起用模塊式實(shí)驗(yàn)教學(xué),構(gòu)建新的實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系,把教學(xué)實(shí)驗(yàn)分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和研究性實(shí)驗(yàn)。注重各門(mén)相關(guān)學(xué)科專(zhuān)業(yè)知識(shí)之間的交叉滲透、而且有利于學(xué)生創(chuàng)新思維能力的培養(yǎng),促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法的改進(jìn)、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的綜合利用,進(jìn)而推動(dòng)實(shí)驗(yàn)室管理體制的進(jìn)一步完善。其中基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)160多學(xué)時(shí),包括微生物學(xué),生物化學(xué),遺傳學(xué)等傳統(tǒng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。綜合性實(shí)驗(yàn)包括2個(gè),共140學(xué)時(shí):一個(gè)為80學(xué)時(shí)的生物技術(shù)大實(shí)驗(yàn),涵蓋了生物信息學(xué),基因工程,分子生物學(xué),免疫學(xué),等理學(xué)科目的知識(shí),內(nèi)容豐富,集眾多學(xué)科知識(shí)交叉融合;一個(gè)為生物工程類(lèi)大實(shí)驗(yàn),共60學(xué)時(shí),集合發(fā)酵工程,微生物遺傳與育種,生物技術(shù)中下游技術(shù),化工原理,生物制品工藝學(xué)等工科類(lèi)學(xué)科知識(shí)。通過(guò)這2個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn),使學(xué)生學(xué)會(huì)通過(guò)利用不同學(xué)科知識(shí)和實(shí)驗(yàn)的融合來(lái)完成某個(gè)具體實(shí)驗(yàn)任務(wù),培養(yǎng)其對(duì)所學(xué)知識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作能力的融會(huì)貫通能力;同時(shí),學(xué)生可以通過(guò)第一個(gè)生物技術(shù)大實(shí)驗(yàn)體會(huì)類(lèi)似企業(yè)和科研院校進(jìn)行研發(fā)工作的過(guò)程,通過(guò)工程類(lèi)實(shí)驗(yàn),初步了解生產(chǎn)和研發(fā)部門(mén)工作的區(qū)別。研究性實(shí)驗(yàn)是以學(xué)院教師科研方向?yàn)橐劳?,學(xué)生根據(jù)自己研究興趣,選擇相關(guān)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,在教師指導(dǎo)下,完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),綜合實(shí)驗(yàn)和研究性實(shí)驗(yàn)三種不同層次和培養(yǎng)目的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的開(kāi)設(shè),使實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)現(xiàn)既對(duì)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技能的全面培養(yǎng),又尊重其個(gè)性特點(diǎn)發(fā)展的目標(biāo)。
5 增加實(shí)踐環(huán)節(jié)比重
開(kāi)展實(shí)踐教學(xué)不僅有助于學(xué)生加深對(duì)本專(zhuān)業(yè)知識(shí)的理解,更重要的是可以讓學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際,在實(shí)踐中應(yīng)用和進(jìn)一步把握專(zhuān)業(yè)技能,同時(shí),開(kāi)闊視野,了解在校園里學(xué)到的知識(shí)如何運(yùn)用于生產(chǎn)中,為將來(lái)勝任本職工作打下基礎(chǔ)。我們整個(gè)實(shí)踐部分環(huán)節(jié)占總學(xué)分的30%。實(shí)踐環(huán)節(jié)分為必修和選修兩種,必修為集中性訓(xùn)練,包括以下幾個(gè)實(shí)習(xí)環(huán)節(jié):(1)野外實(shí)習(xí),學(xué)生到野外實(shí)習(xí)基地兩周,學(xué)習(xí)辨認(rèn)各種植物和動(dòng)物及制作標(biāo)本,熟練使用植物檢索表和動(dòng)物圖鑒,初步學(xué)會(huì)撰寫(xiě)調(diào)查報(bào)告;(2)科研訓(xùn)練,以教師科研團(tuán)隊(duì)為依托,學(xué)生自主選擇實(shí)驗(yàn)室和導(dǎo)師,課余時(shí)間分組進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,以小組為單位申報(bào)科學(xué)研究項(xiàng)目,完成開(kāi)題,實(shí)驗(yàn)及答辯。旨在開(kāi)闊科研視野,提高科研興趣;同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力,創(chuàng)新性意識(shí)、分析和解決問(wèn)題的能力;(3)專(zhuān)業(yè)實(shí)習(xí):分校內(nèi)基地和校外基地分別進(jìn)行,校內(nèi)實(shí)習(xí)基地安排學(xué)生進(jìn)行啤酒發(fā)酵、食用菌栽培、肥肝鵝養(yǎng)殖、試管苗的繁育等。校外實(shí)習(xí)基地安排學(xué)生進(jìn)行生產(chǎn)勞動(dòng)、頂崗實(shí)習(xí)、崗位技能訓(xùn)練等。培養(yǎng)學(xué)生認(rèn)真負(fù)責(zé)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德和素質(zhì)。(4)生產(chǎn)實(shí)習(xí):在校外實(shí)習(xí)基地進(jìn)行。生物制藥方向?qū)嵙?xí)要求學(xué)生進(jìn)入相關(guān)企業(yè),熟悉部分生物制品的典型工藝流程和主要設(shè)備、參與主要工序的操作過(guò)程;生物農(nóng)業(yè)方向要求學(xué)生能通過(guò)實(shí)習(xí)期間的學(xué)習(xí)和實(shí)踐,熟悉動(dòng)植物種苗的繁育技術(shù)、參與現(xiàn)代化、集約化、標(biāo)準(zhǔn)化的都市農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。(5)畢業(yè)實(shí)習(xí):畢業(yè)實(shí)習(xí)與畢業(yè)論文相結(jié)合,在校外、內(nèi)實(shí)習(xí)基地進(jìn)行。培養(yǎng)學(xué)生綜合應(yīng)用所學(xué)知識(shí)和技能獨(dú)立解決實(shí)際問(wèn)題的工作能力、同時(shí)也是對(duì)本科四年所學(xué)習(xí)的知識(shí)和培養(yǎng)能力的一種綜合檢驗(yàn)。此外對(duì)于有余力的學(xué)生還設(shè)置了課外創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目實(shí)踐,學(xué)生通過(guò)參加開(kāi)放性實(shí)驗(yàn),學(xué)生科研創(chuàng)新項(xiàng)目,學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目,教師科研項(xiàng)目等方式也可以獲得一定選修學(xué)分。通過(guò)這一系列實(shí)踐活動(dòng),使學(xué)生逐步了解自己所學(xué)知識(shí)和技能在社會(huì)上該如何找切入點(diǎn),同時(shí)也培養(yǎng)了他們良好的溝通協(xié)調(diào)能力和團(tuán)隊(duì)精神。
6 加強(qiáng)院企合作辦學(xué)
鑒于畢業(yè)生就業(yè)基本選擇武漢地區(qū)相關(guān)企業(yè),學(xué)院教師科研項(xiàng)目也與相關(guān)企業(yè)保持密切的合作關(guān)系,學(xué)院與多家企業(yè)建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。邀請(qǐng)企業(yè)中的工程師和專(zhuān)家共同開(kāi)發(fā)和承擔(dān)與企業(yè)生產(chǎn)實(shí)際密切相關(guān)的新課程,如GMP質(zhì)量管理、食品衛(wèi)生檢驗(yàn)、農(nóng)作物新品種選育與種子生產(chǎn)等,供學(xué)生選擇學(xué)習(xí);經(jīng)常邀請(qǐng)企業(yè)家到學(xué)院進(jìn)行相關(guān)講座和交流,從企業(yè)的角度給予學(xué)生專(zhuān)業(yè)導(dǎo)引;院企雙方積極共建實(shí)習(xí)實(shí)踐基地,讓學(xué)生有機(jī)會(huì)到企業(yè)進(jìn)行生產(chǎn)實(shí)踐、企業(yè)科研和崗位技能訓(xùn)練;通過(guò)與企業(yè)的深度合作,使學(xué)生能深入了解企業(yè)文化及對(duì)人才的需求,更加明確自己的發(fā)展方向,在學(xué)校和企業(yè)提供各種學(xué)習(xí),實(shí)踐機(jī)會(huì)中快速成長(zhǎng),將自己培養(yǎng)成符合企業(yè)要求的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人才。
綜上所述,地方本科院校培養(yǎng)的生物技術(shù)人才,應(yīng)該在自己辦學(xué)背景的條件下,充分發(fā)揮自己的特色,在本科四年的各個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)中培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力和創(chuàng)業(yè)意識(shí),使培養(yǎng)出來(lái)的學(xué)生不僅擁有扎實(shí)的學(xué)科知識(shí),很強(qiáng)的動(dòng)手能力和綜合素質(zhì),同時(shí)還具備一定創(chuàng)新能力和創(chuàng)業(yè)熱情。
本文受湖北省教育廳教學(xué)研究項(xiàng)目《生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)產(chǎn)業(yè)人才培養(yǎng)體系的探索與實(shí)踐》(2011248)項(xiàng)目資助
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞 亳菊;生物學(xué)特性;栽培技術(shù);安徽利辛
中圖分類(lèi)號(hào) S681.9.04+.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1007-5739(2014)09-0118-01
亳菊和徽菊、杭菊、滁菊并稱(chēng)中國(guó)四大名菊。亳菊藥用具有散熱、清肝、明目的功能,對(duì)流感風(fēng)熱、頭暈、頭痛等癥狀有較好的冶療作用[1-2]。為了擴(kuò)大亳菊種植面積、提高產(chǎn)量,利辛縣對(duì)種植戶(hù)不斷加大培訓(xùn)力度,提高亳菊栽培技術(shù)水平,一般產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菊在1 500~1 800 kg/hm2。
1 亳菊生物學(xué)特性
屬多年生宿根性單本短日照植物,每天小于10 h的光照,有利于植株現(xiàn)蕾、開(kāi)花。其莖直立。冬季地上部老莖枯死,翌年春季從地下根莖處再萌新芽,高可達(dá)60~100 cm,且分枝多;幼莖綠色,后木質(zhì)化為灰褐色。葉綠色,有細(xì)絨毛、互生,其形狀因品種不同略有區(qū)別。秋季莖頂或葉腋著生頭狀花絮,周緣舌狀,花白色,中央管狀花黃色,也有全為舌狀花或管狀花?;ㄆ?―11月。亳菊是喜溫、喜光、喜肥中藥材作物。肥沃的土壤、充足的光照是高產(chǎn)栽培所必需的條件,其耐寒性較強(qiáng),但怕水澇、水漬,苗期和開(kāi)花期干旱可導(dǎo)致生長(zhǎng)受阻而造成減產(chǎn)。
2 栽培技術(shù)
2.1 品種選擇與選地施肥
亳菊栽植要選用綜合性狀優(yōu)良的京農(nóng)生系列品種為佳。選擇土壤較肥沃和有機(jī)質(zhì)含量高、腐殖質(zhì)、微生物豐富的疏松土壤作為亳菊種植地塊。適時(shí)中耕除草,破除土壤板結(jié)。土壤質(zhì)地黏性較強(qiáng)地塊和低洼地塊、鹽堿地都不適宜種植亳菊,選地時(shí)忌重茬連作。施足基肥:施優(yōu)質(zhì)土雜肥45 t/hm2、餅肥1 500 kg/hm2、復(fù)合肥(15-15-15)450~600 kg/hm2。
2.2 水分管理
土壤適宜濕度:苗期以土壤見(jiàn)干見(jiàn)濕為主,植株長(zhǎng)大后可適當(dāng)控制澆水量,土壤相對(duì)含水量控制在70%~80%為宜,花芽分化期盡量控制水分,植株葉片不萎蔫不澆水。植株有側(cè)芽或幼蕾期,應(yīng)適當(dāng)增加澆水量,防止缺水。澆水次數(shù)與澆水量視天氣而定。澆水時(shí)不能漫灌,以防濕度過(guò)大導(dǎo)致植株萎蔫或死亡。
2.3 繁殖方法
常用繁殖方法有分株繁殖法和扦插繁殖法2種。采用分株繁殖法可在11月收摘后,選擇生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)危害植株帶根挖出,去除其地上莖枝,重新選一塊較肥沃的地塊栽植,栽后施1層土雜肥或細(xì)碎作物秸稈以利保暖越冬。翌年3月下旬至4月初去掉秸稈和扒開(kāi)糞土、澆水,促使幼苗生長(zhǎng),當(dāng)幼苗長(zhǎng)至約15 cm高時(shí),全株挖出,細(xì)分成數(shù)株,栽植于大田,移栽行株距均為40 cm,每穴栽苗1~2株,并封土壓實(shí)澆定根水再封土,一般1 hm2苗圃可產(chǎn)出15 hm2的生產(chǎn)田用苗。
采用扦插繁殖法:在4―5月或6―8月,選擇莖桿粗壯、無(wú)病蟲(chóng)危害的新技中段作插條。剪成10~12 cm的小段,并用植物激素處理后將插條插入苗床封土澆水再封土壓實(shí),行株距控制在行距20 cm,株距6~7 cm為宜,扦插20 d發(fā)根,苗高18~20 cm時(shí)即可移栽大田。
2.4 大田移栽
分株繁殖苗于4―5月、扦插繁殖苗于5―6月移栽。選晴天的傍晚或陰天全天進(jìn)行大田移栽,大田移栽行株距各40 cm挖穴,穴深5~6 cm,每穴栽1~2株,栽后封土壓緊澆定根水后再封土壓實(shí)[3]。
2.5 田間管理
2.5.1 中耕除草。緩苗后,不宜澆水,進(jìn)行中耕松土為主。第1、2次中耕要稍深,表土干,地下濕,易使根下扎,結(jié)合控制水肥,使地上部生長(zhǎng)緩慢,實(shí)現(xiàn)“蹲苗”培育壯苗,否則因生長(zhǎng)過(guò)于茂盛伏天通風(fēng)透光差而易發(fā)生病蟲(chóng)害,造成假旺苗不利高產(chǎn)栽培。第3次中鋤要封根培土,防止植株倒伏,造成減產(chǎn),在每次中鋤時(shí),應(yīng)注意勿傷莖皮,防止病蟲(chóng)發(fā)生或螞蟻加重危害,影響產(chǎn)量。中鋤次數(shù)應(yīng)視氣候而定,每次大雨之后土地板結(jié)時(shí),均要淺鋤1次,保持土壤內(nèi)空氣暢通,生長(zhǎng)良好,并能減輕病蟲(chóng)發(fā)生及危害和防止倒伏。
2.5.2 追肥。亳菊是喜肥作物,除施足基肥外,生長(zhǎng)期內(nèi)還要追肥3~4次。第1次追肥在移栽返青后,追施尿素150~225 kg/hm2促苗。第2次追肥在植株分枝時(shí),可施尿素75 kg/hm2。第3次施肥在現(xiàn)蕾期,追施尿素75~90 kg/hm2。栽后每次摘心要及時(shí)澆施0.5%尿素水溶液1 500 kg/hm2。8―9月孕蕾時(shí)及早追施尿素300 kg/hm2和優(yōu)質(zhì)施土雜肥15 t/hm2。10月現(xiàn)蕾后葉面噴施0.3%磷酸二氫鉀溶液,每15 d噴施1次。
2.5.3 去除頂心。當(dāng)苗高25 cm時(shí),進(jìn)行第1次摘心,選晴天摘去頂心1~2 cm。以后每隔15 d摘心1次,在大暑節(jié)氣后要停止,防止分枝過(guò)多,造成莖桿細(xì)弱營(yíng)養(yǎng)不良,花頭變小影響產(chǎn)量和質(zhì)量。
2.6 主要病蟲(chóng)害防治
常見(jiàn)的病害有根腐病、霜霉病、褐斑病等,蟲(chóng)害有地下害蟲(chóng)、蚜蟲(chóng)、雜食性害蟲(chóng)。如果植株發(fā)生根腐病、霜霉病、褐斑病時(shí),要在發(fā)病初期及時(shí)用90%杜邦克露可濕性粉劑800倍液或80%多菌靈粉劑1 500 g/hm2或80%多菌靈超微粉1 500 g/hm2防治[4]。地下害蟲(chóng)防冶方法是移栽前用5%毒死蜱顆?;?%辛硫磷顆粒30 kg/hm2拌細(xì)土防治蚜蟲(chóng),在蚜蟲(chóng)發(fā)生期用10%吡蟲(chóng)啉可濕性粉劑300~450 g/hm2,或25%吡蚜酮可濕性粉劑300 g/hm2對(duì)水450 kg/hm2噴霧。防治斜紋夜蛾等雜食性害蟲(chóng)可選用48%樂(lè)斯本或48%毒死蜱450~600 mL/hm2對(duì)水450 kg/hm2噴霧,也可選用2.5%高效氯氟氰菊酯375 mL/hm2或杜邦康寬300 g/hm2對(duì)水450 kg/hm2噴霧防治。
2.7 采收加工
一般在霜降至立冬采收,以花心散開(kāi)2/3時(shí)為采收適期。采收早產(chǎn)量低,采收遲質(zhì)量差,經(jīng)濟(jì)價(jià)值低。采收要在晴天進(jìn)行,以利采收后及時(shí)加工,防止陰雨天造成加工困難,花朵腐爛、變色、變質(zhì)。亳菊傳統(tǒng)的加工方法如下:在盛花期,花瓣潔白時(shí)連莖桿一起收下,扎成小捆,倒掛于加工室內(nèi)通風(fēng)干燥處晾干,不能在陽(yáng)光下曝曬,否則質(zhì)差價(jià)低。到8成干時(shí)即可將花摘下,置加工房?jī)?nèi)用硫黃熏白,然后攤曬1 d至干燥裝箱。亳州貢菊的加工方法也可采用以下方法:采后花朵在直烘房?jī)?nèi)烘干,以亳州優(yōu)質(zhì)桐樹(shù)木材作燃料,烘房溫度控制在40~50 ℃,將攤于蘆葦席或竹席上,烘至花色潔白時(shí)從烘房?jī)?nèi)取出,置于干燥通風(fēng)處涼干。
3 參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞: 新型綠地城市; 生活污水; 處理技術(shù)
中圖分類(lèi)號(hào):F291.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):
前言
水是人類(lèi)賴(lài)以生存的寶貴資源, 沒(méi)有水生命就不存在。隨著世界人口不斷的增加和工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展, 用水量的逐年增加。地球上水的總量不少, 但能供人類(lèi)利用的水量卻不多, 僅占總水量的0.009 2%。對(duì)于我國(guó)來(lái)說(shuō)是屬于世界上13個(gè)最貧水的國(guó)家之一, 人均占有水量?jī)H為世界人均量的1 /4, 因此珍惜水資源, 節(jié)約用水, 充分利用各種水就顯得更加重要。
城市生活污水主要指受到有機(jī)物或含磷物質(zhì)污染的水體,它的水質(zhì)污染指標(biāo)主要是氨氮和有機(jī)物濃度。生活污水的一般處理工藝主要是基于水中的濁度和細(xì)菌的去除而提出的,有混凝、沉淀、過(guò)濾和消毒等,該處理工藝僅能有效地去除水中的懸浮物、膠體雜質(zhì)和細(xì)菌,而對(duì)多數(shù)有機(jī)物的去除能力較低。所以常規(guī)處理工藝已經(jīng)不能達(dá)到現(xiàn)有再生水指標(biāo),為此國(guó)內(nèi)外對(duì)微污染水綜合處理進(jìn)行了深入的研究,許多新興工藝應(yīng)運(yùn)而生。本文,筆者主要論述分層填料土壤毛管滲系統(tǒng)在城市污水處理中的應(yīng)用。
一、城市生活污水的來(lái)源和主要特點(diǎn)
生活污水主要來(lái)自家庭、商業(yè)、機(jī)關(guān)學(xué)校、旅游服務(wù)業(yè)及其他城市公用設(shè)施。城市生活污水污染物含量主要是有機(jī)物, 如淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)、纖維素、糖類(lèi)、礦物油等, 其中CODCr (化學(xué)需氧量) 、BODs (生物需氧量) 、TKN (凱氏氮) 、TN (總氮) 、TP (總磷) 也較高。生活污水經(jīng)一級(jí)物理處理、二級(jí)生化處理后CODCr、BODs、TKN、NH3 - N等大幅度降低, 但TN、TP仍較高, 排入水體后易造成水體的富營(yíng)養(yǎng)化, 使藻類(lèi)大量生長(zhǎng)繁殖, 造成赤潮和水華。藻類(lèi)生物原生質(zhì)的組成是C106 H263O110N16 P, 可知水中含少量的氮、磷就能促使藻類(lèi)大量生長(zhǎng), 而當(dāng)藻類(lèi)代謝大量死亡時(shí), 就使水域水體腐敗發(fā)臭水質(zhì)惡化。
二、污水處理的過(guò)程和方法
城市生活污水經(jīng)過(guò)管道收集到污水池,然后進(jìn)行過(guò)濾去除大顆粒污染物,通過(guò)曝氣裝置增加預(yù)處理后污水中溶解氧的含量,提高生物降解能力。
城市污水預(yù)處理。
城市污水中會(huì)含有一些大顆粒的有機(jī)物,特別是廚房污水會(huì)含有一些殘羹剩飯。如果不處理直接進(jìn)行土壤毛管滲濾,一方面增大了生物處理的負(fù)荷,污水的循環(huán)周期較長(zhǎng);另一方面在輸送過(guò)程中可能會(huì)堵塞管道,造成系統(tǒng)的崩潰。通過(guò)過(guò)濾池將水中的大顆粒有機(jī)物過(guò)濾出來(lái),并將其投放到發(fā)酵罐中,收集經(jīng)過(guò)厭氧分解產(chǎn)生的清潔能源沼氣,可用于發(fā)電或生活燃?xì)狻?/p>
分層填料土壤毛管滲濾系統(tǒng)。
土壤毛管滲濾系統(tǒng)(SCWISs)是一種利用土壤及其毛管的滲濾作用處理污水的系統(tǒng),并通過(guò)土壤中所含的各類(lèi)微生物和地表植物的根系等構(gòu)成的生態(tài)系統(tǒng)降解水中有機(jī)污染物。該系統(tǒng)在國(guó)外已經(jīng)大量應(yīng)用,美國(guó)約有36%的農(nóng)村及零星分布的家庭住宅采用了SCWISs處理生活污水;在瑞典、芬蘭和挪威等國(guó)家,約有100多萬(wàn)散居住戶(hù)采用了SCWISs處理生活污水。
生物膜脫氮除磷。
污水通過(guò)布水管進(jìn)入土壤滲濾層,經(jīng)過(guò)預(yù)處理后污水中剩余的污染物(有機(jī)物)濃度相對(duì)較低,減輕生物降解的負(fù)荷。污染物進(jìn)入滲濾層以后,通過(guò)物理、化學(xué)作用由上而下逐級(jí)吸附到土壤顆粒或表層土壤草坪植物發(fā)達(dá)上的根系表面的生物膜上。最終在好氧條件下被分解成CO2和H2O;在厭氧條件下污染物被分解成CH4、N2、有機(jī)酸等。CO2和N2通過(guò)土壤的顆粒間空隙釋放到空氣中,由于污水中有機(jī)物含量比較小,整個(gè)過(guò)程中厭氧呼吸就比較微弱,產(chǎn)生的甲烷氣體就被厭氧微生物自身所消耗了。對(duì)于一般的污水,經(jīng)過(guò)滲濾層的處理和植物的吸收,污水中的硝態(tài)氮幾乎可被全部去除,90%磷能夠被土壤處理系統(tǒng)去除。
三、新型綠地的構(gòu)造
土壤滲濾系統(tǒng)構(gòu)建中常用的是英國(guó)的PPL G lobe滲濾溝技術(shù),其滲濾溝設(shè)計(jì)比較簡(jiǎn)單,但它存在運(yùn)行水力負(fù)荷過(guò)低,占地較大等問(wèn)題。為此國(guó)內(nèi)外開(kāi)展了采用分層填料進(jìn)行土地毛管滲濾系統(tǒng)處理污水的研究,其可增大土壤的滲透系數(shù)和運(yùn)行的水力負(fù)荷,占地面積也較小。據(jù)統(tǒng)計(jì)PPL G lobe滲濾溝技術(shù)的水力負(fù)荷一般不超過(guò)6.60 cm/d,而強(qiáng)化滲濾系統(tǒng)可以達(dá)到10 cm/d。分層土壤毛管滲濾裝置結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1,尺寸為長(zhǎng)×寬×高=2 m×1 m×l m。煤渣經(jīng)人工破碎篩分后,選取粒徑在2~30 mm的煤渣,作為特殊土壤的填料。布水管和集水管由多組均勻排列的PVC管組成,PVC管上按照一定比例和方式打很多孔,周?chē)寐咽鼑乐苟氯芸?。在布水管的下方有一定厚度的粗砂,粗砂下面為不透水的混凝土結(jié)構(gòu),對(duì)布水系統(tǒng)起支撐作用。新型綠地由5部分構(gòu)成?!氨韺印庇奢^肥沃的耕作土壤組成,是草坪植物的生長(zhǎng)層,其上種植綠色期長(zhǎng)的草坪植物“馬尼拉”、“翦股穎”或“早熟禾”等,實(shí)現(xiàn)污水綠地利用。“滲濾層”是污水凈化的主要作用層,微生物在這一層上附著在填料或土壤顆粒上形成生物膜,對(duì)污水中的有害物質(zhì)進(jìn)行生物降解。“防護(hù)層”在不同層分界線處設(shè)置可透水的無(wú)紡布,防止上層土壤下落填入礫石層,破壞它的布水或集水功能?!胺罎B層”位于滲濾床周?chē)?,采用特定防滲材料像素混凝土或有機(jī)聚合材料,其作用是防止污水直接下滲,污染地下水?!凹畬印蔽挥跐B濾系統(tǒng)的最底部,是由10 cm厚度的卵石和集水管構(gòu)成,起到支撐上部體系和構(gòu)建飽水層的作用
四、回收水利用
回收水,主要是指經(jīng)過(guò)處理或部分處理,能夠再次使用的廢水,也被稱(chēng)為再生水。通過(guò)集水管將經(jīng)過(guò)土壤毛管滲濾處理后的合格水體收集起來(lái),用于正常的農(nóng)業(yè)灌溉、工業(yè)的冷卻水等,使生活污水循環(huán)利用。
隨著城市化腳步的不斷加快,綠地的覆蓋面積也是與日俱增。在保持城市綠化面積的同時(shí),該污水處理系統(tǒng)綜合利用了城市綠化的土地資源,解決了土壤毛管滲濾系統(tǒng)的占地問(wèn)題,并且其改良后的滲濾系統(tǒng)運(yùn)行的水力負(fù)荷得到提高。對(duì)于水資源供需矛盾日益緊張、生活污水污染日趨嚴(yán)重的城市地區(qū),新型綠地具有很強(qiáng)的技術(shù)和經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì)。
結(jié)語(yǔ)
生活污水治理是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的工作, 對(duì)于緩解我國(guó)用水壓力, 水體保護(hù), 社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展都有著巨大的現(xiàn)實(shí)意義。多年以來(lái), 我國(guó)的環(huán)境工作者已經(jīng)在此做出了很多卓有成效的工作, 從治污理論、原理的探索到實(shí)際技術(shù)的應(yīng)用與操作, 以及各地檢測(cè)系統(tǒng)的建立都取得了巨大的成就。但同時(shí), 我們也應(yīng)看到, 我國(guó)新型綠地城市生活污水的處理和回用水平在世界上和發(fā)達(dá)國(guó)家還有著不小的差距。全地區(qū)的回用水系統(tǒng), 中水利用系統(tǒng)的建立還處于探索階段, 一些新的治理技術(shù)實(shí)際利用率還偏低, 更好更優(yōu)的治理方法還期待突破,生活污水的經(jīng)濟(jì)利用價(jià)值也很低。這一切都只能讓我們以更大的熱情投入到新技術(shù)的研究與應(yīng)用之中, 更有效率的治理生活污水, 為國(guó)家的經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和社會(huì)進(jìn)步作出貢獻(xiàn)。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞 果桑 ;大十;生物學(xué)特性;栽培技術(shù)
中圖分類(lèi)號(hào) S663.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1007-5739(2012)22-0085-01
果桑為第3代水果資源之一,桑果可以加工成桑椹干、桑椹酒、桑椹果汁等各種營(yíng)養(yǎng)保健食品,風(fēng)味天然,滋補(bǔ)效果較好,深受大眾的喜愛(ài)。果桑新品種大十呈紅紫色至紫黑色,誘人喜愛(ài),質(zhì)地爽脆,既有荔枝的清香,又有楊梅的酸甜味,清甜可口,特別開(kāi)胃,是上佳的天然果品。由于麗水市為中亞熱帶季風(fēng)氣候,氣候溫暖濕潤(rùn),雨量較多,具有明顯的山地立體氣候。年平均氣溫、年均降水量分別為11.5~18.3 ℃、1 400~2 275 mm,平均年日照時(shí)數(shù)、無(wú)霜期分別為1 712~1 825 h、180~280 d。海拔400 m以下地帶,秋季雨水期短,常有秋旱。初夏進(jìn)入梅雨期,降雨集中,常出現(xiàn)洪澇災(zāi)害,盛夏日照強(qiáng),氣溫高,少雨,常出現(xiàn)伏旱。冬季寒冷干燥,北方寒潮南下,多霜凍和冰雪天氣。當(dāng)?shù)?008年從嘉興引進(jìn)果桑新品種大十,通過(guò)引種觀察、試種,取得了成功,現(xiàn)將引種試種情況總結(jié)如下。
1 生物學(xué)特性
果桑新品種大十為桑科桑屬落葉灌木,小枝較細(xì),樹(shù)皮常呈鱗片狀剝落;葉互生,呈卵形,雌雄異株;花果則呈長(zhǎng)圓柱形、球形;熟時(shí)紅紫色至紫黑色,花期、果期分別為3—4、 6月。該品種產(chǎn)果期早,產(chǎn)量高,桑椹一般在4月初開(kāi)花,成熟期比其他品種早7~10 d,桑椹采摘期約1個(gè)月[1-2]。栽種第2年能產(chǎn)桑椹4 500~7 500 kg/hm2,第3年產(chǎn)量可達(dá)15.0~18.0 t/hm2。該品種不但產(chǎn)量高,而且品質(zhì)好,果型大,,無(wú)籽,一般1 kg含有桑椹280粒左右。
2 栽培技術(shù)
2.1 施肥
施肥前開(kāi)深50 cm、寬60 cm的定植溝,回填20 cm的表土,最后在表土上施雞糞30 t/hm2、復(fù)合肥2 250 kg/hm2,或施復(fù)合肥750 kg/hm2、腐熟農(nóng)家肥45 t/hm2。進(jìn)入結(jié)果期的大十果桑樹(shù)冬肥是基礎(chǔ)肥,在桑樹(shù)休眠時(shí)期開(kāi)溝施下,主要作用是改良土壤,提高地力,冬肥以腐熟的家欄肥和土雜肥為主[3-4]。春天桑樹(shù)發(fā)芽,枝葉生長(zhǎng),需要大量的養(yǎng)分。因此,在新梢長(zhǎng)出5~10 cm時(shí),及時(shí)重施速效肥,施復(fù)合肥1 500 kg/hm2+尿素750 kg/hm2+麩肥375 kg/hm2。
2.2 定植
果桑新品種大十的栽植密度以4 995株/hm2為佳,株行距為1 m×2 m。定植前填平定植溝,然后理順根系將大十的苗木放于溝內(nèi),并保持根系能夠向四周伸展。為防止跑墑,在定植溝上覆蓋一層土,并踏實(shí)澆透水。
2.3 短截定干
果桑新品種大十苗木整形后,為及早進(jìn)行定干,在距離地面20~25 cm的地方進(jìn)行短截。當(dāng)植株發(fā)芽后,將萌發(fā)新梢5~6個(gè)/株。
2.4 抹芽摘心
為抹除結(jié)果母枝基部的弱小芽、主干上萌發(fā)的定芽,在4月上中旬一般要進(jìn)行抹芽,以免浪費(fèi)樹(shù)體營(yíng)養(yǎng),影響結(jié)果母枝的成長(zhǎng)。為促進(jìn)果桑新品種大十多發(fā)側(cè)枝,增大樹(shù)冠,摘心要在新梢長(zhǎng)為15~20 cm時(shí)進(jìn)行,根據(jù)苗木的生長(zhǎng)情況,可分3~4次摘心,長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、弱的樹(shù)一般要分別摘去3~5、6~10 cm,以達(dá)到抑制頂端優(yōu)勢(shì)、增加花芽分化的目的。大十果桑樹(shù)夏伐后,定芽、潛伏芽大量萌發(fā)[5-7],其去芽的原則是:去弱留強(qiáng),去里留外,密集處多疏少留,空隙處少疏多留。一般分2次進(jìn)行:在桑條高7~10 cm時(shí)進(jìn)行第1次疏芽,留芽量為每株目的留芽量的2倍。以栽4 500株/hm2大十果桑樹(shù)的桑園為例,若平均每株桑樹(shù)目的留條為8根,第1次疏芽則每株桑樹(shù)平均留芽16個(gè)。采果后新枝條長(zhǎng)至100 cm,以摘去鵲口狀嫩頭為度。大十果桑樹(shù)單株發(fā)條數(shù)多,枝條開(kāi)展,可適當(dāng)少留。
2.5 肥水管理
春季果桑新品種大十摘心后,萌芽期要及時(shí)進(jìn)行澆水,以補(bǔ)充樹(shù)體生長(zhǎng)需要的養(yǎng)分。冬季為增加土壤的營(yíng)養(yǎng)成分含量,滿足第2年樹(shù)體生長(zhǎng)的需要,在定植行中間開(kāi)溝施肥。夏剪后,施尿素300 kg/hm2或碳酸銨750 kg/hm2 [8-11]。幼果期、始花期為增加果實(shí)含糖量,提高產(chǎn)質(zhì)量,用0.25%磷酸二氫鉀與天然蕓苔素混合液進(jìn)行葉面噴施。同時(shí),還要防積水。桑園積水后,土壤缺乏空氣,根系呼吸困難,影響桑根吸收養(yǎng)分,光合產(chǎn)物減少,出現(xiàn)桑葉萎蔫黃落,同時(shí)產(chǎn)生有毒物質(zhì),桑根腐爛。
2.6 病蟲(chóng)害防治
果桑新品種大十在生長(zhǎng)過(guò)程中,主要有炭疽病、褐斑病、白粉病、桑毛蟲(chóng)、桑尺蠖、桑葉蟬、桑天牛等病蟲(chóng)害。要采取綜合防治的方法,具體措施如下:一是果桑萌芽前對(duì)枝條、全園用3 °Bé石硫合劑進(jìn)行消毒;二是為減少越冬病蟲(chóng)源,冬季對(duì)病蟲(chóng)枝進(jìn)行修剪,并結(jié)合施肥將枯枝落葉焚燒后深埋[12-13];三是7—9月褐斑病、桑毛蟲(chóng)危害較重,為達(dá)到有效防治,每隔10~15 d用40%氧化樂(lè)果1 200倍液與75%甲基托布津1 200倍液混合噴灑;四是防治枝干桑天牛,一方面可以人工捕捉,另一方面打孔注藥或塞入藥簽殺滅幼蟲(chóng)。
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關(guān)鍵詞 普洱大葉茶;無(wú)性系;良種;栽培新技術(shù);云南省
中圖分類(lèi)號(hào) S571.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1007-5739(2013)05-0059-03
普洱大葉種茶樹(shù)是制作傳統(tǒng)名茶普洱茶和滇紅茶的優(yōu)質(zhì)茶樹(shù)品種,茶樹(shù)栽培技術(shù)會(huì)直接影響茶葉鮮葉的產(chǎn)量和品質(zhì),進(jìn)而影響成品茶的質(zhì)量,導(dǎo)致茶農(nóng)和茶企經(jīng)濟(jì)效益的下降。近年來(lái)普洱、西雙版納茶區(qū)廣大茶葉科技工作者在茶樹(shù)扦插育苗、品種搭配栽培組合、樹(shù)冠結(jié)構(gòu)造型、成年茶園修剪管理等方面進(jìn)行了栽培技術(shù)創(chuàng)新,并在幼齡茶園建立于茶苗培育實(shí)踐中,檢驗(yàn)了“彎枝”對(duì)幼齡茶園樹(shù)冠造型的作用效果。從不同茶園、不同樹(shù)齡的茶地采集的標(biāo)本,分析了根系狀態(tài)與樹(shù)冠生長(zhǎng)長(zhǎng)勢(shì)的關(guān)系,提出了相應(yīng)的栽培方法。
1 普洱大葉茶的生物學(xué)特征特性
1.1 根的特征特性
普洱大葉茶樹(shù)屬云南大葉種,其根分直根系(種子育苗)、須根系(扦插育苗)2類(lèi)。直根系由主根、側(cè)根、須根、吸收根組成;須根系苗期至幼年期的茶樹(shù)沒(méi)有主根。目前普洱市發(fā)展茶園主要是推廣無(wú)性系良種,采用扦插育苗。扦插苗木無(wú)主根,但定植若干年后,隨著定植入土方式不同、土壤狀況不同、耕鋤管理差異,須根逐漸轉(zhuǎn)化、退化,形成1~3根直根,直根的長(zhǎng)度可伸長(zhǎng)到250 cm以上,這些根在土壤中的分布影響了茶樹(shù)的生長(zhǎng)發(fā)育,從而影響了茶葉的質(zhì)量和產(chǎn)量。從采集到的同一茶園的茶樹(shù)標(biāo)本根系可以看出,根系生長(zhǎng)良好的,其枝葉生長(zhǎng)茂盛,真實(shí)體現(xiàn)出“根深葉茂,本固枝榮”。茶樹(shù)根系生長(zhǎng)要求土壤深厚,有效土層應(yīng)達(dá)100 cm以上,地下水位在100 cm以下,通氣性好,有機(jī)質(zhì)含量達(dá)1.5%以上,pH值4.5~6.5,深耕改土,深施有機(jī)肥料是保證茶樹(shù)根系良好生長(zhǎng)的重要保證[1]。
1.2 莖的特征特性
普洱大葉茶樹(shù)是典型的喬木型,植株高大,分枝部位高。茶樹(shù)幼年期頂端優(yōu)勢(shì)十分明顯,但此時(shí)可塑性較強(qiáng),可通過(guò)人為干預(yù)改變其生長(zhǎng)的頂端優(yōu)勢(shì),促進(jìn)合軸分枝。筆者通過(guò)多地茶園調(diào)查認(rèn)為,經(jīng)3~5年人為修剪后進(jìn)入投產(chǎn)期的茶園,茶樹(shù)生長(zhǎng)已經(jīng)逐漸失去了明顯的頂端優(yōu)勢(shì)。因而,在樹(shù)冠造型與培養(yǎng)上要盡量擴(kuò)大樹(shù)冠采摘面,形成立體造型,就可能實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)。
1.3 樹(shù)冠的特征特性
良好的茶樹(shù)樹(shù)冠結(jié)構(gòu)是優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高效的基礎(chǔ)。一般優(yōu)質(zhì)、豐產(chǎn)樹(shù)冠應(yīng)具有分枝結(jié)構(gòu)合理、莖枝粗壯、高度適中、樹(shù)冠寬廣、茂密,樹(shù)冠面上有一定的載葉量。大葉種茶樹(shù)第1分枝離地面較高,云南茶區(qū)多數(shù)是開(kāi)墾梯臺(tái)種植,普遍將樹(shù)冠高度提高到80~100 cm,幅面寬度達(dá)到130~180 cm,考慮到大葉種生長(zhǎng)的頂端優(yōu)勢(shì)問(wèn)題,樹(shù)冠采摘面均采用平剪,這樣的樹(shù)冠形成后,樹(shù)冠面上的葉層集中,厚度不夠,冬季修剪后葉片更少,看上去光禿禿的,嚴(yán)重影響茶樹(shù)的生長(zhǎng)和翌年的產(chǎn)量,而且樹(shù)冠下部枝桿,光照過(guò)多,苔蘚、地衣生長(zhǎng)危害嚴(yán)重。另外,臺(tái)地茶園采茶只能站在臺(tái)地的內(nèi)側(cè)一邊,當(dāng)采摘面達(dá)到160~180 cm時(shí),因采不到外側(cè)的茶葉,只能在茶行樹(shù)冠面上每隔250~300 cm剪開(kāi)1個(gè)半圓形缺口以便采摘外側(cè)邊緣的鮮葉。這樣一來(lái),樹(shù)冠實(shí)際采摘面積自然減少很多,導(dǎo)致茶葉產(chǎn)量的下降。
原云南普洱茶樹(shù)良種場(chǎng)研究員肖時(shí)英教授,退休后創(chuàng)立“普洱市時(shí)木茶廠”進(jìn)行“立體生態(tài)茶園”建設(shè)研究,茶樹(shù)種植方式由原來(lái)雙行、小行距40 cm,擴(kuò)大到80~120 cm;樹(shù)冠修剪由平面修剪改成1個(gè)平面和1個(gè)斜面組合的立體采摘面,使茶樹(shù)采摘面擴(kuò)大到200 cm以上,可站在梯地內(nèi)外兩側(cè)采茶,采摘面積比對(duì)照擴(kuò)大1倍以上,茶葉產(chǎn)量也增加了1倍。經(jīng)過(guò)比較,平面樹(shù)形產(chǎn)量為2 766 kg/hm2,而立體樹(shù)形產(chǎn)量則達(dá)到了5 611.5 kg/hm2。筆者對(duì)該茶園調(diào)查后發(fā)現(xiàn),茶園內(nèi)茶行整齊,無(wú)缺株斷行現(xiàn)象,茶樹(shù)長(zhǎng)勢(shì)良好,枝葉繁茂,苔蘚地衣極少,病蟲(chóng)危害輕微。該種植方式是目前普洱大葉茶最先進(jìn)的栽培方式。
2 茶樹(shù)無(wú)性系良種栽培新技術(shù)
2.1 茶樹(shù)扦插育苗技術(shù)的創(chuàng)新
原來(lái)的扦插育苗,是在要求施入基肥的“熟土”上面鋪1層3~5 cm的無(wú)菌“心土”保障插穗正常生根,而后的生長(zhǎng)從下面吸收養(yǎng)分成長(zhǎng)育苗?,F(xiàn)在的方法多數(shù)采用鋪墊“完全心土”育苗。選擇水稻田或其他平整的旱地(選擇旱地時(shí)在地面上鋪1層農(nóng)用薄膜,兩端完善排水系統(tǒng)),用木板、竹笆或磚圍邊做苗畦,上鋪20~25 cm的“心土”,提供苗期全程生長(zhǎng),保障不受土壤病菌感染[2]。
2.2 茶樹(shù)品種搭配與組合種植技術(shù)的創(chuàng)新
建設(shè)新茶園,選擇早、中、晚生品種搭配。普洱市時(shí)木茶廠肖時(shí)英教授創(chuàng)新的一帶茶行種植2個(gè)茶樹(shù)品種,經(jīng)過(guò)10多年的生產(chǎn)試驗(yàn)證明,其生產(chǎn)效果十分明顯,結(jié)合錯(cuò)時(shí)修剪,較好地緩解了春茶“洪峰期”的問(wèn)題。
2.3 茶苗種植時(shí),根系入土方式對(duì)茶樹(shù)生長(zhǎng)的影響
筆者從不同地方、不同樹(shù)齡的茶園采集到幾十株茶樹(shù)標(biāo)本,觀察分析發(fā)現(xiàn),茶樹(shù)的生長(zhǎng)發(fā)育與種植時(shí)根系在土壤中的分布關(guān)系密切,以根系分布均勻、斜向土壤深層的長(zhǎng)勢(shì)最好。
2.4 茶樹(shù)幼年期樹(shù)冠培養(yǎng)方式的創(chuàng)新
一般茶樹(shù)幼年期樹(shù)冠培養(yǎng)采用3次定型修剪,耗時(shí)3年。筆者帶領(lǐng)學(xué)生在云南熱帶作物職業(yè)學(xué)院新茶園進(jìn)行茶樹(shù)樹(shù)冠培育試驗(yàn),將第1次定型修剪改為“彎枝”,有效地降低了大葉種茶樹(shù)的分支高度,10 cm以下分枝達(dá)到3~5枝。普洱市原生茶葉公司在倚象鄉(xiāng)茶葉基地進(jìn)行生產(chǎn)試驗(yàn),第2年用“雙杠”將茶枝壓向臺(tái)地兩側(cè)(代替第2次定型修剪),使樹(shù)冠寬度迅速擴(kuò)大,臺(tái)面生產(chǎn)小枝迅速增多,2年完成樹(shù)冠培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn),實(shí)現(xiàn)投產(chǎn)。
2.5 大葉種茶樹(shù)樹(shù)冠形態(tài)結(jié)構(gòu)的創(chuàng)新
一直以來(lái),人們認(rèn)為云南大葉種茶樹(shù)頂端生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)強(qiáng),只能平修剪或凹形修剪。茶學(xué)專(zhuān)家肖時(shí)英教授在自己種植的茶園進(jìn)行樹(shù)冠造型研究,將樹(shù)冠修剪成1個(gè)平面和1個(gè)斜面的立體造型(類(lèi)似“廠”字形),使樹(shù)冠采摘面擴(kuò)大了1倍以上,而且可以方便地站在臺(tái)地兩邊采茶和耕鋤管理,有效地改變了茶樹(shù)的頂端優(yōu)勢(shì),產(chǎn)量倍增。
2.6 生產(chǎn)茶園修剪時(shí)間錯(cuò)開(kāi)的創(chuàng)新
茶園內(nèi)種植不同萌發(fā)期的品種,可以錯(cuò)開(kāi)春茶洪峰。普洱市時(shí)木茶廠肖時(shí)英教授將立體樹(shù)冠的兩邊分別在當(dāng)年秋冬季和翌年春茶后修剪,更加有效地實(shí)現(xiàn)了對(duì)茶樹(shù)萌芽的調(diào)節(jié)和控制。同時(shí),通過(guò)修剪深度的掌握,解決了春茶集中猛發(fā)和茶芽細(xì)小難采的問(wèn)題。
3 普洱大葉茶栽培新技術(shù)的實(shí)施
3.1 茶樹(shù)扦插育苗技術(shù)
茶樹(shù)是異花授粉作物,后代變異大,茶樹(shù)良種都采用扦插育苗。云南大葉種茶樹(shù)扦插育苗有關(guān)部門(mén)正在組織制定省級(jí)地方標(biāo)準(zhǔn)。有關(guān)常規(guī)育苗方法程序的資料介紹較多,這里不再多說(shuō)。筆者調(diào)查認(rèn)為,培育壯苗重點(diǎn)在3個(gè)環(huán)節(jié):一是插穗枝條的培養(yǎng);二是扦插的土壤選擇;三是扦插后的管理。影響插穗發(fā)根的主要因素有:茶樹(shù)品種、插穗的老嫩程度、枝條的粗細(xì)與長(zhǎng)短、插穗留葉量、腋芽動(dòng)態(tài)等內(nèi)因和溫度、濕度、光照、土壤等外界環(huán)境因素。筆者調(diào)查發(fā)現(xiàn),生產(chǎn)上常出現(xiàn)的問(wèn)題是插穗扦插后開(kāi)花多的現(xiàn)象。筆者認(rèn)為:其主要原因是枝條生長(zhǎng)中的“階段發(fā)育”問(wèn)題,其次是母樹(shù)的C/N營(yíng)養(yǎng)平衡關(guān)系。階段發(fā)育問(wèn)題可通過(guò)對(duì)母樹(shù)的深修剪,降低階段發(fā)育年齡,同時(shí)增施氮肥,抑制花芽分化,減少開(kāi)花,從而降低插穗養(yǎng)分損失,培育壯苗[3]。
為避免茶樹(shù)根結(jié)線蟲(chóng)病的危害,目前育苗多采用鋪“完全心土”育苗。一般選擇交通方便的水稻田作育苗基地,用其他旱地育苗時(shí)可用無(wú)毒、無(wú)害的農(nóng)用薄膜隔開(kāi)。鋪全部衛(wèi)生土地做法是,先視園地地勢(shì)、地形情況,開(kāi)挖排灌水溝,按苗床寬度110~120 cm,畦溝寬度35~40 cm標(biāo)準(zhǔn),用木板、竹笆或磚塊砌邊圍成苗床基礎(chǔ)框架,平整壓實(shí)地面,如為旱地再鋪上農(nóng)用薄膜,在苗床地面上撒施鈣鎂磷1 500 kg/hm2、硫酸鉀150 kg/hm2,上鋪20~22 cm厚的酸性紅、黃壤心土,提供保障苗期根系生長(zhǎng)的全部需要。
在普洱市的自然環(huán)境條件下,扦插育苗的全程按排:第1年冬季對(duì)母樹(shù)不修剪,施適量的有機(jī)肥,第2年采摘春茶后5月進(jìn)行深修剪,程度視母樹(shù)情況確定,10月做好扦插準(zhǔn)備工作,11月完成扦插,進(jìn)行精心管理,以苗高25~30 cm時(shí)打頂,促進(jìn)分枝,培育壯苗,6月上旬至7月中旬完成移栽,8月下旬補(bǔ)苗1次。第2年雨季來(lái)臨時(shí)再用同齡、同品種茶苗進(jìn)行第2次補(bǔ)苗。
3.2 茶樹(shù)品種的選擇與搭配組合
云南省獨(dú)特的地理、氣候條件造就了世界茶樹(shù)原產(chǎn)地的位置,茶樹(shù)異花授粉產(chǎn)生了豐富的茶樹(shù)種質(zhì)資源,但傳統(tǒng)的種植方式形成相對(duì)種植品種單一,同一茶園,茶樹(shù)發(fā)芽相對(duì)集中,春茶期間最易形成“洪峰期”,給采茶、加工帶來(lái)困難,同時(shí),品種單一也不利于抵抗自然災(zāi)害及病蟲(chóng)危害。選擇多品種組合搭配,各品種優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),形成了良好的生態(tài)環(huán)境,可最大限度地趨利避害,錯(cuò)開(kāi)洪峰期,調(diào)劑采茶勞力和加工設(shè)備,增產(chǎn)增收。茶樹(shù)品種應(yīng)優(yōu)先選擇已適應(yīng)當(dāng)?shù)胤N植的良種茶樹(shù),注意發(fā)芽期的早、中、晚熟品種搭配,一般早生品種占50%~60%,中生品種占30%~40%,晚生品種占10%左右。普洱市時(shí)木茶廠在7.33 hm2茶園里種植27個(gè)茶樹(shù)品種,在一臺(tái)茶地上種植2個(gè)品種組合(雙行單株,每小行1個(gè)品種,一般臺(tái)地寬度為2 m),并且利用立體修剪,在不同的季節(jié)分2次修剪,錯(cuò)開(kāi)了發(fā)芽期,取得了很好的增產(chǎn)效應(yīng)。
3.3 茶樹(shù)種植方式
在普洱茶區(qū)普通生產(chǎn)茶園,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)靠天吃飯,茶苗移栽成活率的高低與移栽季節(jié)關(guān)系最密切,移栽以雨季6月上旬至7月中旬最好。種植方式與成活率有一定關(guān)系,但種植方式對(duì)后期茶樹(shù)影響很大。筆者分析8~10年樹(shù)齡的同一茶園中采集的茶樹(shù)標(biāo)本根系發(fā)現(xiàn),茶工種植時(shí),茶樹(shù)根系在土壤中的分布可歸為3種類(lèi)型:一是根系自然分開(kāi)向土層深處生長(zhǎng),四周根系分布平衡;二是根系偏向一邊,斜向土層深處生長(zhǎng);三是根系與莖桿折成近90°角呈“L”狀排列種植,根系在土壤中幾乎是水平方向生長(zhǎng)。其中第1種類(lèi)型的茶樹(shù)長(zhǎng)勢(shì)最好,根深葉茂,莖桿直徑在10 cm以上,第2種居中,第3種最差,莖桿直徑在3~4 cm。因此,種植茶苗一定要使根系自然舒展分開(kāi)向下,才有利于茶苗的成活和后期的茁壯成長(zhǎng)。
3.4 優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)樹(shù)冠培育方式
茶樹(shù)理想的優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)樹(shù)形前面已經(jīng)介紹。筆者經(jīng)過(guò)多年的觀察以及在校園試驗(yàn)地的茶樹(shù)栽培實(shí)踐研究認(rèn)為:云南大葉種茶樹(shù)理想的樹(shù)冠造型培育應(yīng)抓緊在幼年期,關(guān)鍵是降低茶樹(shù)一級(jí)骨干枝的分支部位。大葉種茶樹(shù)頂端優(yōu)勢(shì)明顯、生長(zhǎng)旺盛,在苗期多數(shù)植株已經(jīng)長(zhǎng)高到30 cm以上,莖桿下端葉片脫落,常規(guī)的3次定型修剪很難達(dá)到理想的效果,普遍形成傘狀的“高腳茶樹(shù)”,因此云南省茶園平均產(chǎn)量不高。筆者培育樹(shù)冠的方法是:改第1次定型修剪為“自由彎枝”,第2次定型修剪為用“雙杠壓枝”往茶行兩邊壓條,第3次定型修剪用籬剪按設(shè)定的“理想造型”修剪出雛型,一般在種植后2足年即可初步定型,達(dá)到試投產(chǎn)要求?!白杂蓮澲Α本褪遣惶舴较?,哪方空間大就彎向那方,“雙杠壓枝”就是用2根木棍像雙杠一樣固定后將茶樹(shù)枝條分別壓向臺(tái)地兩邊?!皬澲Α钡淖饔檬且种屏酥鞲缮L(zhǎng)的頂端優(yōu)勢(shì),促進(jìn)了側(cè)芽萌發(fā)。“彎枝”的好處是不傷害剛成活的幼年茶樹(shù),不減少已經(jīng)形成的生物產(chǎn)量,被彎曲的枝葉仍然可以繼續(xù)進(jìn)行光合作用,為生長(zhǎng)提供養(yǎng)料,側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)快、成活率高。彎枝后分支部位可降低到10 cm以下,當(dāng)新枝成長(zhǎng)起來(lái)后,及時(shí)解除主枝的綁縛,主枝與新枝共同形成一級(jí)骨干枝,改變了樹(shù)形結(jié)構(gòu),加快了樹(shù)冠培養(yǎng)進(jìn)度[4-5]。
4 存在的問(wèn)題
上述關(guān)于扦插育苗用“完全心土”技術(shù)比較成熟,得到廣大茶農(nóng)認(rèn)可并采用。茶樹(shù)品種搭配組合栽培技術(shù)、茶樹(shù)樹(shù)冠立體造型修剪方式等技術(shù)由普洱市時(shí)木茶廠肖時(shí)英教授首創(chuàng),實(shí)施效果良好,值得推廣。存在的問(wèn)題,一是對(duì)無(wú)性系大葉種茶樹(shù)的栽培技術(shù)還沒(méi)有進(jìn)行過(guò)系統(tǒng)的、完整的綜合研究。二是茶樹(shù)栽培時(shí),根系入土的分布方式對(duì)茶樹(shù)生長(zhǎng)量、生長(zhǎng)勢(shì)的影響實(shí)效缺乏對(duì)比研究數(shù)據(jù)。三是“彎枝”代替第1、2次定型修剪與傳統(tǒng)的定型修剪對(duì)樹(shù)冠培養(yǎng)的效果差異同樣缺乏對(duì)比試驗(yàn)數(shù)據(jù)。這些都有待于在隨后的研究工作中開(kāi)展。
5 參考文獻(xiàn)
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一、課程整合的基本模式
華東師大課程與教學(xué)研究所吳剛認(rèn)為:“基于信息技術(shù)的教育改革就是揭示內(nèi)含于信息技術(shù)中的新觀念并使其彰顯為課程改革的基本理念?!毙畔⒓夹g(shù)與生物課程整合,就是利用多媒體網(wǎng)絡(luò),通過(guò)對(duì)教與學(xué)過(guò)程及教學(xué)資源的設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)、利用、評(píng)價(jià)和管理,為生物教學(xué)改革提供最佳環(huán)境,滿足學(xué)生的個(gè)性化發(fā)展。其基本的教學(xué)模式為:學(xué)生進(jìn)入情境自主探索協(xié)作學(xué)習(xí)效果評(píng)價(jià)教師創(chuàng)設(shè)情境啟發(fā)思考指導(dǎo)求新激勵(lì)創(chuàng)新。
1.創(chuàng)設(shè)情境。教師利用多媒體技術(shù)與網(wǎng)絡(luò)技術(shù)創(chuàng)設(shè)與主題相關(guān)的、盡可能真實(shí)的情境,使學(xué)習(xí)能在和現(xiàn)實(shí)情況基本一致或相類(lèi)似的情境中發(fā)生。
2.自主探索。建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論認(rèn)為,學(xué)生學(xué)習(xí)是由教師向?qū)W生提供解決該問(wèn)題的有關(guān)線索,即教會(huì)學(xué)生借助多媒體和網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行發(fā)現(xiàn)、探究、認(rèn)識(shí)社會(huì)、接受信息,并最終完成意義建構(gòu)。
3.協(xié)作學(xué)習(xí)。進(jìn)行小組協(xié)商、交流、討論。通過(guò)不同認(rèn)識(shí)和觀點(diǎn)的交鋒、補(bǔ)充、修正,加深學(xué)生對(duì)當(dāng)前問(wèn)題的理解,從而有利于學(xué)生完成新知識(shí)的建構(gòu)。新課程強(qiáng)調(diào)教學(xué)是教與學(xué)的交往和互動(dòng),師生之間的相互討論、補(bǔ)充,在探究中總結(jié)得出結(jié)論。在此過(guò)程中,師生分享彼此的想法、經(jīng)驗(yàn)和知識(shí),讓學(xué)生真正參與到教學(xué)過(guò)程中,求得新的發(fā)現(xiàn),從而達(dá)到共識(shí)、共享、共進(jìn),實(shí)現(xiàn)教學(xué)相長(zhǎng)。
4.效果評(píng)價(jià)。為使各個(gè)層次的學(xué)生都獲得成就感,提倡實(shí)行評(píng)價(jià)多元化。讓每個(gè)學(xué)生都體驗(yàn)到成功的快樂(lè),使評(píng)價(jià)成為提高學(xué)生生物素養(yǎng)的方法之一。
二、課程整合的目標(biāo)
1.教學(xué)目標(biāo)多元化。根據(jù)教材、學(xué)生的具體情況,設(shè)置階梯式、多層次、多形式的教學(xué)目標(biāo),使學(xué)生達(dá)到基礎(chǔ)性的均衡發(fā)展和個(gè)性化的特長(zhǎng)發(fā)展。信息技術(shù)與高中生物課程整合這一互動(dòng)教學(xué)模式的實(shí)施,有助于教學(xué)目標(biāo)的完成,有助于師生平等參與、真誠(chéng)合作,體現(xiàn)“動(dòng)中學(xué)”“議中思”“感中悟”的教學(xué)本質(zhì)。在這一模式下,學(xué)生情緒飽滿、精神愉悅、積極參與、勇于表現(xiàn),課堂充滿智慧的火花和創(chuàng)造的快樂(lè)?;?dòng)式、人性化的課堂真正體現(xiàn)了新課標(biāo)的理念:為了每位學(xué)生的發(fā)展。
2.教學(xué)內(nèi)容問(wèn)題化。根據(jù)教學(xué)內(nèi)容的特點(diǎn),將教學(xué)內(nèi)容轉(zhuǎn)化為各種形式且有價(jià)值的問(wèn)題,并在網(wǎng)絡(luò)中呈現(xiàn)出來(lái),為學(xué)生在課內(nèi)外的探究性學(xué)習(xí)設(shè)置邏輯起點(diǎn)。
3.教學(xué)手段現(xiàn)代化。充分運(yùn)用多媒體網(wǎng)絡(luò),實(shí)現(xiàn)教學(xué)過(guò)程智能化、現(xiàn)代化,使生物教學(xué)跳出文字和教室,使學(xué)習(xí)成為興趣,讓學(xué)生成為主體。
4.教學(xué)過(guò)程探究化。學(xué)生主動(dòng)地獲取網(wǎng)絡(luò)上的相關(guān)資料,利用課堂或課外時(shí)間,就相關(guān)問(wèn)題進(jìn)行自我探究或集體討論或網(wǎng)上咨詢(xún),教師以平等的姿態(tài)參與和引導(dǎo)學(xué)生的討論,使教學(xué)過(guò)程由傳統(tǒng)的傳承型轉(zhuǎn)變?yōu)楝F(xiàn)代的探究型。
5.教學(xué)活動(dòng)網(wǎng)絡(luò)化。在教學(xué)活動(dòng)中,改變過(guò)去教學(xué)內(nèi)容主要來(lái)自于教科書(shū)的單一狀況,強(qiáng)調(diào)學(xué)生從網(wǎng)絡(luò)資源中獲取素材,進(jìn)行自我改造、重組、創(chuàng)造,培養(yǎng)學(xué)生從網(wǎng)絡(luò)獲取資源的能力和習(xí)慣,以開(kāi)闊其視野,擴(kuò)充其“內(nèi)存”。
6.教學(xué)結(jié)果創(chuàng)新化。信息技術(shù)的介入,使生物課程學(xué)習(xí)的環(huán)境得到優(yōu)化,學(xué)生的主體地位得到確立,學(xué)生的自主性、能動(dòng)性、合作性得到發(fā)揮,學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)、創(chuàng)新思維和創(chuàng)新人格得到培養(yǎng)。
三、要注意的問(wèn)題
1.要?jiǎng)?chuàng)設(shè)新穎的問(wèn)題情境。問(wèn)題情境的創(chuàng)設(shè)應(yīng)考慮難易度、適宜性與趣味性。這樣容易激發(fā)學(xué)生質(zhì)疑、探究的欲望,幫助學(xué)生形成強(qiáng)烈的問(wèn)題意識(shí)和創(chuàng)新思維意識(shí),不斷激發(fā)學(xué)生探究學(xué)習(xí)的興趣,促其逐漸形成自主質(zhì)疑的思維品質(zhì),最終實(shí)現(xiàn)學(xué)習(xí)方式的轉(zhuǎn)變。
2.要營(yíng)造融洽平等的探究氛圍。教師在教學(xué)過(guò)程中,應(yīng)當(dāng)和學(xué)生建立平等和積極互動(dòng)、共同發(fā)展的新型關(guān)系;要放手讓學(xué)生開(kāi)展自我思考、自主探究的活動(dòng);要充分尊重學(xué)生的人格和自尊心,重視學(xué)生的不同見(jiàn)解,鼓勵(lì)學(xué)生大膽發(fā)言,創(chuàng)新求異,使學(xué)生積極主動(dòng)地參與課堂教學(xué)的全過(guò)程,通過(guò)自身的主體探索和體驗(yàn)形成勇于探究、敢于實(shí)踐的個(gè)性品質(zhì)和獨(dú)立探究的能力。
3.要開(kāi)展多彩的課堂討論,引導(dǎo)學(xué)生合作解疑。在教學(xué)中要把課堂討論作為教學(xué)常態(tài),使學(xué)生通過(guò)相互討論,形成生生互動(dòng)、生生互導(dǎo),進(jìn)行思想碰撞,使小組中的合作伙伴在認(rèn)知、經(jīng)驗(yàn)、能力等方面得到互補(bǔ)。這種交流、互動(dòng)、互補(bǔ),可以幫助學(xué)生激活原有的知識(shí)經(jīng)驗(yàn),增強(qiáng)個(gè)體對(duì)小組解決問(wèn)題的責(zé)任感,形成尊重、傾聽(tīng)、平等、民主等態(tài)度,建立友愛(ài)、融洽的人際關(guān)系。
4.激勵(lì)評(píng)價(jià)要面向全體,側(cè)重過(guò)程。激勵(lì)評(píng)價(jià)對(duì)每一個(gè)學(xué)生都是必要的,尤其對(duì)學(xué)習(xí)比較困難的學(xué)生,教師的評(píng)語(yǔ)能有效地鼓勵(lì)和激發(fā)他們,幫助他們樹(shù)立起探究的信心。從探究性學(xué)習(xí)方面來(lái)說(shuō),過(guò)程的評(píng)價(jià)比結(jié)果的評(píng)價(jià)更重要。教師對(duì)學(xué)生在探究過(guò)程中的每一點(diǎn)進(jìn)步都要盡可能地進(jìn)行激勵(lì)評(píng)價(jià)。
5.教師要進(jìn)行適時(shí)有效的指導(dǎo)。因?yàn)閷W(xué)生的探究過(guò)程有時(shí)是盲目的,同時(shí),網(wǎng)絡(luò)空間具有很大的自由性,而青少年自控能力相對(duì)較弱,所以教師要提供適時(shí)的引導(dǎo),不時(shí)地給予學(xué)生幫助。如有分寸地提供有效的信息資源,組織學(xué)生討論交流,提煉概括學(xué)生的問(wèn)題,關(guān)注不同水平學(xué)生的活動(dòng)情況,有的放矢地給予輔導(dǎo),等等。同時(shí),教師也要積極參與探討,與學(xué)生成為探究學(xué)習(xí)的伙伴,進(jìn)而形成師生互動(dòng)、師生互導(dǎo)的局面。
關(guān)鍵詞:低氧訓(xùn)練;心肌組織;血管生成;血管重建
中圖分類(lèi)號(hào):G804.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1007-3612(2010)12-0048-04
Using Hypoxia Training Methods to Establish an Animal Model of Angiogenesis of Atrial Tissue of SD Rats
ZOU Zhibing1,ZHENG Lan2,MAO Shuzhang4
(1.Xiangsi lake College, Guangxi University for Nationalities, Nanning 530008, Guangxi China; 2.Department of Physical Education,
Hunan Normal University, Changsha 410081,Hunan China; 3.Guangxi Economic Management Cadre College, Nanning 530007,Guangxi China)
Abstract:Objective: This paper is to study the hypoxic training on angiogenesis of atrial tissue of SD rats, and establish a model of animal training for angiogenesis of atrial tissue of SD rats. Methods: 60 male SD rats were randomly divided into six groups, 10 rats each, which are normoxic control group, hypoxic living group, normoxic training group, normoxic living hypoxic training group, hypoxic living normoxic training group, and hypoxic living hypoxic training group. Progressive treadmill exercise and hypoxia are used to establish hypoxic training animal model. Using the immunity histochemistry and the microimage analysis to count and check the capillary density、opitical density level、expression area of atrial tissue. Results: It turns out that the CD34 can mark microvascular of atrial tissue very well, and hypoxic training has get a satisfactory result in angiogenesis. Conclusions: We conclude that hypoxic training can be established an animal model of angiogenesis of atrial tissue of SD rats, and it can provide new research ways and means for physiological reconstruction of blood vessels.
Key words: hypoxic training; atrial tissue; angiogenesis; revascularizatio
隨著低氧訓(xùn)練研究的不斷深入,研究者們發(fā)現(xiàn)低氧訓(xùn)練除了應(yīng)用于運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練提高運(yùn)動(dòng)能力之外,還對(duì)健身、疾病的治療也有很大作用。目前,已有關(guān)于低氧運(yùn)動(dòng)治療心血管疾病、糖尿病、肥胖、貧血等疾病的研究報(bào)道[1]。
臨床上促進(jìn)毛細(xì)血管新生的方法主要采用治療性血管新生療法,如使用激光進(jìn)行心肌內(nèi)血管重建術(shù);給予促血管生長(zhǎng)因子;細(xì)胞移植;藥物治療等,但這些治療方法存在一些局限和安全隱患。
研究表明CD34能突出地顯示心組織中較小的和不成熟的微血管或單一的內(nèi)皮細(xì)胞,是血管新生研究的一種可靠的標(biāo)記物質(zhì)[2]。本研究采用遞增負(fù)荷跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練及低氧作為處理因素,建立大鼠低氧訓(xùn)練模型。用CD34抗體標(biāo)記心肌組織微血管,探討低氧訓(xùn)練對(duì)大鼠心肌組織血管新生的影響,為治療性血管新生療法提供新的思路和研究途徑。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組 健康雄性2.0月齡Sprague-Dawley大鼠60只,體重約220 g(由中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院動(dòng)物學(xué)部提供)。用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類(lèi)動(dòng)物飼料喂養(yǎng),生活期間室溫保持20~23℃,相對(duì)濕度45%~55%,每天光照12 h。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為6組:1對(duì)照組(正常大氣壓下的氧含量)、2高住組(低氧環(huán)境下居?。?常練組(常氧條件下訓(xùn)練)、4低住高練組(常氧條件下居住,低氧條件下訓(xùn)練)、5高住低練組(低氧條件下居住,常氧條件下訓(xùn)練)和6高住高練組(低氧條件下居住,低氧、常氧訓(xùn)練交替進(jìn)行),每組10只。
1.2 運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練安排 采用杭州立泰科技有限公司PT動(dòng)物實(shí)驗(yàn)跑臺(tái),運(yùn)動(dòng)組采用10周遞增負(fù)荷跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練,每周
投稿日期:2009-10-13
基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30671011)資助。通訊作者:鄭瀾。
作者簡(jiǎn)介:鄒志兵,講師,碩士,研究方向低氧訓(xùn)練的生理機(jī)制。訓(xùn)練6 d,運(yùn)動(dòng)量由第1周的速度為15 m/min、持續(xù)時(shí)間為25 min遞增至第10周速度為28 m/min、持續(xù)時(shí)間為50 min,高住高練低練組與低住高練組每周二、四、六在相當(dāng)于海拔1 500 m的低氧環(huán)境中訓(xùn)練,一、三、五在常氧下訓(xùn)練,訓(xùn)練方案同常氧訓(xùn)練組。
表1 常練組大鼠訓(xùn)練方案(速度×持續(xù)時(shí)間)
星期一星期二星期三星期四星期五星期六第1周15×2515×2515×2516×2516×2516×25第2周17×2517×2517×2518×2518×2518×25第3周19×3019×3019×3020×3020×3020×30第4周21×3521×3521×3522×3522×3522×35第5周23×4023×4023×4024×4024×4024×40第6周25×4525×4525×4525×4525×4525×45第7周26×4526×4526×4526×4526×4526×45第8周26×5026×5026×5026×5026×5026×50第9周27×5027×5027×5027×5027×5027×50第10周28×5028×5028×5028×5028×5028×50速度:m/min;持續(xù)時(shí)間:min;跑臺(tái)坡度:10%。
1.3 低氧處理 采用美國(guó)Hypoxico公司的低氧裝置,用美國(guó)產(chǎn)TOXIRAEPGM-36型氧氣監(jiān)測(cè)儀實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)低氧艙中氧含量的變化,第1周至第7周低氧程度逐周遞增,分別為:1 800 m、2 100 m、2 400 m、2 700 m、3 000 m、3 300 m、3 600 m,第7周后保持3 600 m到第10周,所有高住組大鼠全部在低氧艙中居住。
1.4 實(shí)驗(yàn)取材 訓(xùn)練方案結(jié)束后,每組隨機(jī)取4只大鼠,用0.4%戊巴比妥鈉1 mL/100 g體重麻醉后,將大鼠呈仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上,暴露胸腔;從主動(dòng)脈胸部近心端插入細(xì)塑料管,扎緊固定,緩慢注入1%肝素2 mL;然后快速滴灌250 mL0.85%的生理鹽水,迅速剪斷后腔靜脈;待生理鹽水滴完后,換滴50 mL4%多聚甲醛緩沖鹽溶液(0.01 M、pH7.4PBS),快速滴完,整個(gè)滴灌時(shí)間約30 min;取出整心置同一固定液中固定24 h后,將心臟沿房間隔、室間隔所在平面切開(kāi),常規(guī)脫水、透明、進(jìn)蠟、石蠟包埋,用于免疫組織化學(xué)標(biāo)本制作。
1.5 心肌組織CD34免疫組織化學(xué)標(biāo)本制作 石蠟切片脫蠟至蒸餾水;用0.3%H2O2阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,用0.3%TritonX-100處理增加標(biāo)本通透性,用0.01 mol、pH6.0的檸檬酸緩沖液微波修復(fù)抗原;羊血清(1∶50)處理標(biāo)本,減少和消除非特異性染色;分別加一抗(1∶500,兔源CD34單克隆抗體)、二抗(1∶200)、ABC復(fù)合物(1∶1∶100),37℃恒溫箱于濕盒內(nèi)孵育;用終濃度為0.05%DAB-0.03%H2O2的TB顯色;鏡下控制顯色時(shí)間,顯色時(shí)間5~15 min;蘇木精襯染,常規(guī)脫水、透明,中性樹(shù)膠封片。用PBS代替一抗作為空白對(duì)照。
1.6 微血管密度的計(jì)算方法 按照Weinder[3,4]報(bào)告的方法進(jìn)行結(jié)果判斷,用血管數(shù)目的平均數(shù)來(lái)表示。先在低倍鏡(×40)下掃描整個(gè)視野的區(qū)域,選擇其中高陽(yáng)性物質(zhì)表達(dá)密度區(qū),然后在高倍鏡(×200)下計(jì)數(shù)被抗CD34抗體染成棕色的血管數(shù)目,每個(gè)染成棕色的血管內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮細(xì)胞簇,只要它們和臨近的微血管、心肌細(xì)胞或其它結(jié)締組織分開(kāi),就把它們視為一個(gè)微血管。結(jié)果用5個(gè)200倍視野下的血管數(shù)目的平均數(shù)來(lái)表示。
1.7 微血管灰度水平和表達(dá)面積的測(cè)試 用SimplePCI圖象分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化陽(yáng)性產(chǎn)物的灰度和面積進(jìn)行分析。具體步驟:每張切片在10×40倍鏡下選取不相重疊的3個(gè)代表性視野,測(cè)量陽(yáng)性產(chǎn)物的面積和灰度值以及所選區(qū)域的平均灰度值。
1.8 統(tǒng)計(jì)分析 所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,各組間顯著性差異采用方差分析,組內(nèi)顯著性差異用t檢驗(yàn)。顯著性水平為α=0.05,P
2 結(jié) 果
2.1 大鼠心肌組織CD34免疫組織化學(xué)觀察結(jié)果 大鼠心肌組織血管經(jīng)CD34免疫組織化學(xué)染色呈棕黃色,著色鮮明,血管管腔明顯。CD34 的染色定位于血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上,呈棕黃色,細(xì)胞核呈紫色。微血管的形態(tài)不規(guī)則,有的新生血管已呈管腔結(jié)構(gòu)(圖1D、E、F),有的只見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞呈條索狀或點(diǎn)狀分布(圖1B、C)。
圖1 大鼠心肌組織CD34免疫組織化學(xué)染色(×30)2.2 大鼠心肌組織微血管顯微圖象觀察分析結(jié)果 請(qǐng)參見(jiàn)(表2)。
表2 心肌組織血管新生免疫組織化學(xué)圖像分析結(jié)果
組別
(group)光密度值
(optical density)陽(yáng)性物質(zhì)表達(dá)面積
/um2(area)微血管密度個(gè)數(shù) /mm2
(capillary density)161.0 543±2.84 8913 657.045±546.71 4537.1 362±1.04 881263.9 778±3.16 1814 181.702±727.66 9468.2 563±2.16 795382.7 932±3.74 15412 364.528±1474.90 078**25.3 422±3.88 158**495.4 952±4.76 10623 855.051±3 319.40 152**#32.0 342±9.54 289**##5102.5 280±3.31 47024 245.952±3 584.27 104**#32.5 342±9.54 289**##6114.6 824±3.93 07429 267.503±4 701.86 546**##35.6 477±4.80 278**## 注:“*”代表與正常對(duì)照組比較,“*”P(pán)
3 分析與討論
血管新生(angiogenesis)[5]主要是在原有的毛細(xì)血管與/或微靜脈基礎(chǔ)上通過(guò)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移,從先前存在的血管處以芽生或非芽生(或稱(chēng)套迭)的形式生成新的毛細(xì)血管的過(guò)程。影響血管新生的因素有很多,如鍛煉、缺血、低氧、腫瘤等一些生理或病理過(guò)程,這些過(guò)程都能誘發(fā)血管的新生。人類(lèi)生來(lái)具有冠狀動(dòng)脈側(cè)支血管,但沒(méi)有充分的側(cè)支循環(huán)。心肌缺血缺氧刺激可以誘導(dǎo)側(cè)支循環(huán)的開(kāi)放和血管新生,改善心肌缺血狀態(tài),使冠心病患者得到有效的治療,對(duì)心肌梗塞后微血管的重建也有積極的意義,但缺氧誘導(dǎo)血管新生的程度與低氧濃度、刺激時(shí)間的長(zhǎng)短、有無(wú)運(yùn)動(dòng)介入等因素有關(guān)。
3.1 低氧與血管生成 本研究發(fā)現(xiàn),單純低氧組不能顯著促進(jìn)大鼠心肌組織血管的生成,但是有許多CD34染色不是很深,成絲狀的血管樣結(jié)構(gòu),還沒(méi)有形成功能性的血管。這與某些學(xué)者的研究結(jié)果不相一致,國(guó)內(nèi)有學(xué)者[6]觀察大鼠在模擬5 000 m高原低氧5 d、15 d和30 d后,心肌毛細(xì)血管、血供和心功能變化。發(fā)現(xiàn):急性低氧5 d時(shí),心肌毛細(xì)血管未新生,心肌血流量顯著增加;隨低氧時(shí)間的推移,15 d以后,毛細(xì)血管增生。鄭瀾[7]等在低氧訓(xùn)練促進(jìn)心肌組織微血管體視學(xué)研究中表明,僅經(jīng)低氧處理不能增加大鼠心肌組織微血管密度,低氧中毛細(xì)血管密度的增加是因?yàn)榧±w維橫斷面減少,而不是由于血管新生。Olfert[8]等研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期低氧未能增加毛細(xì)血管/肌纖維比,毛細(xì)血管數(shù)量也無(wú)增加。產(chǎn)生這些矛盾結(jié)果的原因可能與受試對(duì)象、低氧程度、低氧時(shí)間及低氧時(shí)的其它環(huán)境等因素有關(guān)。
研究發(fā)現(xiàn)短期的低氧可誘導(dǎo)大鼠心肌VEGF表達(dá)升高,從而促進(jìn)毛細(xì)血管的生成反應(yīng),如延長(zhǎng)低氧時(shí)間,VEGF表達(dá)將受到抑制,降低血管生成反應(yīng)的發(fā)生。這是因?yàn)闄C(jī)體內(nèi)由缺氧引發(fā)VEGF發(fā)生的這一系統(tǒng)存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制。隨著低氧時(shí)間的延長(zhǎng),出現(xiàn)了機(jī)體對(duì)缺氧的習(xí)服,反復(fù)的缺氧使VEGF對(duì)缺氧不敏感,逐步恢復(fù)到基礎(chǔ)水平,毛細(xì)血管不再發(fā)生增生。本文研究中低氧試驗(yàn)的時(shí)間長(zhǎng)達(dá)10周,使機(jī)體對(duì)缺氧產(chǎn)生了習(xí)服,因此本文的研究中毛細(xì)血管的增生不是很明顯。
3.2 運(yùn)動(dòng)與血管生成 耐力訓(xùn)練在使心肌代謝能力增長(zhǎng)的同時(shí),產(chǎn)生血管生成反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組心肌組織CD34的蛋白表達(dá)豐富,較不運(yùn)動(dòng)組和低氧組有顯著性差別。對(duì)遞增負(fù)荷耐力訓(xùn)練的研究也表明,心肌組織血管床橫斷面積的增加主要在于小動(dòng)脈數(shù)量和大血管的管徑的增加。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),增加的原因是由于在毛細(xì)血管生成的同時(shí),有一部分毛細(xì)血管通過(guò)“動(dòng)脈化”途徑轉(zhuǎn)變成動(dòng)脈,從而掩蓋了毛細(xì)血管的新生這一現(xiàn)象[9]。Tagarakis[10]等的研究認(rèn)為,運(yùn)動(dòng)可使心肌毛細(xì)血管密度顯著增加。大量文獻(xiàn)也表明,毛細(xì)血管在運(yùn)動(dòng)中發(fā)生了生理性或病理性重塑:適宜的運(yùn)動(dòng)負(fù)荷導(dǎo)致心肌組織中毛細(xì)血管數(shù)量增多。Leon和Bloor[11]用HE染色用墨汁灌注的方法先后研究了幼年,成年和老年大鼠經(jīng)游泳訓(xùn)練后心肌毛細(xì)血及毛細(xì)血管與心肌纖維比值(C:F),得出結(jié)果:C:F各年齡組增多,提示毛細(xì)血管增多。
較多的研究報(bào)道[12]:正常動(dòng)物在運(yùn)動(dòng)條件下VEGFmRNA顯著升高,這種條件并不產(chǎn)生明顯低氧,說(shuō)明肌肉收縮時(shí)還要其它信號(hào)能提高VEGFmRNA。這些信號(hào)可由運(yùn)動(dòng)中關(guān)系血流量的刺激源和/或肌肉運(yùn)動(dòng)時(shí)負(fù)荷導(dǎo)致的機(jī)械變化而引起。例如:運(yùn)動(dòng)時(shí)剪切力的增加可以提高NO水平[13],而適量的NO可激活VEGF的表達(dá),促進(jìn)血管新生。機(jī)械刺激還可擾亂基底膜中與肝素結(jié)合的bFGF,促進(jìn)VEGF的表達(dá)[14]。隨著訓(xùn)練時(shí)間的延長(zhǎng)VEGF對(duì)運(yùn)動(dòng)的反應(yīng)削弱,運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的VEGF水平升高可對(duì)訓(xùn)練產(chǎn)生適應(yīng)。
因?yàn)楸驹囼?yàn)常氧訓(xùn)練的方案每個(gè)星期采用的都是遞增負(fù)荷,使運(yùn)動(dòng)保持對(duì)VEGF的持續(xù)刺激,誘導(dǎo)大量的VEGF表達(dá),促進(jìn)血管的新生。因此本試驗(yàn)結(jié)果顯示運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組有血管新生。
3.3 低氧訓(xùn)練與血管生成 低氧訓(xùn)練使人體承受環(huán)境缺氧和負(fù)荷缺氧的雙重刺激,因此有著比單一訓(xùn)練刺激更高水平的適應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn),在低氧訓(xùn)練狀態(tài)下大鼠心肌組織有大量的新生血管生成。這與很多學(xué)者的研究結(jié)果相吻合:鄭瀾的研究結(jié)果表明[7]低氧運(yùn)動(dòng)可使心肌組織以芽生的方式或者非芽生的方式形成新的毛細(xì)血管,而通過(guò)透射電鏡可觀察到是以非芽生的血管生成方式為主。陳福刁[15]等研究經(jīng)過(guò)4周的每天12 h的海拔4 000 m慢性間歇低氧訓(xùn)練的大鼠,其心肌毛細(xì)血管產(chǎn)生適應(yīng)性改變。毛杉杉[16]等觀察到急性低氧力竭運(yùn)動(dòng)可引起心肌毛細(xì)血管新生,但屬于速發(fā)效應(yīng)。黃麗英[17]等發(fā)現(xiàn)每天12 h的海拔4 000 m慢性間歇低氧訓(xùn)練能顯著增加心肌組織的微血管。另外研究表明[18],適度的間歇低氧適應(yīng)結(jié)合運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可更好地促進(jìn)心肌VEGFmRNA的表達(dá),促進(jìn)心肌血管再生。
同常氧訓(xùn)練一樣,隨著心肌對(duì)低氧運(yùn)動(dòng)的適應(yīng),VEGFmRNA水平對(duì)低氧訓(xùn)練的升高反應(yīng)減弱。這是因?yàn)榻M織局部缺氧形成的氧梯度,是VEGF表達(dá)升高的先決條件。一旦這種氧梯度不存在或消失,VEGF就不會(huì)表達(dá)或是表達(dá)上調(diào)的VEGF開(kāi)始下降[19],從而使血管生成反應(yīng)消失。因本試驗(yàn)低氧訓(xùn)練的方案每個(gè)星期采用的都是遞增負(fù)荷,使機(jī)體在前一個(gè)星期產(chǎn)生的習(xí)服,在下一個(gè)星期很快就在新的負(fù)荷刺激作用下產(chǎn)生不習(xí)服,始終使機(jī)體的局部缺氧組織產(chǎn)生氧梯度,因此試驗(yàn)結(jié)果表明低氧訓(xùn)練組有著豐富的血管新生。
盡管各低氧訓(xùn)練組能顯著促進(jìn)心肌組織的血管新生,但是各低氧組對(duì)心肌組織血管新生的影響程度還是略有不同。從各低氧訓(xùn)練組相互比較來(lái)看,高住高練低練在血管生成的效果方面優(yōu)于其他的低氧訓(xùn)練組,而高住低練和低住高練對(duì)血管新生的影響差別不大。這可能是高住低練訓(xùn)練法雖然有利于訓(xùn)練強(qiáng)度和量的提高,但是,卻分散了低氧與訓(xùn)練的雙重刺激強(qiáng)度。低住高練訓(xùn)練法雖然通過(guò)缺氧和訓(xùn)練的雙重負(fù)荷對(duì)機(jī)體造成一定刺激,但由于缺氧暴露時(shí)間短,對(duì)缺氧刺激時(shí)間不足,對(duì)機(jī)體的刺激強(qiáng)度也不大。而高住高練低練,既讓運(yùn)動(dòng)員居住低氧環(huán)境中,又同時(shí)在低氧環(huán)境中進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練,加大了低氧與訓(xùn)練對(duì)機(jī)體的刺激強(qiáng)度,使機(jī)體各個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)生更深刻的代償性適應(yīng),從而使血管生成的效果更顯著。研究結(jié)果表明高住低練組與低住高練組相比,微血管密度增加不明顯,但微血管染色的程度加深。高住高練低練組與高住低練組、低住高練組相比,微血管增加明顯(P
從以上的分析討論中我們可以得知,低氧訓(xùn)練能很好地促進(jìn)心肌組織毛細(xì)血管的新生,尤其是高住高練低練訓(xùn)練法,血管生成很豐富。因此采用遞增負(fù)荷跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練及低氧作為處理因素,建立起來(lái)的這種低氧加訓(xùn)練的低氧訓(xùn)練動(dòng)物模型,能很好地促進(jìn)心肌組織的血管新生,能為血管的生理性重建提供一個(gè)新的研究方法和途徑。
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關(guān)鍵詞:國(guó)防生;Zigbee;實(shí)戰(zhàn)模擬訓(xùn)練;無(wú)線傳輸
中圖分類(lèi)號(hào):TN929.5;TP212.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-7712 (2013) 14-0000-01
國(guó)防生作為培養(yǎng)軍隊(duì)干部的重要方式,是我軍干部培養(yǎng)制度的重大改革。而國(guó)防生的在校日常訓(xùn)練是國(guó)防生培養(yǎng)質(zhì)量的關(guān)鍵。當(dāng)前國(guó)防生實(shí)戰(zhàn)模擬訓(xùn)練環(huán)節(jié)存在兩軍近距作戰(zhàn)演練過(guò)程不清晰、作戰(zhàn)結(jié)果不詳細(xì)的弊端,基于此,我們改進(jìn)了國(guó)防生的實(shí)戰(zhàn)模擬訓(xùn)練方式,在原有實(shí)戰(zhàn)模擬的基礎(chǔ)上,通過(guò)加入各個(gè)模塊和對(duì)原有射擊模塊的改進(jìn)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)模擬結(jié)果的統(tǒng)計(jì)和顯示,以此激發(fā)國(guó)防生訓(xùn)練的熱情、提高訓(xùn)練質(zhì)量,避免訓(xùn)練的盲目性。
一、系統(tǒng)概述
Zigbee是基于IEEE802.15.4標(biāo)準(zhǔn)的低功耗個(gè)域網(wǎng)協(xié)議。根據(jù)這個(gè)協(xié)議規(guī)定的技術(shù)是一種短距離、低功耗的無(wú)線通信技術(shù)。這一名稱(chēng)來(lái)源于蜜蜂的八字舞,由于蜜蜂(bee)是靠飛翔和“嗡嗡”(zig)地抖動(dòng)翅膀的“舞蹈”來(lái)與同伴傳遞花粉所在方位信息,也就是說(shuō)蜜蜂依靠這樣的方式構(gòu)成了群體中的通信網(wǎng)絡(luò)。其特點(diǎn)是近距離、低復(fù)雜度、自組織、低功耗、低數(shù)據(jù)速率、低成本。
訓(xùn)練設(shè)備由兩個(gè)模塊組成:激光收發(fā)模塊和zigbee無(wú)線傳輸后臺(tái)模塊。激光收發(fā)來(lái)模擬槍彈的擊中與射擊,zigbee無(wú)線傳輸后臺(tái)對(duì)實(shí)戰(zhàn)模擬中各人的傷亡情況作一統(tǒng)計(jì)并在電腦端實(shí)時(shí)顯示更新。系統(tǒng)整體構(gòu)建如圖1所示。
二、模塊射擊
(一)激光收發(fā)模塊
首先需要一個(gè)步槍的模型。槍最核心的裝置是激光發(fā)射器,激光發(fā)射通過(guò)扳機(jī)來(lái)控制,按下扳機(jī)發(fā)射激光的同時(shí)會(huì)觸發(fā)音頻裝置,音頻裝置產(chǎn)生模擬的槍聲。發(fā)射的激光暫定使用激光。激光感應(yīng)器對(duì)應(yīng)于激光發(fā)射器,一個(gè)人身上擬做8—10個(gè)感應(yīng)點(diǎn)(頭盔上4—5個(gè),胸前2—3個(gè),后背2—3個(gè)),每一個(gè)感應(yīng)點(diǎn)有硬幣大小,將發(fā)射出來(lái)的激光適當(dāng)?shù)陌l(fā)散,每一個(gè)感應(yīng)點(diǎn)還是比較容易感應(yīng)到發(fā)射來(lái)的激光,這樣激光接收面就會(huì)擴(kuò)大。當(dāng)感應(yīng)點(diǎn)接受到激光時(shí),產(chǎn)生一個(gè)無(wú)線信號(hào)發(fā)送給后臺(tái)[1],以表示中槍了,便于后臺(tái)統(tǒng)計(jì)中槍數(shù),同時(shí)觸發(fā)音頻裝置,產(chǎn)生模擬的中槍聲??紤]到實(shí)戰(zhàn)時(shí),每把槍都有一定的子彈數(shù)目,在按下扳機(jī)時(shí),會(huì)觸發(fā)單片機(jī)計(jì)數(shù)器計(jì)一次數(shù)[2],當(dāng)計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)到限定子彈數(shù)數(shù)值時(shí),激光發(fā)射器的電路便會(huì)斷開(kāi),槍便發(fā)射不了“子彈”。同時(shí)考慮到便于國(guó)防生訓(xùn)練的漸進(jìn)性,可以限定當(dāng)一個(gè)人中槍多少次定義出犧牲狀態(tài),當(dāng)激光感應(yīng)裝置接收到激光時(shí)會(huì)觸發(fā)一個(gè)單片機(jī)計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù),當(dāng)其記數(shù)到設(shè)定值時(shí),會(huì)產(chǎn)生一個(gè)無(wú)線信號(hào)給激光發(fā)射器,發(fā)射器便會(huì)斷開(kāi)激光發(fā)射電路,使發(fā)射槍發(fā)射不了激光。
(二)Zigbee無(wú)線控制后臺(tái)模塊
該模塊使用時(shí)首先建立zigbee分布式網(wǎng)絡(luò),這其中,每個(gè)人身上的激光接收裝置就相當(dāng)于分布網(wǎng)絡(luò)的各個(gè)節(jié)點(diǎn)。網(wǎng)狀分布的各個(gè)zigbee節(jié)點(diǎn)對(duì)各人“中彈”信息及“子彈”發(fā)射信息進(jìn)行數(shù)據(jù)采集處理,然后將數(shù)據(jù)傳送至主節(jié)點(diǎn),由主節(jié)點(diǎn)再將匯總的數(shù)據(jù)通過(guò)串口傳送至電腦后臺(tái)數(shù)據(jù)庫(kù)中。最后在電腦端用MFC編寫(xiě)相應(yīng)的人機(jī)界面對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行實(shí)時(shí)顯示和分析并在電腦屏幕終端顯示各人、各軍傷亡情況和子彈存余等的統(tǒng)計(jì)情況[3]。
三、設(shè)備推廣與應(yīng)用
該設(shè)備建議兩軍野外模擬近距對(duì)戰(zhàn)使用,使用時(shí)一方為,一方為藍(lán)軍,每個(gè)人身上裝有zigbee無(wú)線網(wǎng)絡(luò)分布節(jié)點(diǎn)(即激光收發(fā)設(shè)備——步槍?zhuān)?。?duì)戰(zhàn)時(shí),在跑動(dòng)過(guò)程中,若1號(hào)發(fā)射的激光被藍(lán)軍1號(hào)接收,則視為藍(lán)軍1號(hào)被1號(hào)擊中,同時(shí)該信息被分布節(jié)點(diǎn)采集處理后傳送至串口,軟件處理后在電腦屏幕顯示藍(lán)軍1號(hào)的中彈情況,若中彈超過(guò)一定次數(shù),則顯示該人犧牲。以此類(lèi)推,兩軍各人的中彈情況和傷亡情況可以實(shí)時(shí)顯示在電腦屏幕上以供指揮人員參考。
設(shè)備很好地實(shí)現(xiàn)了國(guó)防生野外模擬近距作戰(zhàn)訓(xùn)練的結(jié)果實(shí)時(shí)統(tǒng)計(jì)和顯示,便于指揮教練了解國(guó)防生訓(xùn)練強(qiáng)度和質(zhì)量,制定出合理科學(xué)的后期訓(xùn)練方案。在一定程度上達(dá)到了提高訓(xùn)練質(zhì)量、激發(fā)國(guó)防生訓(xùn)練熱情、科學(xué)指揮作戰(zhàn)等效果。結(jié)合zigbee的使用能較好地提高國(guó)防訓(xùn)練的效果,有很高的實(shí)用價(jià)值,且設(shè)備制作成本不高、攜帶便利、使用程序簡(jiǎn)單、電腦顯示端簡(jiǎn)潔明了有較強(qiáng)的推廣型。
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【關(guān)鍵詞】 組織;異體異位移植;;卵胞漿內(nèi)單顯微注射;新生小鼠
摘要:目的 采用卵胞漿內(nèi)單顯微注射(ICSI)技術(shù)探討新生小鼠組織異體異位移植到裸鼠體內(nèi)后所生成的受精能力。方法 將含有原始生精細(xì)胞的新生1-2d小鼠組織異體異位移植到BALB/c-nu/nu免疫缺陷小鼠背部皮下。8周后取出移植物,通過(guò)常規(guī)染色和電鏡技術(shù)對(duì)生精小管中生精細(xì)胞組成和形態(tài)進(jìn)行觀察;以薄層明膠水解法檢測(cè)頂體蛋白酶活性;采用ISCI技術(shù)檢測(cè)移植物中具有成熟形態(tài)的受精能力。結(jié)果 移植物的HE染色發(fā)現(xiàn),新生小鼠組織在裸鼠體內(nèi)已啟動(dòng)并進(jìn)行發(fā)生過(guò)程,生精小管中含有包括在內(nèi)的所有類(lèi)型生精細(xì)胞;移植物組織經(jīng)處理后,可計(jì)數(shù)到具有鐮刀頭狀的長(zhǎng)尾約1×103個(gè)/mg移植物;透射電鏡標(biāo)本中觀察到的精原細(xì)胞和精母細(xì)胞均具有正常超微結(jié)構(gòu);薄層明膠水解法檢測(cè)可觀察到頂體蛋白酶呈陽(yáng)性反應(yīng)的;ICSI結(jié)果顯示,單純ICSI處理組與ICSI+電激活組均有受精和卵裂現(xiàn)象發(fā)生。結(jié)論 僅含有原始生精細(xì)胞的新生小鼠組織在異體異位移植到裸鼠體內(nèi)后,可以產(chǎn)生形態(tài)正常并具有受精能力的。
關(guān)鍵詞:組織;異體異位移植;;卵胞漿內(nèi)單顯微注射;新生小鼠
Functional study of spermatozoa derived from neonatal mouse testes grafted into immunodeficient mice
ABSTRACT: Objective To investigate the fertilization ability of spermatozoa derived from neonatal mouse testes grafted into immunodeficient mice by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). Methods Neonatal Kunming mouse testes containing primitive spermatogenic cells as the only germ cells were grafted under the back skin of castrated BALB/cnu/nu mice. Grafts were taken out after 8 weeks. The initiation and restoration of spermatogenesis in grafts was documented by histological analyses. The ultrastructure of spermatogenic cells in grafts was observed using transmission electron microscopy. The activity of acrosomal enzyme of spermatozoa was analyzed with gelatin substrate test. The fertilization ability of spermatozoa was determined by using intracytoplasmic sperm injection. Results Histological analysis showed complete restoration of spermatogenesis in the grafts after 8 weeks. 1×103 spermatozoa with normal morphological appearance in 1mg suspended graft tissue were counted. Spermatogonia and spermatocytes with normal ultrastructure were observed. Gelatin substrate test positive spermatozoa were found implicating the activity of acrosomal enzyme of the spermatozoa. Cleavages were observed both in the ICSI group and the ICSI plus electric stimulation group. Conclusion Spermatozoa with normal morphology and fertilization ability can be developed by allografting neonatal mouse testes under the back skin of immunodeficient mice.
KEY WORDS: testis; allograft; spermatozoa; intracytoplasmic sperm injection; neonatal mouse
有關(guān)生精細(xì)胞體外成熟的研究目前主要是通過(guò)體外培養(yǎng)和生精細(xì)胞移植來(lái)實(shí)現(xiàn)。其中在借助免疫缺陷小鼠作為孵化器進(jìn)行同種或異種組織移植,以實(shí)現(xiàn)生精細(xì)胞在異體異位發(fā)育成熟方面國(guó)外學(xué)者已做了一些工作[13]。本研究組在前期工作中,將新生小鼠組織移植到去勢(shì)免疫缺陷小鼠體內(nèi),40d后在移植物中觀察到了的發(fā)生[4],在采用人類(lèi)未成熟組織所進(jìn)行的同類(lèi)實(shí)驗(yàn)中也觀察到了生精細(xì)胞的進(jìn)一步發(fā)育[5]。在前期工作基礎(chǔ)上,本研究采用薄層明膠水解法、透射電鏡和卵胞漿內(nèi)單顯微注射技術(shù),對(duì)所獲得的移植物中生精細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)、的頂體酶活性及其受精能力等方面進(jìn)行了進(jìn)一步的觀察和研究。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 BALB/cnu/nu無(wú)胸腺裸小鼠和昆明小鼠均購(gòu)自南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,裸鼠置于小鼠單體換氣籠盒系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng),昆明小鼠按常規(guī)方法飼養(yǎng)及傳代。
1.2 主要試劑 透明質(zhì)酸酶、牛血清白蛋白、乳酸鈉、丙酮酸鈉均為Sigma產(chǎn)品;體外卵培養(yǎng)用石蠟油為SAGE Media 產(chǎn)品;孕馬血清促性腺激素(PMSG)和人絨毛膜促性腺激素(HCG)分別購(gòu)于天津生物制品研究所和上海生化制藥廠;卵培養(yǎng)用CZB培養(yǎng)液、1.7mmol/L 氯化鍶激活液以及處理液為QUINNS產(chǎn)品。
1.3 方法
1.3.1 組織移植和移植物標(biāo)本采集 參照文獻(xiàn)[4]進(jìn)行新生小鼠組織移植。于移植后8周取2只受體動(dòng)物行脫頸處死,將背部的移植物包塊取出,一部分用于常規(guī)染色和電鏡標(biāo)本的制備,其余部分在HEPESCZB培養(yǎng)基中切碎,用吸管反復(fù)吹打,過(guò)100μm濾網(wǎng)去除大塊組織,在1200r/min下離心10min,用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液,在光鏡下進(jìn)行長(zhǎng)尾計(jì)數(shù)。
1.3.2 組織學(xué)標(biāo)本制備 將取出的移植物組織分別用4℃預(yù)冷的Bouin液和25g/L戊二醛溶液固定,分別用于常規(guī)HE染色和透射電鏡標(biāo)本制備(電鏡標(biāo)本由廣州南方醫(yī)科大學(xué)分析測(cè)試中心制作、分析并照相)。
1.3.3 移植物中頂體蛋白酶活性檢測(cè)(薄層明膠水解法) 取40μL細(xì)胞懸液,盡量均勻涂布在已預(yù)先制備的涂有50g/L明膠的載波片上;干燥后放入濕盒內(nèi),37℃孵育2h;然后用相差顯微鏡觀察頭部呈環(huán)的情況。作為陽(yáng)性對(duì)照,也用正常性成熟小鼠進(jìn)行同樣實(shí)驗(yàn)。
1.3.4 卵胞漿內(nèi)單顯微注射 ①卵子準(zhǔn)備:6周齡雌性昆明小鼠4只,腹腔注射5u/mL的PMSG,48h后腹腔注射5u/mL的HCG行超排卵,并于注射HCG 16-18h后將小鼠脫頸處死,于輸卵管膨大部收集卵丘卵母細(xì)胞團(tuán);用含1g/L透明質(zhì)酸酶的HEPESCZB處理3-5min去除卵丘細(xì)胞;經(jīng)洗滌后置于CZB液中,置37℃、5%(體積分?jǐn)?shù))CO2培養(yǎng)箱孵育備用。②顯微操作:將從移植物獲得的細(xì)胞懸液于1500r/min下離心10min,去上清,沉淀用處理液洗滌2次,用500μL處理液制成ICSI用細(xì)胞懸液,置37℃、5%(體積分?jǐn)?shù))CO2培養(yǎng)箱孵育1-2h;將處理好的細(xì)胞懸液在ICSI皿中制成小滴,每滴約10-20μL,從中選取形態(tài)發(fā)育正常的移至100g/L PVP中,洗滌去除膜上雜質(zhì);機(jī)械法去除2/3尾部后,將帶有頭部的剩余部分注射入MII期的卵子的胞漿中。將注射后的卵子轉(zhuǎn)入CZB培養(yǎng)液中,置37℃、5%(體積分?jǐn)?shù))CO2培養(yǎng)箱孵育并將其分為2組,單純ICSI組(顯微注射后未加電激活)和ICSI加電激活組(注射后的卵子行電激活處理1h),定期觀察兩組卵的受精和卵裂情況。
2 結(jié)果
2.1 移植物的組織形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)觀察 經(jīng)計(jì)數(shù),移植物中帶有鐮刀狀頭部的長(zhǎng)尾數(shù)量為1×103個(gè)/mg移植物組織(圖1A)。常規(guī)HE染色觀察顯示,移植8周后的新生小鼠組織在裸鼠體內(nèi)已啟動(dòng)了發(fā)生過(guò)程,發(fā)育成包含所有生精細(xì)胞類(lèi)型的生精小管上皮(圖1B)。在對(duì)移植物標(biāo)本進(jìn)行的超微結(jié)構(gòu)觀察中,雖未直接觀察到已發(fā)育成的,但可見(jiàn)一些結(jié)構(gòu)正常的生精細(xì)胞,包括精原細(xì)胞和精母細(xì)胞等(圖1C)。
2.2 頂體蛋白酶活性 由于頭部所含頂體蛋白酶對(duì)涂布于載玻片上明膠的水解作用,在頭部周?chē)鷧^(qū)域觀察到一圈較明亮的暈輪區(qū)。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),移植物中可見(jiàn)頂體蛋白酶水解反應(yīng)陽(yáng)性的(圖2A),但與作為對(duì)照的正常小鼠相比(圖2B),移植物頭部周?chē)臅炤唴^(qū)域普遍較小并可見(jiàn)到數(shù)量較多的頂體蛋白酶水解反應(yīng)陰性的(圖2C)。
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2.3 卵胞漿內(nèi)單顯微注射 經(jīng)超排卵和處理后獲MII期卵母細(xì)胞54枚。單純ICSI組15枚,ICSI加電激活組39枚。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),ICSI加電激活組的受精率為43.6%,其中觀察到2原核2極體共9枚,隨后觀察到2細(xì)胞17枚、4細(xì)胞12枚以及8細(xì)胞1枚;單純ICSI組受精率為20.0%,出現(xiàn)2原核并排出極體的時(shí)間比ICSI加電激活組晚10h左右,隨后觀察可見(jiàn)2細(xì)胞3枚;4細(xì)胞1枚(圖3)。
圖1 移植物的組織形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)觀察(略)
Fig.1 Morphological, histological and ultrastructural observation on grafts
A: falciform headed mouse sperm (red) in the grafts (×100);B: photomicrograph of histological section of the grafts used for ICSI showing a complete restoration of spermatogenesis (HE×400);C: electron micrograph showing part of the seminiferous epithelium composed of basement membrane (red), typeB spermatogonia (yellow) and spermatocytes (blue) with normal ultrastructure (×3000)
圖2 頂體酶活性測(cè)定(略)
Fig.2 Determination of acrosomal enzyme activity with the gelatin substrate method (×400)
A: a spermatozoon from the graft creating a zone of proteolysis around the head; B: a spermatozoon from normal adult mouse showing a wider zone of proteolysis; C: a spermatozoon without acrosomal enzyme activity
圖3 移植物中進(jìn)行ICSI后卵裂情況觀察(略)
Fig.3 Observation on cleavage after ICSI with sperm from the grafts
A: 2 pronuclei and 2 polar bodies (×400); B: asynchronous cleavage at the day 2(×100); C: the fourcell and eightcell stage at the day 3 (×100)
3 討論
對(duì)于因發(fā)生阻滯而導(dǎo)致生精障礙的患者來(lái)說(shuō),如何克服體內(nèi)發(fā)育障礙,使本身具有的原始生精細(xì)胞在體外特定環(huán)境中進(jìn)一步發(fā)育成為長(zhǎng)形細(xì)胞或,是目前男科學(xué)工作者致力解決的問(wèn)題。Honaramooz等[1]2002年首次報(bào)道采用免疫缺陷動(dòng)物作為受體進(jìn)行組織異體異位移植研究。國(guó)內(nèi)在2004年報(bào)道了采用該動(dòng)物模型進(jìn)行的新生小鼠組織和人胎兒組織的生長(zhǎng)發(fā)育觀察[45],并在小鼠的實(shí)驗(yàn)中觀察到了從原始生精細(xì)胞到的完整生精過(guò)程。本研究是在前期研究工作基礎(chǔ)上,對(duì)采用該動(dòng)物模型所獲得的小鼠進(jìn)行的一系列功能性研究。
與在體情況不同,組織移植物中產(chǎn)生的無(wú)法通過(guò)附睪排出;此外,F(xiàn)SH等激素的水平亦與正常動(dòng)物中有所不同[2]。前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),移植后5周的移植物中已出現(xiàn)各級(jí)生精細(xì)胞,包括一定數(shù)量的長(zhǎng)形細(xì)胞,第6-8周達(dá)到發(fā)育的高峰,之后不僅不再繼續(xù)發(fā)展,生精小管甚至開(kāi)始出現(xiàn)退化,Sertoli細(xì)胞的胞漿明顯萎縮,嵌入其中的生精細(xì)胞(包括晚期精母細(xì)胞、圓形細(xì)胞和長(zhǎng)形細(xì)胞等)大量脫落,并發(fā)生凋亡。因而移植物中的最佳取出時(shí)間也是ICSI成功與否的一個(gè)重要因素。據(jù)此,本研究選取8周移植物中的作為受精能力檢測(cè)的標(biāo)本來(lái)源,并成功觀察到卵裂的發(fā)生。
形成過(guò)程中頂體的發(fā)育是重要的事件之一。朱偉杰等[6]研究證實(shí),已初步發(fā)育出具備活性的頂體蛋白酶,其酶活性陽(yáng)性率超過(guò)50%。對(duì)頂體酶活性的檢測(cè)不僅可以評(píng)價(jià)頂體酶發(fā)育情況,還有助于了解的降解程度,這對(duì)于我們了解移植物中發(fā)育狀況和確定最佳移植物取出時(shí)間尤為重要。薄層明膠水解法能夠觀察極少量標(biāo)本甚至單個(gè)的頂體酶活性情況,其基本原理為頭部所含頂體蛋白酶對(duì)其周?chē)髂z的水解作用,使其周?chē)纬梢蝗γ髁恋臅炤唴^(qū),通過(guò)測(cè)量其直徑可以間接了解頂體酶活性情況。本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),移植物含有頂體蛋白酶反應(yīng)陽(yáng)性的,但數(shù)量相對(duì)正常陽(yáng)性對(duì)照少,所形成的暈輪區(qū)域也相對(duì)較小。發(fā)生經(jīng)歷增殖、減數(shù)分裂和分化等復(fù)雜過(guò)程,這些過(guò)程均有可能由于急性缺血、輸精管缺如、促性腺激素水平改變等造成生精細(xì)胞的凋亡[78]。類(lèi)似于先天性輸精管缺如,移植于裸鼠背部的缺乏的正常輸出通道,因而導(dǎo)致產(chǎn)生的滯留時(shí)間長(zhǎng),誘發(fā)凋亡甚至死亡,這也是造成計(jì)數(shù)和頂體蛋白酶活性偏低的原因之一。
通過(guò)自然生精過(guò)程發(fā)育成熟的可以使成熟的卵母細(xì)胞受精,而未成熟組織通過(guò)異體異位移植后所產(chǎn)生的是否也具有同樣的功能?為此,本研究將組織移植物中形態(tài)發(fā)育正常的注入到成熟的MII期卵母細(xì)胞胞質(zhì)中,并輔以電激活。實(shí)驗(yàn)中觀察到有2原核和4細(xì)胞胚胎出現(xiàn)。為排除電激活步驟有可能造成孤雌生殖的可能性,我們?cè)O(shè)立了單獨(dú)ICSI組作為對(duì)照。結(jié)果顯示,單獨(dú)ICSI也成功形成了2原核以及渡過(guò)了2細(xì)胞期和4細(xì)胞期,但受精時(shí)間要比第一組晚約10h。與正常受精有所不同,采用顯微注射的方法使進(jìn)入卵子,省略了自然受精時(shí)需經(jīng)過(guò)的許多環(huán)節(jié),因此往往不能獲得理想的精卵融合。研究顯示,將卵母細(xì)胞激活,有利于注入的細(xì)胞融合及受精卵的發(fā)育。因此,本研究中采用了ICSI輔以電激活的方法,受精率為43.6%。而單純ICSI組受精率為20.0%,并且未觀察到胚胎發(fā)育至8細(xì)胞。胚胎的進(jìn)一步發(fā)育和胚胎的結(jié)局以及未成熟小鼠組織異體異位移植后所產(chǎn)生基因水平的檢測(cè)分析還有待進(jìn)一步研究探討。
致謝:陳大元教授、歐陽(yáng)迎春博士和蔣滿喜博士等(中科院動(dòng)物所生殖生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,北京 100080)在ISCI操作方面給予了極大幫助,本文作者在此表示衷心的感謝。
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