化學(xué)發(fā)光免疫精選(九篇)

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第1篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

關(guān)鍵詞：化學(xué)發(fā)光免疫法；免疫放射法；促甲狀腺激素

促甲狀腺激素（thyrotropin，thyroid stimulating hormone，TSH）是腺垂體分泌的促進(jìn)甲狀腺的生長(zhǎng)和機(jī)能的激素。TSH多以游離的形式存在于血液中，其含量很低，是性質(zhì)穩(wěn)定的糖蛋白激素。TSH受下丘腦一腦垂體一甲狀腺軸線控制，當(dāng)人體的甲狀腺功能發(fā)生變化時(shí)，血清TSH的水平出現(xiàn)波動(dòng)。甲狀腺機(jī)能低下即甲減者的表現(xiàn)，多為血清中的TSH水平增高，甲狀腺功能亢進(jìn)即甲亢者，多為血清中TSH的降低。臨床上，因此，TSH是判斷甲狀腺功能和下丘腦垂體甲狀腺軸功能是否正常的一線指標(biāo)[1-2]。作者采用化學(xué)發(fā)光免疫法（CLIA）與免疫放射法（IRMA）兩種方法同時(shí)測(cè)定正常人及患者血清TSH，對(duì)其結(jié)果比較分析，從不同角度探討兩種檢查方法在甲狀腺功能疾病中的臨床診斷價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 所有人員均為來(lái)我單位健康查體或就診的人員，見表1。

1.2儀器與試劑 CLIA采用美國(guó)雅培公司Axsym免疫化學(xué)發(fā)光儀，IRMA采用西安262廠F5-20089γ-放射免疫計(jì)數(shù)器。免疫化學(xué)發(fā)光測(cè)定試劑盒，由美國(guó)雅培公司提供，IRMA采用中國(guó)原子能科學(xué)研究院提供的試劑盒。

1.3方法

1.3.1樣品采集 于每天上午采集研究對(duì)象空腹血清3 ml，然后分離血清，立即進(jìn)行檢測(cè)或-20℃冷凍保存，1 w內(nèi)檢測(cè)。

1.3.2 TSH的檢測(cè)

1.3.2.1批內(nèi)變異 分高、中、低三份質(zhì)控樣本，所有質(zhì)控樣本分別用CLIA和IRMA測(cè)定血清TSH含量，重復(fù)測(cè)定10次，計(jì)算批內(nèi)變異系數(shù)。

1.3.2.2批間變異 將高、中、低三份血清樣品，分別置于20只試管中，密封后置-20℃冰凍保存，于20個(gè)測(cè)定日復(fù)融后檢測(cè)其含量，計(jì)算其變異系數(shù)。

1.3.2.3結(jié)果比較 將三組試驗(yàn)人員共213份血清樣品同時(shí)采用CLIA和IRMA測(cè)定其TSH含量，對(duì)得出的結(jié)果進(jìn)行比較。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用（x±s）的形式表示，對(duì)兩種方法測(cè)得的結(jié)果行相關(guān)性分析，甲亢、甲減組和正常組比較采用T檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1批內(nèi)變異和批間變異，見表2。

結(jié)果表明，CLIA的重復(fù)性和精密度優(yōu)于IRMA。

2.2三組受試人員TSH測(cè)定結(jié)果比較，見表3。

2.3三組受試者診斷符合率比較，見表4。

TSH對(duì)甲亢組患者與甲減組患者的診斷符合率均較高，尤其是對(duì)于甲減的診斷，CLIA法檢測(cè)TSH幾乎是最為靈敏的考察指標(biāo)。

2.4相關(guān)性比較 用CLIA和IRMA法分別對(duì)受檢血清標(biāo)本進(jìn)行定量分析，結(jié)果表明，兩法測(cè)定結(jié)果相關(guān)系數(shù)為0.995，提示兩法相關(guān)性良好。

3討論

TSH 是腺垂體分泌的一種糖蛋白激素，主要功能是調(diào)節(jié)甲狀腺激素分泌，臨床上是反映甲狀腺功能非常敏感的指標(biāo)[3]。目前，常用的測(cè)定血清TSH 的方法有免疫放射分析法（IRMA）和化學(xué)發(fā)光法（CLIA）?；瘜W(xué)發(fā)光法（CLIA）測(cè)定是根據(jù)化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的輻射光的強(qiáng)度來(lái)檢測(cè)物質(zhì)含量的一種有效的痕量和微量分析方法[4]。

本報(bào)告數(shù)據(jù)顯示，CLIA和IRMA法檢測(cè)血清TSH相關(guān)性好。但比較兩種檢查方法，化學(xué)發(fā)光法具有以下優(yōu)點(diǎn)：①無(wú)污染：CLIA 法檢測(cè)以化學(xué)發(fā)光劑作為標(biāo)記物，試劑穩(wěn)定且無(wú)放射性，對(duì)周圍環(huán)境無(wú)污染，工作人員也不會(huì)損害；IRMA通常以125 I標(biāo)記，125 I半衰期僅為1個(gè)月左右，放射性碘對(duì)環(huán)境有污染，對(duì)工作人員也有傷害。②線性范圍寬：有報(bào)道顯示，低濃度時(shí)化學(xué)發(fā)光免疫分析法區(qū)線性范圍較寬，在低濃度范圍測(cè)定較免疫放射分析法更為準(zhǔn)確[5]。③自動(dòng)化程度高：化學(xué)發(fā)光免疫分析法自動(dòng)化操作，這就排除了人為的誤差，使操作更加簡(jiǎn)便，明顯優(yōu)于放射免疫法。④本組結(jié)果顯示， CLIA的重復(fù)性和精密度優(yōu)于IRMA。

綜上，CLIA在檢測(cè)血清TSH方面有著IRMA無(wú)法比擬優(yōu)勢(shì)，建議有條件的實(shí)驗(yàn)室采用。

參考文獻(xiàn)：

[1]尹東光，賀佑豐，劉一兵，等.促甲狀腺激素化學(xué)發(fā)光免疫分析的研究[J].分析化學(xué)研究報(bào)告，2004，7（32）：893-896.

[2]王華新，張立東，秦曉光.促甲狀腺激素檢驗(yàn)研究進(jìn)展[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2008，15（5）：328-331.

[3]范仙萍 趙愛萍.血清甲狀腺激素高靈敏度測(cè)定的臨床應(yīng)用探討[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2000，6 （7）：426 .

第2篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

【關(guān)鍵字】放射免疫法、化學(xué)發(fā)光免疫法、血清AFP、效果分析

【中圖分類號(hào)】R426 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）07-4045-02

臨床檢測(cè)血清AFP中，應(yīng)該對(duì)患者采用有效生長(zhǎng)激素檢測(cè)方式，這樣才可以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，提升患者的身體健康質(zhì)量，提高治病療效【1】。以下針對(duì)我院從2013年1月到2013年12月期間采集的100例住院患者血清標(biāo)本進(jìn)行分析，探討臨床中，采取化學(xué)發(fā)光免疫法與放射免疫法檢測(cè)血清AFP的效果。

1 資料與方法

1.1資料

對(duì)我院2013年1月到2013年12月的100例住院患者進(jìn)行血清標(biāo)本收集工作， 本次研究的血清標(biāo)本采集中，均是由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員在2小時(shí)內(nèi)，對(duì)清晨空腹患者抽取靜脈血3 ml，并排除患者有先天性疾病、心肝重要器官疾病；試驗(yàn)儀器包括德國(guó)羅氏公司的檢測(cè)試劑盒，以及電化學(xué)分析儀、放射免疫分析儀、深低溫；將患者隨機(jī)分配成對(duì)照組與試驗(yàn)組，且在每組中都具有50例患者的血清標(biāo)本，患者在性別、身體狀況以及年齡等資料方面，相互進(jìn)行比較后，不存在差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

對(duì)于對(duì)照組患者血清標(biāo)本檢測(cè)中，將會(huì)使用XAKP- 2000A/02 型 γ 計(jì)數(shù)儀【2】，并應(yīng)用中國(guó)原子能科學(xué)研究所提供的AFP 試劑盒，對(duì)患者的待檢測(cè)樣本進(jìn)行梯度稀釋，使檢測(cè)物濃度在12.5～8000umol/L范圍間，進(jìn)行放射免疫法檢測(cè)；對(duì)試驗(yàn)組患兒50例血清標(biāo)本檢測(cè)中，將會(huì)使用KL1- e411 型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測(cè)【3】，并稀釋其檢測(cè)樣本的梯度，可以保持檢測(cè)物濃度為12.5～8000umol/L，進(jìn)行電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定。對(duì)兩組檢測(cè)方法比較中，分析比對(duì)其檢測(cè)血清AFP水平差異，考察其之間的相關(guān)性；并對(duì)兩組檢測(cè)方法中的低值、中值、高值進(jìn)行記錄試驗(yàn)，且測(cè)定每日測(cè)定每份樣本22次，連續(xù)測(cè)20天，并考察批內(nèi)CV值。

1.3 統(tǒng)計(jì)處理

對(duì)本次兩組研究結(jié)果，可以應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SSPS 12.0【4】，針對(duì)最后兩組的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行處理， 在數(shù)據(jù)處理之中，計(jì)量資料我們將會(huì)用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，技術(shù)資料用x2檢驗(yàn)，設(shè)置統(tǒng)計(jì)學(xué)的水準(zhǔn)是a=0.05。

2結(jié)果

兩組檢測(cè)結(jié)果，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清AFP線性范圍更寬，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清AFP精密、靈敏度度更高，其兩組檢測(cè)結(jié)果之間差異非常顯著（ P

3討論

據(jù)悉，血清AFP是檢測(cè)原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的標(biāo)志物，是最靈敏性、特異性的腫瘤標(biāo)志，在臨床腫瘤診斷中發(fā)揮重要作用。針對(duì)血清AFP檢測(cè)中，應(yīng)該制定合理的檢測(cè)方案，才可以取得準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，提高肝癌患者的生活質(zhì)量。因此在臨床診斷檢測(cè)血清AFP中化學(xué)發(fā)光免疫法，較常規(guī)放射免疫法檢驗(yàn)有較好的效果，可以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、靈敏性、高度特異性。

化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清AFP，在臨床中具有較好的效果，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)作為抗原抗體反應(yīng)指示系統(tǒng)，定量檢測(cè)抗原、抗體，并應(yīng)用發(fā)光劑標(biāo)記抗體，與其它檢測(cè)方法相比，具有很高的穩(wěn)定性，采用機(jī)器自動(dòng)加樣，具有準(zhǔn)確性，化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)的線性范圍較放射免疫法檢測(cè)更寬，更適宜于臨床檢測(cè) 血清AFP。在血清AFP測(cè)定中，應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢查，可以采用高度的特異性抗體【5】，有效起到清除樣本干擾的作用，提高檢測(cè)結(jié)果的靈敏度，減少誤差，使用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清AFP，臨床檢驗(yàn)效果更穩(wěn)定。

由上可知，在臨床中對(duì)血清AFP檢測(cè)中，應(yīng)用放射免疫法與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)進(jìn)行檢驗(yàn)，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)較放射免疫法更具應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，具有更好重復(fù)性，精密度高，有很好的臨床效果，值得在實(shí)際在推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1] 張紅祥. 化學(xué)發(fā)光免疫法與放射免疫法檢測(cè)血清AFP臨床分析[J]. 中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用. 2010（07）

[2] 章茂友. 放射免疫法與化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清AFP效果分析[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生. 2010（36）

[3] 張改英，王耀榮. 化學(xué)發(fā)光免疫法和放射免疫分析法測(cè)定血漿腦鈉肽濃度的比較[J]. 疾病監(jiān)測(cè)與控制. 2010（10）

第3篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

關(guān)鍵詞：化學(xué)發(fā)光免疫分析法 血清C肽 胰島素

Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.01.209

Chemiluminescence immunoassay detection serum C peptide and insulin clinical analysis

Zhang Yangwen

Abstract：Objective：To investigate chemiluminescence immunoassay detection serum C peptide and insulin clinical application value.Methods：December 2010 to December 2012 were our Ⅱ diabetes patients were set to observe group， will be in the same period of our medical without diabetes health is set to 120 cases of control group， the two groups of serum insulin and c-peptide test comparing.Result：Two groups of C-P Insulin and compared with significant difference （P

Keywords：Chemiluminescence immunoassay Serum C peptide Insulin

【中圖分類號(hào)】R9 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2012）01-0231-01

最近幾年，非同位素免疫檢測(cè)在世界各國(guó)得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用，化學(xué)發(fā)光免疫分析就是其中一種[1]。現(xiàn)對(duì)2011年06月至2012年12月我院收治的Ⅱ型糖尿病患者應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清C肽與胰島素取得的良好情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。將2011年06月至2012年12月我院收治的Ⅱ型糖尿病患者120例設(shè)為觀察組，男72例，女48例，平均年齡57.9±4.1歲，病程1～4年，患者均無(wú)糖尿病并發(fā)癥。將同期在我院體檢的非糖尿病健康者120例設(shè)為對(duì)照組，男69例，女51例，平均年齡56.1±3.9歲，均無(wú)糖尿病家族史。受試者在處于安靜狀態(tài)的條件下，保持平臥位，抽取三到四毫升的靜脈血，標(biāo)本全部都按照實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作進(jìn)行對(duì)應(yīng)的分析測(cè)定。

1.2 檢測(cè)方法?；瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)用到的抗體有兩種，都是常量的?？贵w一位于標(biāo)記試劑里面，為吖啶酯標(biāo)記鼠單克隆抗C肽?？贵w二位于固相試劑里面，屬于和順磁顆粒予以共價(jià)結(jié)合形成的鼠單克隆抗C肽。試劑批號(hào)不同，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線也不一樣，用前借助條形碼閱讀器，也可以通過(guò)鍵盤輸定標(biāo)曲線數(shù)值到系統(tǒng)里面，然后通過(guò)C-P以及Insulin定標(biāo)液這兩點(diǎn)定標(biāo)的方法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)應(yīng)的校準(zhǔn)[2]。測(cè)試樣品的時(shí)候，一定要嚴(yán)格準(zhǔn)確的測(cè)量質(zhì)控品。通過(guò)西門子ADVIA CentaurXP化學(xué)發(fā)光免疫分析儀實(shí)施項(xiàng)目檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件。采用X±S表示，采用X2檢驗(yàn)。差異有顯著性為P

2 結(jié)果

兩組的C-P及Insulin相比差異具有顯著性（P

3 討論

準(zhǔn)確嚴(yán)格的測(cè)定胰島素和C肽，可以說(shuō)對(duì)于正確地進(jìn)行糖尿病的診斷，準(zhǔn)確地做出分析治療，以及隨后的相關(guān)回訪，意義都是非常的重大的。尤其是C肽，其無(wú)論是對(duì)于Ⅰ型，還是Ⅱ型的糖尿病來(lái)講，都具有很好的診斷指引意義。借助于胰島素對(duì)糖尿病進(jìn)行治療的過(guò)程中，一個(gè)特殊的問(wèn)題就是如何更加準(zhǔn)確的測(cè)定胰島素的存在[3]。之所以這樣說(shuō)，是因?yàn)橥庵苎h(huán)里面存在的抗體以及外源性的胰島素極大的干擾了胰島素的有關(guān)測(cè)定。不過(guò)用胰島素予以具體治療的病患，抗體對(duì)于C肽分析則沒(méi)有特別明顯的干擾。C肽測(cè)定能夠幫助對(duì)患者內(nèi)源性胰島素的具體儲(chǔ)備情況做出準(zhǔn)確的評(píng)估，相比于胰島素而言，這種方法更加的可靠。無(wú)論是胰島素，還是C肽分泌出以后回來(lái)到靜脈血循環(huán)里面，經(jīng)由肝臟，最終進(jìn)入到體內(nèi)的系統(tǒng)循環(huán)里面。C肽有三十五分鐘的半衰期，胰島素只有五到十分鐘的半衰期[4]。肝臟對(duì)C肽基本上沒(méi)有什么攝取能力，故而代謝清除率非常的緩慢，也就是在外周血里面，C肽和胰島素相比，穩(wěn)定性更強(qiáng)，能夠更加精準(zhǔn)的對(duì)β細(xì)胞的具體分泌情況予以反映，對(duì)于借助胰島素進(jìn)行對(duì)應(yīng)治療的病人，這一指標(biāo)更為有用。

試驗(yàn)證實(shí)，糖尿?、蛐突颊吆徒】到M相比，對(duì)應(yīng)的胰島素以及C肽都明顯的偏低，差異顯著（P

參考文獻(xiàn)

[1] 王學(xué)晶，徐國(guó)賓，李海霞，等.化學(xué)發(fā)光免疫分析法測(cè)定血漿B型鈉尿肽的評(píng)價(jià)及參考區(qū)間調(diào)查[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2009，27（4）：283-285

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第4篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

目的: 研制人血清中促甲狀腺素（tsh）的化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒。方法: 采用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗tshβ亞單位特異性單克隆抗體(mab), 與固相包被的抗tshα亞單位的另一mab配對(duì), 以魯米諾作為底物, 采用兩步法建立了雙位點(diǎn)夾心法人血清tsh的化學(xué)發(fā)光免疫定量分析法。結(jié)果: 該方法靈敏度為0.0788 miu/l, 批內(nèi)cv平均為4.7%, 批間cv平均為8.4%, 平均回收率為93.05%。該檢測(cè)與lh、 fsh和hcg無(wú)交叉反應(yīng)。部分實(shí)驗(yàn)樣品的測(cè)試結(jié)果顯示該試劑與國(guó)外同類試劑（雅培architect i2000）的測(cè)定結(jié)果明顯相關(guān)(r＝0.984)。結(jié)論: 該方法具有較高的靈敏度、 重復(fù)性和準(zhǔn)確度, 與其他同類產(chǎn)品相比簡(jiǎn)便、 快捷、 成本低, 適于臨床檢測(cè)和科研應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 促甲狀腺激素（tsh） 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 試劑盒

促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone, thyrotropin, tsh)是一種由垂體前葉分泌的糖蛋白激素, 由α和β2個(gè)亞基組成, 相對(duì)分子質(zhì)量(mr)為28000[1]。tsh本身受下丘腦分泌的tsh釋放激素trh的調(diào)控, tsh的主要生理作用是調(diào)節(jié)甲狀腺激素的合成與分泌, 血液中甲狀腺激素水平與腺垂體分泌tsh的量之間有負(fù)反饋抑制關(guān)系[2]。WWw.133229.CoM甲狀腺功能改變時(shí), tsh的波動(dòng)較甲狀腺激素更迅速且明顯, 是反映下丘腦垂體甲狀腺軸功能的敏感指標(biāo), 因此采用靈敏度高的tsh免疫分析法具有重要的意義?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescent immunoassay, clia)是一種靈敏的免疫分析方法, 在免疫診斷試劑研制中已得到了廣泛的應(yīng)用[3]。本研究根據(jù)化學(xué)發(fā)光免疫分析法的原理研制了血清tsh的檢測(cè)試劑盒, 與國(guó)內(nèi)外同類產(chǎn)品相比具有簡(jiǎn)便、 快捷、 成本低等優(yōu)點(diǎn)。

1 材料和方法

1.1 材料 tsh單克隆抗體(mab)、 tsh標(biāo)準(zhǔn)品抗原和辣根過(guò)氧化物酶（hrp）為sigma公司產(chǎn)品, 光免板為thermo electron公司產(chǎn)品, 化學(xué)發(fā)光底物為biorad公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品的配制 將tsh抗原標(biāo)定后溶于小牛血清中, 配制成含0.1, 1, 5, 20, 100 miu/l的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.2 抗體包被板的制備 將100μl含tsh mab（0.5mg/l）的ph9.6碳酸鹽緩沖液加至包被板中, 37℃包被2 h, 再用含10 mg/l bsa的0.01 mol/l ph7.4磷酸鹽緩沖液于37℃封閉2 h后晾干備用。

1.2.3 酶標(biāo)記物的制備 tsh的酶標(biāo)記物采用過(guò)碘酸鈉法制備, 然后經(jīng)0.01 mol/l ph7.4磷酸鹽緩沖液透析過(guò)夜后, 加入等量的甘油于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4 檢測(cè)方法 將50 μl待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入包被tsh的光免板中, 37℃溫育30 min, 棄反應(yīng)液, 用洗滌液（含0.5 mg/l tween20的0.01 mol/l ph7.4磷酸鹽緩沖液）洗5次, 加酶標(biāo)記物50 μl, 37℃溫育30 min后同樣用洗滌液洗5次, 然后加入發(fā)光底物于5～10 min內(nèi)測(cè)定各孔的發(fā)光值rlu。樣本中的tsh濃度依據(jù)由標(biāo)準(zhǔn)品tsh濃度和對(duì)應(yīng)的rlu建立的數(shù)學(xué)模型進(jìn)行定量。

2 結(jié)果

2.1 動(dòng)力學(xué)性質(zhì) 在hrp魯米諾h2o2發(fā)光體系中, 將不同量的免疫復(fù)合物加入發(fā)光液中, 發(fā)光強(qiáng)度（rlu）隨反應(yīng)時(shí)間而變化。10 min后rlu接近峰值, 在5～15 min內(nèi)rlu較為穩(wěn)定, 隨后開始緩慢下降。

2.2 反應(yīng)條件優(yōu)化

2.2.1 加樣量對(duì)rlu的影響 樣本和酶標(biāo)記物的加樣量分別為50 μl和100 μl考查標(biāo)準(zhǔn)品（0、 0.1、 1、 5、 20、 100 miu/l）rlu, 發(fā)現(xiàn)加樣量為100 μl與50 μl rlu相差不大, 說(shuō)明50 μl的加樣量反應(yīng)能達(dá)到平衡(圖1)。

圖1 加樣量對(duì)rlu的影響（略）

2.2.2 反應(yīng)模式對(duì)rlu的影響 采用二步法。第一步: 加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品后, 將反應(yīng)體系在37℃分別溫育15、 30、 45、 60 min; 第二步: 加入酶標(biāo)記抗體后, 將反應(yīng)體系在37℃分別溫育15、 30、 45、 60 min。結(jié)果表明溫育時(shí)間為30 min時(shí)反應(yīng)皆能達(dá)到平衡(圖2)。

圖2 溫育時(shí)間對(duì)rlu的影響（略）

a: 第一步溫育時(shí)間對(duì)rlu的影響; b: 第二步溫育時(shí)間對(duì)rlu的影響.

2.3 穩(wěn)定性 將試劑盒放置于37℃ 6 d后, 比較與放置前參考標(biāo)準(zhǔn)品各點(diǎn)rlu值, 參考標(biāo)準(zhǔn)品各點(diǎn)rlu值未見明顯降低, 且本底發(fā)光值無(wú)明顯升高, 表明試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)明顯漂移, 滿足穩(wěn)定性要求。

2.4 方法學(xué)評(píng)價(jià)

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與靈敏度 在設(shè)定的免疫反應(yīng)和發(fā)光條件下, 以標(biāo)準(zhǔn)血清的濃度（0～100 miu/l）制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖3。同時(shí)測(cè)定20個(gè)零標(biāo)準(zhǔn), 用零標(biāo)準(zhǔn)均值加上2倍標(biāo)準(zhǔn)差, 計(jì)算出此方法的靈敏度為0.0788 miu/l。

圖3 tsh標(biāo)準(zhǔn)曲線（略）

2.4.2 精密度 取低(4.44 miu/l)、 中(19.45 miu/l)和高(79.23 miu/l)3種tsh濃度各重復(fù)測(cè)定10次, 測(cè)定批內(nèi)cv分別為6.2%、 3.3%和4.6%, 平均為4.7%。隔日分別進(jìn)行5次獨(dú)立試驗(yàn), 測(cè)批間cv分別為8.3%、 7.6%和9.3%, 平均為8.4%。

2.4.3 準(zhǔn)確性 在已知tsh濃度的血清中加入3種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)血清,測(cè)定加入回收率為93.05%。將tsh濃度為44.42 miu/l的血清用標(biāo)準(zhǔn)零血清分別按1/2、 1/4、 1/8、 1/16稀釋, 測(cè)量各稀釋濃度的tsh含量, 測(cè)定稀釋回收率為99.86%。

2.4.4 特異性 在已知濃度的血清樣品中加入不同濃度的lh、 fsh和hcg后, 對(duì)tsh的測(cè)定無(wú)干擾。

2.4.5 與進(jìn)口試劑的比較 將研制的tsh clia定量檢測(cè)試劑盒與abbott architect i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)共同對(duì)30例正常人、 20例甲亢及80例甲低臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè), 通過(guò)數(shù)據(jù)分析, 得出兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)所得數(shù)值具有明顯相關(guān)性(圖4)。

圖4 與abbott全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)相關(guān)性曲線（略）

3 討論

血清促甲狀腺素定量檢測(cè)的方法主要有放射免疫法、 酶聯(lián)免疫法、 時(shí)間分辨熒光免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法等幾種[4]?？紤]到目前化學(xué)發(fā)光和時(shí)間分辨熒光分析儀器幾乎全部為國(guó)外廠商生產(chǎn), 而絕大多數(shù)廠商采用儀器加試劑盒捆綁銷售的壟斷模式, 并在儀器中人為設(shè)置排它性檢測(cè)程序, 從而抬高了配套試劑盒價(jià)格, 增加了檢測(cè)成本, 所以本工作旨在開發(fā)國(guó)產(chǎn)低價(jià)、 穩(wěn)定、 通用的人血tsh clia試劑盒。首先對(duì)讀數(shù)時(shí)間進(jìn)行了動(dòng)力學(xué)研究, 發(fā)現(xiàn)其在5～15 min內(nèi)rlu處于平臺(tái)期,反應(yīng)時(shí)間選擇10 min。其次對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)摸索, 在不同的溫育時(shí)間和加樣量的條件下, 各rlu值相差不大, 因此選擇了50 μl的加樣量與兩步共1 h的反應(yīng)時(shí)間。

我們研制的tsh化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定試劑盒通過(guò)方法學(xué)鑒定表明無(wú)論是靈敏度、 準(zhǔn)確性、 特異性等技術(shù)指標(biāo)均達(dá)到了臨床診斷的要求[5]; 同時(shí)該方法具有操作方便, 反應(yīng)時(shí)間短和成本低等優(yōu)點(diǎn), 具有較廣闊的市場(chǎng)應(yīng)用前景。

【參考文獻(xiàn)】

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第5篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

【關(guān)鍵詞】 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法；酶聯(lián)免疫吸附法；乙型肝炎病毒標(biāo)志物；效果 

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.01.011 

我國(guó)是乙肝病毒感染疫情嚴(yán)重的國(guó)家， 我國(guó)人口中約有1/10為乙肝病毒攜帶者[1]。乙肝病毒標(biāo)志物是檢測(cè)乙肝病毒感染的直接證據(jù)， 同時(shí)， 可通過(guò)監(jiān)測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物觀察患者病情、評(píng)價(jià)藥物治療效果。目前， 臨床常用的乙肝病毒標(biāo)志物監(jiān)測(cè)的方法為酶聯(lián)免疫吸附法， 隨著化學(xué)發(fā)光酶免疫分析技術(shù)的不斷發(fā)展， 其在檢測(cè)上的應(yīng)用也逐漸為人們所重視， 且在乙肝病毒標(biāo)志物的檢測(cè)中應(yīng)用效果良好。 

1 資料與方法 

1. 1 一般資料 選取本院傳染科2013年1月～2014年1月門診疑似乙型肝炎患者200例作為本次的研究對(duì)象。其中， 男108例， 女92例， 年齡19～68歲， 平均年齡（38.1±12.8）歲， 患者經(jīng)基礎(chǔ)檢查， 無(wú)其他傳染性疾病及肝臟器質(zhì)性病變。 

1. 2 方法 所有患者均空腹采用靜脈采血方式， 抽取適量血液。室溫下離心分離15 min， 分離血清以備檢測(cè)。 

1. 2. 1 儀器及試劑選擇 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法選擇實(shí)驗(yàn)儀器為鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的LUMO半自動(dòng)分析儀， 乙肝病毒標(biāo)志物定量檢測(cè)試劑為鄭州安圖生物工程有限公司試劑盒；酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物試劑為上?？迫A生物工程股份有限公司試劑盒， 選擇實(shí)驗(yàn)儀器為芬蘭生產(chǎn)的W-k3酶標(biāo)儀。 

1. 2. 2 檢測(cè)方法 對(duì)采集的200份血清標(biāo)本分別采用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)， 每次以定值參比血清作為質(zhì)控， 檢測(cè)方法嚴(yán)格按照儀器及試劑說(shuō)明書進(jìn)行。酶聯(lián)免疫吸附法采用手工添加樣品， 檢測(cè)結(jié)果根據(jù)酶標(biāo)儀結(jié)果顯示判定為陽(yáng)性或陰性；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法采用全自動(dòng)加樣器添加樣品， 用LUMO半自動(dòng)分析儀定量檢測(cè)結(jié)果。 

另取1.0 ng/ml HBsAg定值參比血清， 兩倍稀釋后分別采用以上兩種檢測(cè)方法檢驗(yàn)， 測(cè)定兩種檢驗(yàn)方法的最低濃度。 

1. 3 判定標(biāo)準(zhǔn)[2] 檢測(cè)結(jié)果大于參考值的上限為陽(yáng)性， 5項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的上限標(biāo)準(zhǔn)分別為HBsAg：0.2 ng/ml， HBeAg：0.05 NCU/ml， HBeAb：2.0 NCU/ml， HBcAb：1.5 NCU/ml， HBsAb：10.0 mIU/ml。對(duì)單獨(dú)一項(xiàng)為陽(yáng)性或弱陽(yáng)性或雙陽(yáng)性標(biāo)本設(shè)置雙空復(fù)查， 結(jié)果仍為陽(yáng)性的則判定為陽(yáng)性。分別統(tǒng)計(jì)各檢測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性、陰性的例數(shù)。 

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用spss18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 

2 結(jié)果 

2. 1 兩種方法檢測(cè)5種乙肝標(biāo)志物陽(yáng)性結(jié)果比較 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法對(duì)HBsAg及HBeAb的檢出率明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法（P<0.05）；兩種方法對(duì)HBeAg、 HBcAb、HBsAb的檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。 

2. 2 靈敏度檢測(cè) 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)的最低濃度為0.12 ng/ml， 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)的最低濃度為0.4 ng/ml。化學(xué)免疫酶免疫分析法的檢測(cè)靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附法。

3 討論 

乙肝病毒血清標(biāo)志物[2]是乙型病毒性肝炎的主要病原標(biāo)志， 基于我國(guó)嚴(yán)峻的乙型肝炎疫情與不斷增加的乙型肝炎患者， 采用有效的病原標(biāo)志物檢測(cè)方法對(duì)乙肝的早期防治與乙肝藥物治療效果的評(píng)定具有重要意義。 

酶聯(lián)免疫吸附法[3]是檢測(cè)乙肝標(biāo)志物的目前應(yīng)用最廣泛的方法， 采用人工加樣， 具有操作簡(jiǎn)單、快捷的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)。但通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)[4]， 乙肝病毒測(cè)定結(jié)果為弱陽(yáng)性患者在復(fù)查中也容易出現(xiàn)時(shí)陰時(shí)陽(yáng)的情況， 采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行復(fù)查， 結(jié)果的重復(fù)性較差， 說(shuō)明酶聯(lián)免疫吸附法靈敏性不高， 對(duì)臨界結(jié)果的檢測(cè)效率低。同時(shí)， 酶聯(lián)免疫吸附法容易受試劑盒質(zhì)量、儀器校準(zhǔn)、工藝差別等眾多原因的影響， 其檢測(cè)結(jié)果可能存在較大差別， 穩(wěn)定性較差。隨著化學(xué)發(fā)光酶免疫分析技術(shù)的不斷發(fā)展， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒標(biāo)志物的檢測(cè)中逐步展現(xiàn)了其較高的應(yīng)用價(jià)值?；瘜W(xué)發(fā)光酶免疫分析法是借助發(fā)光底物自身的發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)定的分析技術(shù)， 相比于酶聯(lián)免疫吸附法靈敏度較高。本次調(diào)查結(jié)果對(duì)200份血清樣本分別進(jìn)行化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物， 結(jié)果顯示， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析對(duì)HBsAg的檢出率為60.0%， 對(duì)HBeAb的檢出率為24.0%， 明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法的54.5%、17.5%（P<0.05）；另經(jīng)靈敏度檢測(cè)， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)的最低濃度為0.12 ng/ml， 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)的最低濃度為0.4 ng/ml， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法的檢測(cè)靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附法。 

綜上所述， 酶聯(lián)免疫吸附法具有操作簡(jiǎn)單、方便快捷的優(yōu)勢(shì)， 但化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法可有效檢測(cè)出病毒標(biāo)志物中的假陰性情況， 檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性高、重復(fù)率高， 對(duì)準(zhǔn)確顯示乙肝病毒的感染進(jìn)程、評(píng)價(jià)抗病毒治療效果具有重要意義。為保證測(cè)定效果， 臨床采用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確， 可有效減少漏檢、誤檢的發(fā)生率。 

參考文獻(xiàn)   本文由wWw.DyLw.NeT提供，第一論 文 網(wǎng)專業(yè)教育教學(xué)論文和以及服務(wù)，歡迎光臨dYlw.nET

[1] 廖奕.化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物的比較. 大家健康（學(xué)術(shù)版）， 2014（10）：48-49. 

[2] 郭輝. 化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙肝病毒標(biāo)志物的相關(guān)性分析. 中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)， 2013， 2（5）：270-272. 

第6篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

關(guān)鍵詞：2型糖尿?。谎?；C肽；胰島素；化學(xué)發(fā)光免疫分析

2013年全球大約有3.82億人患有糖尿病，而2型糖尿病占據(jù)了其中90%[1，2]。我國(guó)近年來(lái)2型糖尿病發(fā)病率也在不斷攀升[3]，因此對(duì)糖尿病患者進(jìn)行早期診斷及分型顯得尤為關(guān)鍵。而化學(xué)發(fā)光免疫分析是目前免疫檢驗(yàn)中技術(shù)領(lǐng)先的檢測(cè)方法，具有準(zhǔn)確性高，污染小，操作方便，檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn)，已得到廣泛普及使用[4]。我院采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定儀對(duì)110例初診為2型糖尿病患者，63例健康體檢者進(jìn)行了血清C肽和胰島素測(cè)定，以期探討更有效更簡(jiǎn)便的糖尿病早期診斷檢測(cè)方法。

1 資料與方法

1.1一般資料 糖尿病組：收錄2013年10月～2014年3月本院首次確癥的2型糖尿病患者110例，其中男68例，女42例；平均年齡（46.73±8.46）歲。對(duì)照組：63例健康體檢者，男37例，女26例；平均年齡（47.16±7.20）歲，63例健康體檢者肝腎功能、血尿常規(guī)、血糖血脂水平均正常，且無(wú)糖尿病病史。兩組患者在性別、年齡方面無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。

1.2儀器與試劑

1.2.1儀器 深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司生產(chǎn)的邁格魯米（MAGLUMI）2000型化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀。

1.2.2試劑 深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司生產(chǎn)的化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀配套試劑，包括C肽測(cè)定試劑盒，胰島素測(cè)定試劑盒。

1.3方法 173例受試者均于檢測(cè)前1晚晚餐后開始禁食，在檢測(cè)當(dāng)天早晨空腹抽取肘部靜脈血5mL。血液采集后均于室溫下靜置后離心，分離血清部分，并于2h內(nèi)放于Maglumi2000化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀檢測(cè)血清中C肽和胰島素水平。測(cè)定時(shí)嚴(yán)格按照操作說(shuō)明執(zhí)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所得數(shù)據(jù)利用SPSS 19統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，獲得數(shù)據(jù)以（x±s）表示。采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間差異處理。

2 結(jié)果

2.1檢測(cè)性能檢驗(yàn) 采用深圳新產(chǎn)業(yè)化學(xué)免疫分析儀及配套試劑測(cè)定C肽、胰島素濃度水平，其中兩項(xiàng)批內(nèi)變異系數(shù)（CV）均≤5%，批間變異系數(shù)（CV）均≤10%。C肽分析靈敏度為0.01ng/mL，胰島素分析靈敏度為0.3μIU/mL（見表1）。C肽測(cè)定約25min出第一個(gè)結(jié)果，之后每分鐘完成3個(gè)測(cè)試果；胰島素則約37min出首個(gè)結(jié)果，之后每分鐘完成3個(gè)檢測(cè)。

2.2檢測(cè)結(jié)果比較 經(jīng)過(guò)SPSS 19數(shù)據(jù)軟件處理，2型糖尿病組患者基礎(chǔ)C肽平均濃度水平為（3.37±0.89）ng/mL，基礎(chǔ)胰島素平均水平為（22.32±7.18）μIU/mL，而健康體檢組人群基礎(chǔ)C肽平均濃度水平為2.11±0.97ng/mL，基礎(chǔ)胰島素平均水平為（13.50±3.77）μIU/mL。糖尿病組餐前C肽、胰島素水平與健康體檢組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3 討論

胰島素是由胰島B細(xì)胞合成份泌，分子量5734，半衰期只有5min。胰島素的分泌受各種刺激所影響，如脂肪、蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物、胃泌素、胰泌素、抑胃肽等，葡萄糖是最強(qiáng)的刺激物質(zhì)。而兒茶酚胺、α-腎上腺素、生長(zhǎng)抑素、苯妥英鈉對(duì)胰島素的分泌起抑制作用[5]。C肽是一種分子量為3018的多肽，半衰期大約為30min。在胰島B細(xì)胞中，胰島素原被酶促裂解為胰島素（A鏈加B鏈）和C肽分子，二者同時(shí)以等摩爾濃度被分泌入血液中。但由于胰島素半衰期短，直接受肝臟的代謝作用，且血液循環(huán)中的胰島素抗體以及外源性的胰島素療法及其他藥物也會(huì)干擾人體內(nèi)胰島素水平，故血清胰島素水平通常并不能代表胰島細(xì)胞的分泌功能。而胰島細(xì)胞分泌的C肽半衰期較長(zhǎng)，含量水平不受體內(nèi)、體外胰島素等影響，也不被肝臟滅活或代謝，其血清水平能較準(zhǔn)確地代表胰島細(xì)胞功能。因而，在測(cè)定胰島素的同時(shí)對(duì)C肽進(jìn)行測(cè)定，將獲得更加有效的結(jié)果，更能為準(zhǔn)確地了解胰島細(xì)胞的合成與分泌能力，為臨床2型糖尿病早期診斷提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光免疫分析方法測(cè)定C肽、胰島素靈敏度高，批內(nèi)變異系數(shù)、批間變異系數(shù)小，且檢測(cè)速度快，有利于早期糖尿病的輔助診斷。對(duì)比分析兩組測(cè)定結(jié)果提示，糖尿病患者空腹測(cè)定前，其體內(nèi)C肽、胰島素均有一定儲(chǔ)備，說(shuō)明2型糖尿病組受檢者體內(nèi)存在一定程度胰島素抵抗，機(jī)體自身無(wú)法有效識(shí)別胰島素，而最終造成血液循環(huán)中C肽，胰島素基礎(chǔ)含量水平抬高，符合二型糖尿病的基礎(chǔ)定義。

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第7篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

【關(guān)鍵詞】 化學(xué)發(fā)光； 放射免疫； 胰島素

中圖分類號(hào) R446 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2013）28-0068-01

胰島素可以分解血糖，對(duì)于治療糖尿病等癥狀有很好的功效，所以測(cè)試血清中胰島素的含量有非常重要的醫(yī)學(xué)意義。目前盛行的兩種檢測(cè)血清中胰島素的方法為化學(xué)發(fā)光法和放射免疫法，它們的費(fèi)用、精準(zhǔn)度都不相同。本研究主要針對(duì)這兩種方法作出對(duì)比和分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取筆者所在醫(yī)院于2012年8月-2013年2月收治的糖尿病患者90例，均接受放射免疫法檢測(cè)、化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)胰島素。其中男49例，年齡19～68歲，平均（43±5）歲；女41例，年齡21～70歲，平均（41±4）歲。

1.2 檢測(cè)方法

先用真空干燥管采患者的靜脈血，且于室溫下離心約10～20 min以后置于冷藏室保存[1]。

1.2.1 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法 本研究中使用的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀器為羅氏公司生產(chǎn)的E170化學(xué)發(fā)光儀，它有極高自動(dòng)化程度和高速準(zhǔn)確的測(cè)試性能。將所采樣本加入到反應(yīng)器中混合，再記下顯示讀數(shù)[2]。

1.2.2 放射免疫檢測(cè)法 本研究中使用的放射免疫檢測(cè)儀器為先進(jìn)技術(shù)工業(yè)公司生產(chǎn)的CM570801分析儀，它性能好、檢測(cè)靈敏度高。因本過(guò)程涉及到放射性物質(zhì)，故須在特定環(huán)境中由專業(yè)工作人員進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究所得結(jié)果由SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，以P

2 結(jié)果

化學(xué)發(fā)光法和放射免疫法的批內(nèi)變異系數(shù)、批間變異時(shí)間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.78，P>0.05）?；瘜W(xué)發(fā)光法和放射免疫法檢測(cè)結(jié)果雖有差異，但是它們之間的相關(guān)度卻很高，相關(guān)系數(shù)r值為0.994。詳見表1。

3 討論

近年來(lái)人們的生活水平和生活方式都發(fā)生了很大的變化，糖尿病患者逐漸增多。胰島素作為胰島分泌的可以降低血糖、促進(jìn)糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成的激素，其地位非常重要，若血糖中胰島素含量太低則會(huì)引發(fā)糖尿病。所以檢測(cè)血清中胰島素的含量有非常重要的醫(yī)學(xué)意義[3]。目前臨床上最常用的檢測(cè)血清中胰島素含量的方法是化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法和放射免疫檢測(cè)法，兩者效果皆很好而且特點(diǎn)各異。應(yīng)用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法和放射免疫檢測(cè)法檢測(cè)同一份標(biāo)本，兩個(gè)結(jié)果之間有顯著性差異，但兩種方法檢測(cè)結(jié)果之間高度相關(guān)。

化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法優(yōu)點(diǎn)為：設(shè)備簡(jiǎn)單，環(huán)保無(wú)污染等，以化學(xué)發(fā)光作為標(biāo)記物進(jìn)行定量檢測(cè)，其試劑具有穩(wěn)定和無(wú)毒的優(yōu)點(diǎn)。但它也有自身的缺點(diǎn)，如試劑價(jià)格較昂貴、需要特殊的設(shè)備來(lái)進(jìn)行檢測(cè)[4]。放射免疫檢測(cè)法優(yōu)點(diǎn)主要表現(xiàn)在適用范圍、使用復(fù)雜程度等，以及特異性很好。它的缺點(diǎn)：只能測(cè)定特定物質(zhì)、放射性物質(zhì)因有半衰期保存的時(shí)間較短、放射性物質(zhì)會(huì)造成環(huán)境污染和機(jī)體損傷等[5]。本研究結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法和放射免疫法的批內(nèi)變異系數(shù)、批間變異時(shí)間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.78，P>0.05）?；瘜W(xué)發(fā)光法和放射免疫法檢測(cè)結(jié)果雖有差異，但是它們之間的相關(guān)度卻很高，相關(guān)系數(shù)r值為0.994，因此所測(cè)得的結(jié)果均是可信的。

綜上所述，放射免疫和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法均有可取之處和局限性，兩者在檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)效果以及費(fèi)用等方面皆不盡相同，臨床上可根據(jù)具體情況來(lái)選擇檢測(cè)方法。另外，若能將兩者結(jié)合，充分發(fā)揮其優(yōu)點(diǎn)，也許可以有更好的效果。

參考文獻(xiàn)

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第8篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

【摘要】化學(xué)發(fā)光分析是根據(jù)化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光輻射強(qiáng)度確定物質(zhì)含量的一種痕量分析方法，這種技術(shù)日益得到重視，它靈敏度高，線性范圍寬，不需要外來(lái)光源，儀器設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便，分析快速快，易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，價(jià)格便宜，選擇性強(qiáng)。常用的化學(xué)發(fā)光技術(shù)有電化學(xué)發(fā)光、化學(xué)發(fā)光免疫分析、微粒子化學(xué)發(fā)光等。本文主要探析此技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】化學(xué)發(fā)光 分類 臨床應(yīng)用

化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence，CL)早在19世紀(jì)80年代就得到證實(shí)，即在化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中瞬間以釋放光子的形式放出能量?；瘜W(xué)發(fā)光法因其靈敏度高、線性范圍寬和分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，已在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中得到廣泛地應(yīng)用。

一 化學(xué)發(fā)光的基本內(nèi)涵

化學(xué)發(fā)光分析法是近30年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種高靈敏的微量及痕量分析法，化學(xué)發(fā)光分析具有靈敏度高、線性范圍寬、不需要外來(lái)光源、分析速度快、儀器設(shè)備相對(duì)簡(jiǎn)單、便宜等優(yōu)點(diǎn)。化學(xué)發(fā)光分析測(cè)定物質(zhì)的方式可分為直接法和間接法?；瘜W(xué)發(fā)光分析反應(yīng)類型可分為酶促反應(yīng)和非酶促反應(yīng)兩類。此外化學(xué)發(fā)光分析法可以與其他分析技術(shù)聯(lián)用，如流動(dòng)注射分析、電化學(xué)分析、免疫分析、固定化試劑技術(shù)、傳感器技術(shù)等分析技術(shù)相結(jié)合。

二 常用的化學(xué)發(fā)光技術(shù)

首先，電化學(xué)發(fā)光。該技術(shù)是通過(guò)對(duì)電極施加一定的電壓進(jìn)行電化學(xué)反應(yīng)而發(fā)光，通過(guò)測(cè)量化學(xué)發(fā)光光譜和強(qiáng)度來(lái)測(cè)定物質(zhì)含量的一種痕量分析方法。它將電分析化學(xué)手段和化學(xué)發(fā)光方法相結(jié)合，具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，如重現(xiàn)性和靈敏度進(jìn)一步提高，在多種組份同時(shí)存在時(shí)，可施加不同波形、不同電壓的信號(hào)進(jìn)行選擇性測(cè)量等，是潛在的分析手段之一。

第二， 化學(xué)發(fā)光免疫分析是以標(biāo)記發(fā)光劑為示蹤物信號(hào)建立起來(lái)的一種非放射標(biāo)記免疫分析法，具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、分析速度快和容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。魯米諾、異魯米諾及其衍生物、吖啶酯衍生物、辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶是目前化學(xué)發(fā)光免疫分析中使用最多的標(biāo)記物。

第三，微粒子化學(xué)發(fā)光是化學(xué)發(fā)光免疫分析的特殊形式，是以化學(xué)發(fā)光劑為底物的酶免疫技術(shù)，同時(shí)應(yīng)用了磁性微珠做固相載體，增加了吸附面積，使抗原抗體最大限度的結(jié)合。微粒子化學(xué)發(fā)光技術(shù)所需標(biāo)本量極少，孵育時(shí)間大大縮減，同時(shí)因其選擇性吸附抗原，從而提高了特異性、靈敏性，使測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，并減少污染。

第四，化學(xué)發(fā)光生物傳感器是通過(guò)非創(chuàng)傷或非損傷性的辦法，連續(xù)、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)地檢測(cè)生物體內(nèi)的某一種或幾種物質(zhì)濃度的技術(shù)。特別是化學(xué)發(fā)光免疫傳感器是將具有分子識(shí)別作用的抗原或抗體以適當(dāng)?shù)姆绞焦潭ɑ瞥桑Y(jié)合了化學(xué)發(fā)光高靈敏度和抗原抗體特異性結(jié)合的高度專一性以及無(wú)污染等特點(diǎn)，是替代放射免疫分析的重要分析工具，已日益受到重視。

三 化學(xué)發(fā)光分析在臨床實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用

第一，化學(xué)發(fā)光法與血液系統(tǒng)疾病，化學(xué)發(fā)光免疫分析在測(cè)定G一CSF上是敏感的，可用于測(cè)定正常人或疑有G一CSF減少疾病的患者血清G一CSF，對(duì)于預(yù)測(cè)免疫抑制劑治療再障的效果有一定的作用。例如，慢性骨髓增生性疾病，如慢性髓性白血病和真性紅細(xì)胞增多癥(Pv)是與中性白細(xì)胞功能失常有關(guān)的。Pv的PMN在用趨化膚(fMLP)刺激后化學(xué)發(fā)光值及丁量減少.這與磷醋酶D活性受損有關(guān)。而沒(méi)有或用PMA刺激的化學(xué)發(fā)光值及了量是正常的。慢性髓性白血病患者也可觀察到這個(gè)現(xiàn)象，但程度更小。

第二，化學(xué)發(fā)光法與消化系統(tǒng)疾病。幽門螺桿菌(HP)在慢性胃炎和消化性潰瘍的發(fā)病中起著重要作用。病理組織學(xué)研究顯示已感染HP的胃粘膜具有吸引中性白細(xì)胞積聚的特點(diǎn)。在魯米諾增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)土表現(xiàn)為增強(qiáng)；潰瘍性結(jié)腸炎患者結(jié)腸粘膜面雖然有中性白細(xì)胞浸潤(rùn).但有人發(fā)現(xiàn)潰瘍性結(jié)腸炎患者和正常人相比，在發(fā)光的峰值、峰時(shí)、斜率方面無(wú)明顯差異。僅27%具有活動(dòng)性潰瘍性結(jié)腸炎患者刺激物有增高的化學(xué)發(fā)光?？赡艿脑蚴窃谶@些患者中性白細(xì)泡不起主要作用或者不呈高活動(dòng)性。慢性肝病(特別是肝癌時(shí))0:的產(chǎn)生和HZOZ一MPO一CL一系統(tǒng)是抑制的。依賴Cypridina蟲熒光素類的化學(xué)發(fā)光及依賴魯米諾的化學(xué)發(fā)光均是降低的。但是慢性肝炎由于體內(nèi)免疫復(fù)合物含量的增高而誘導(dǎo)發(fā)光增強(qiáng)，與正常組相比基礎(chǔ)化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)。急性肝炎由于體內(nèi)免疫復(fù)合物增加不明顯，吞噬細(xì)胞應(yīng)答能力及血清調(diào)理活性均未明顯受損。因此，急性肝炎的基礎(chǔ)發(fā)光、峰時(shí)、斜率與正常人相比變化不明顯，但單位PMN峰值低于正常，說(shuō)明急性肝炎中性粒細(xì)胞的吞噬功能也降低；

第三，化學(xué)發(fā)光法可以準(zhǔn)確檢測(cè)心血管疾病。例如，急性心肌梗時(shí)，中性粒細(xì)胞的化學(xué)發(fā)光值逐漸升高且與CK山條高度相關(guān)。因此，可通過(guò)患者PMN一CL的變化估計(jì)病情。冠心病心絞痛時(shí)化學(xué)發(fā)光值是升高的。

第四，化學(xué)發(fā)光法與內(nèi)分泌疾病。首先，甲狀腺疾病。甲狀腺激素是臨床許多疾病(尤其是甲狀腺疾病)診斷常用的指標(biāo)。甲狀腺激素(TH)具有抗氧化作用，這種作用可能是由于中性白細(xì)胞特異的受體一配體相互作用引起的。TH的抗氧化作用可通過(guò)魯米諾增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光法測(cè)定，化學(xué)發(fā)光值表現(xiàn)為抑制。第二，糖尿病?；颊哂捎诳扇苄曰蝾w粒性因素激活多形核白細(xì)胞(PMN)膜上的NADPH氧化酶產(chǎn)生超氧陰離子自由基，然后轉(zhuǎn)變?yōu)檫^(guò)氧化氫和輕自由基。糖尿病患者分離的PMN的基礎(chǔ)化學(xué)發(fā)光值與正常人相比明顯升高。但當(dāng)NADPH氧化酶被抑制或磷酸己糖旁路被阻斷，則糖尿病組及正常組的化學(xué)發(fā)光值均受到不同程度的抑制。NO可用多種方法測(cè)定，但化學(xué)發(fā)光法是其中最為理想的一種。NO本身不產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，當(dāng)它與超氧陰離子反應(yīng)時(shí)可產(chǎn)生很強(qiáng)的光，外源的精氨酸加入反應(yīng)系統(tǒng)中，化學(xué)發(fā)光值會(huì)更顯著地提高。糖尿病患者的化學(xué)發(fā)光值還可體現(xiàn)循環(huán)免疫復(fù)合物的水平。具有高循環(huán)免疫復(fù)合物的患者，化學(xué)發(fā)光值也高。

參考文獻(xiàn)

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第9篇：化學(xué)發(fā)光免疫范文

關(guān)鍵詞：降鈣素原；化學(xué)發(fā)光；定量；檢測(cè)

中圖分類號(hào)： R446.61 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

降鈣素原（procalcitonin，PCT）在健康人血清中含量極低。在全身性細(xì)菌、真菌和寄生蟲感染時(shí)，PCT水平異常增高，且增高的程度與感染的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)。但在病毒和支原體等感染時(shí)不升高或僅輕度升高[1，2]。因此，PCT在全身性細(xì)菌感染和膿毒癥鑒別診斷、預(yù)后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價(jià)值。目前PCT的檢測(cè)試劑大都為進(jìn)口產(chǎn)品。我們將洪誠(chéng)公司開發(fā)的國(guó)產(chǎn)PCT化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑與梅里埃公司PCT熒光發(fā)光檢測(cè)試劑進(jìn)行臨床比對(duì)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)檢測(cè)臨床血清樣本121份?，F(xiàn)將臨床比對(duì)結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1樣本來(lái)源 福建省立醫(yī)院2013年8月5日～8月7日臨床血清樣本121份（男75例，女46例，年齡0～95歲，平均年齡61歲）。

1.2主要試劑與儀器 PCT化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑、HC-CLA-III化學(xué)發(fā)光分析儀（洪誠(chéng)公司產(chǎn)品）；洗板機(jī)（北京天石公司）。對(duì)照試劑與儀器：PCT定量檢測(cè)試劑、Minividas熒光分析儀（梅里埃診斷公司產(chǎn)品）。第三方驗(yàn)證試劑為羅氏PCT電化學(xué)發(fā)光定量試劑盒、羅氏E601電化學(xué)發(fā)光儀。

1.3方法

1.3.1洪誠(chéng)PCT化學(xué)發(fā)光定量測(cè)定方法 采用化學(xué)發(fā)光定量檢測(cè)方法檢測(cè)臨床血清樣本121份。嚴(yán)格按照說(shuō)明書方法進(jìn)行操作（試劑批號(hào)：130510）。

1.3.2梅里埃PCT熒光定量測(cè)定方法 采用一步免疫熒光測(cè)定法定量檢測(cè)臨床血清樣本121份。嚴(yán)格按照說(shuō)明書方法進(jìn)行操作（試劑批號(hào)： 1002139250）。

1.3.3羅氏PCT電化學(xué)發(fā)光定量測(cè)定方法 以上兩種方法經(jīng)復(fù)檢結(jié)果仍然不一致的臨床樣本，用第三方羅氏PCT電化學(xué)發(fā)光定量試劑盒檢測(cè)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書方法進(jìn)行操作（試劑批號(hào)：171526-01）。

1.3.4統(tǒng)計(jì)分析 按重癥感染的分級(jí)閾值（PCT≥0.5ng/mL），將臨床樣本檢測(cè)結(jié)果分為重癥感染組和非重癥感染組分別統(tǒng)計(jì)，求出總符合率。對(duì)兩種試劑盒的測(cè)定值進(jìn)行相關(guān)性分析，求出相關(guān)系數(shù)r值?？己嗽噭┡c對(duì)照試劑檢測(cè)結(jié)果之間的一致性比較采用Kappa值進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1PCT檢測(cè)結(jié)果 兩種方法同時(shí)檢測(cè)臨床血清樣本121份，見表1。其中，2例經(jīng)復(fù)檢后結(jié)果仍然不符合的病例用第三方羅氏PCT試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，見表2。

2.2符合率及一致性強(qiáng)度 與進(jìn)口試劑（梅里埃PCT熒光定量試劑盒）比對(duì)，國(guó)產(chǎn)PCT化學(xué)發(fā)光定量檢測(cè)試劑的靈敏度（重癥感染符合率）=39/40×100%=97.5%，特異度（非重癥感染符合率）=80 /81×100%=98.8%，準(zhǔn)確度（總符合率）=119/121×100%=98.3%（見表3）。Kappa值=0.963，一致性強(qiáng)度為最強(qiáng)。

3 討論

降鈣素原是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)全身嚴(yán)重感染性疾病的標(biāo)志物，與其他傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)相比，PCT在診斷細(xì)菌性感染疾病中有更好的特異性，是一個(gè)非常有應(yīng)用價(jià)值的診斷感染狀態(tài)的指標(biāo)。近幾年來(lái)在國(guó)內(nèi)發(fā)展迅猛。目前國(guó)內(nèi)用于PCT檢測(cè)的試劑大都為進(jìn)口試劑，由于進(jìn)口試劑和儀器的價(jià)格比較昂貴，不利于在國(guó)內(nèi)的普及和推廣。

我們將洪誠(chéng)公司開發(fā)的PCT化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑與梅里埃公司PCT熒光發(fā)光檢測(cè)試劑進(jìn)行臨床比對(duì)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)檢測(cè)臨床血清樣本121份。結(jié)果表明，洪誠(chéng)產(chǎn)品的劑量-反應(yīng)線性相關(guān)系數(shù)為0.998；與進(jìn)口試劑盒具有良好相關(guān)性（r=0.988）；以0.5為重癥感染的陽(yáng)性閾值，檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性符合率為97.5%，陰性符合率98.8%；一致性強(qiáng)度為最強(qiáng)（Kappa值=0.963）。以上結(jié)果表明，PCT化學(xué)發(fā)光免疫定量檢測(cè)試劑在靈敏度、特異性等技術(shù)指標(biāo)均達(dá)到了臨床實(shí)驗(yàn)室診斷的要求；同時(shí)由于制備該試劑盒所用的大部分原料均為國(guó)產(chǎn)試劑，因此其生產(chǎn)成本低，試劑盒的市場(chǎng)售價(jià)將大大低于進(jìn)口試劑，非常適合臨床檢驗(yàn)推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：