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【關(guān)鍵詞】 全血細(xì)胞分析儀； 比對試驗； 分析研究
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.05.047
全血細(xì)胞分析是臨床常用的參考指標(biāo)，其檢測值直接指導(dǎo)著臨床工作，對疾病的診斷與治療有著重要的意義[1]。隨著臨床工作量不斷增加，絕大多數(shù)縣級以上醫(yī)院都已擁有2臺以上不同型號的血細(xì)胞分析儀。此次，為了驗證同一制造商不同型號血細(xì)胞分析儀各項參數(shù)檢測結(jié)果之間的準(zhǔn)確性、差異性和一致性，規(guī)范多臺血細(xì)胞分析儀之間比對試驗的操作，按照衛(wèi)生部和新疆維吾爾自治區(qū)臨檢中心參比實驗室的規(guī)范要求，對筆者所在醫(yī)院實驗室內(nèi)3臺全血細(xì)胞分析儀進行了比對分析研究。
1 材料與方法
1.1 材料 標(biāo)本采用來筆者所在醫(yī)院就診的隨機門診患者新鮮抗凝全血。儀器類型為XT-1800I、XT-1800I、BC-3000（3臺儀器均為日本 SYSMEX公司生產(chǎn)）。全套試劑均為SYSMEX公司提供的原裝配套試劑。
1.2 方法
1.2.1 技術(shù)要求 由經(jīng)技術(shù)培訓(xùn)合格的專業(yè)人員按相關(guān)操作流程進行操作。
1.2.2 對比試驗方法 以1臺經(jīng)校準(zhǔn)并驗證合格的XT-1800I作為本室的基準(zhǔn)儀器，XT-1800I、BC-3000作為比對儀器。每天隨機選擇10份經(jīng)EDTA-K2抗凝的新鮮全血標(biāo)本 (包括高、中、低值)，分別在3臺儀器上嚴(yán)格按操作說明書進行測定，每份標(biāo)本連續(xù)測定2次，記錄WBC、RBC、HGB、HCT、PLT的結(jié)果，再將連續(xù)測量15 d的各項數(shù)據(jù)進行計算，求出均值和CV值，制成對比表格[2]。
1.2.3 參比實驗室標(biāo)準(zhǔn) 即WBC≤±3.9%、RBC≤±2.4%、HGB≤±2.1%、HCT≤±2.1%、PLT≤±6.8%。
2 結(jié)果
通過統(tǒng)計試驗數(shù)據(jù)，求取數(shù)據(jù)平均值，3臺血液分析儀之間所有檢測樣本各項參數(shù)的變異系數(shù)（CV）最大值相差分別是：WBC≤±3.92%、RBC≤±0.57%、HGB≤±1.76%、HCT≤±0.77%、PLT≤±1.59%。
在多次比對試驗中，僅發(fā)現(xiàn)XT-1800I 的WBC出現(xiàn)了一次 CV值超出標(biāo)準(zhǔn)CV≤±3.9%（即比對儀器的WBC≤±3.92%），其他各項目檢測指標(biāo)的變異系數(shù)（CV值）以及在不同血細(xì)胞分析儀上的偏差（變異系數(shù) CV%），均符合參比實驗室的標(biāo)準(zhǔn)和要求。
3 討論
從比對結(jié)果來分析，此次筆者所在醫(yī)院實驗室內(nèi)XT-1800I、XT-1800I、BC-3000（日本 SYSMEX公司生產(chǎn)）3臺儀器精密度均很高，其測量結(jié)果重復(fù)性好，變異系數(shù)均較小，偏倚度小，實驗儀器與參比儀器檢測結(jié)果有很好的相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義[3]。其中1臺XT-1800I的WBC出現(xiàn)1次CV值超出標(biāo)準(zhǔn)，可能是由于機器使用頻率高(24 h開機)、標(biāo)本量大，致使儀器耗損，導(dǎo)致WBC檢測結(jié)果不穩(wěn)定。而同類的各臺儀器之間的可比性則較強，結(jié)果的一致性較好[4]。
隨著醫(yī)療事業(yè)和診療技術(shù)的不斷發(fā)展及改進，各種先進的檢驗儀器和新的項目正逐漸應(yīng)用于臨床。臨床和患者也在不斷的對檢驗科提出更高的要求，需要檢驗工作者為臨床提供更為豐富的診斷指標(biāo)、更加便捷和快速的檢測方法、更加低廉的檢測費用，但最重要的是提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性和快捷，目前檢驗科亟待解決的問題就是要進一步完善實驗室質(zhì)量管理，規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序，重視加強并規(guī)范檢驗人員的技術(shù)培訓(xùn)。通過定期對不同型號但同類的檢驗儀器進行新鮮全血的校準(zhǔn)和比對試驗，根據(jù)判定規(guī)則，當(dāng)比對儀器檢測結(jié)果超出允許范圍時，用標(biāo)準(zhǔn)儀器定值新鮮全血，再用定值新鮮全血校準(zhǔn)比對儀器，這樣使比對儀器和標(biāo)準(zhǔn)儀器具有同一溯源性[5]。保證儀器的性能質(zhì)量和各項參數(shù)的準(zhǔn)確更加準(zhǔn)確穩(wěn)定，才是保證血液分析儀檢驗質(zhì)量可靠性的重要措施。
參 考 文 獻
［1］ 熊立凡.臨床檢驗基礎(chǔ)［M］.第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006:80-81.
［2］ 周微雅，周達(dá)利，黃作群.不同血細(xì)胞分析儀比對試驗在質(zhì)量控制中的應(yīng)用［J］.廣西醫(yī)學(xué)，2007,29（11）:1740-1742.
［3］ 徐朝，李軍，蔣芬，等.多臺全自動血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果比對方法的建立［J］.中國健康月刊，2011（5）:65-66.
［4］ 劉玲玲，冀旭峰，高洪臣.實驗室內(nèi)多臺血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)和比對分析［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2011（1）:13-14.
【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀；校準(zhǔn)；誤差
全自動血細(xì)胞分析儀快速、方便、精確度高，是人工無法替代的阻抗法三分群。血液分析原理是溶血素破壞RBC后，根據(jù)白細(xì)胞體積大小通過計數(shù)通道時所產(chǎn)生的脈沖大小來對WBC進行分類計數(shù)。顯微鏡下計數(shù)WBC是在油鏡下通過觀察細(xì)胞大小、形態(tài)、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點，胞漿的著色特點，有無核仁等對白細(xì)胞進行分類。不同的儀器直方圖是不同的，但只要是白細(xì)胞直方圖出現(xiàn)R1、R2、R3報警，都要進行形態(tài)學(xué)復(fù)檢。異常白細(xì)胞直方圖只是讓檢驗者粗略判別各類白細(xì)胞比例或有無明顯異常細(xì)胞，進而進行形態(tài)學(xué)復(fù)查時注意這些變化的真正意義，而不能僅憑白細(xì)胞直方圖的變化來進行診斷。血液分析儀只對典型的血液病做出提示性診斷，以便作進一步檢查。如果使用不配套的試劑導(dǎo)致直方圖不典型或?qū)缶莆詹粔?，就會忽視血涂片造成漏檢甚至誤檢。
1資料與方法
1.1樣本來源：健康人及臨床患者新鮮抗凝全血(EDTA-K2，抗凝真空負(fù)壓采血管采集)。
1.2方法：儀器校準(zhǔn)：用校準(zhǔn)參考儀器MEK7222-K型血細(xì)胞分析儀之進口原裝配套校準(zhǔn)品對其進行校準(zhǔn)，再在該儀器上將健康人新鮮抗凝全血連續(xù)測定11次，棄去第1次結(jié)果，計算其余10次各指標(biāo)之均值作為新鮮血參考定值。用此定值新鮮血代替校準(zhǔn)品對BC-5500及ABX-60兩臺血細(xì)胞分析儀進行校準(zhǔn)(樣本采集到校準(zhǔn)完成4小時內(nèi)結(jié)束)。
1.3比對試驗：選取臨床患者高、中、低值5份新鮮抗凝全血在上述校準(zhǔn)后的各臺儀器上與其他樣本一同測定(測平行樣取均值)。以MEK7222-K型血細(xì)胞分析儀所測結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，分別計算BC-5500及ABX-60兩臺血細(xì)胞分析儀所測結(jié)果之偏差(CV%)。
2結(jié)果
用新鮮血校準(zhǔn)的BC-5500、ABX-60兩臺血細(xì)胞分析儀之檢測結(jié)果與校準(zhǔn)參考儀器MEK7222-K分析儀之檢測結(jié)果配對比較t檢驗，均為P＞0.05，表明差別無顯著性意義；RDW最大CV值為3.8%，PLT最大CV值為6.9%，MPV最大CV值為14.6%，其余各項指標(biāo)CV值均＜3.0%，五項基礎(chǔ)指標(biāo)之偏差均小于衛(wèi)生部臨檢中心允許的可接受范圍：WBC＜2.8%、RBC＜2.5%、HGB＜2.0%、HCT＜2.6%、PLT＜6.9%。
3討論
血細(xì)胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標(biāo)，其結(jié)果的準(zhǔn)確與否直接影響到多種疾病的診療。全自動血細(xì)胞分析儀由于計數(shù)準(zhǔn)確，精密度高，操作簡便、快速，因而發(fā)展迅速，已逐漸取代傳統(tǒng)手工方法，成為臨床實驗室的主要檢測手段。但由于生產(chǎn)血細(xì)胞分析儀的廠家多，各自使用的測定原理和方法不盡相同，導(dǎo)致其測定結(jié)果及參考范圍有所差異。國內(nèi)各醫(yī)院使用不同廠家和型號的血細(xì)胞分析儀已成為普遍現(xiàn)象，致使分析結(jié)果呈現(xiàn)不同程度的差異，給臨床跟蹤觀察與對比帶來困難。
血細(xì)胞分析結(jié)果只有直接或間接地溯源至參考方法，才能保證檢測結(jié)果的正確性和不同儀器間結(jié)果的可比性。血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)品是權(quán)威部門認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，只能用于與之配套的同一品牌型號的儀器，由于其價格昂貴、有效期短、進口入關(guān)手續(xù)復(fù)雜而不能及時獲得等問題，使其難以在實驗室推廣。
所謂自動血細(xì)胞分析儀實際上就是一臺比較器，它將實測數(shù)據(jù)與校準(zhǔn)數(shù)據(jù)進行比較，繼而得出檢測標(biāo)本的分析結(jié)果。由此可見，校準(zhǔn)物在儀器測定結(jié)果的準(zhǔn)確是否上起到?jīng)Q定性作用。最好的校準(zhǔn)品是經(jīng)ICSH推薦的參考方法定值的新鮮人體血液：①氰化高鐵血紅蛋白法測定血紅蛋白(HGB)。②微量紅細(xì)胞壓積法測定紅細(xì)胞比容(HCT)。微量計數(shù)板手工計數(shù)RBC和WBC。③相差顯微鏡計數(shù)血小板，該新鮮血適用于各種型號儀器的校準(zhǔn)。有報道可購買一臺性能最佳血細(xì)胞分析儀之配套校準(zhǔn)品校準(zhǔn)該儀器，再以該儀器作為校準(zhǔn)參考儀器取得新鮮血各項參數(shù)用于其他多臺儀器的校準(zhǔn)。上述比對結(jié)果顯示：用新鮮血校準(zhǔn)的BC-5500及ABX-60兩臺血細(xì)胞分析儀與校準(zhǔn)參考儀器MEK7222-K分析儀各參數(shù)間進行配對資料t檢驗，均為P＞0.05，表明差別無顯著性意義；五項基礎(chǔ)指標(biāo)之CV值均小于衛(wèi)生部臨檢中心允許的可接受范圍：尤以WBC、RBC、HGB、HCT四項指標(biāo)的符合性最好。因EDTA-K 2抗凝血中，血小板體積不穩(wěn)定，隨時間延長而增大，可能是導(dǎo)致PLT、MPV偏差較大的主要原因。
實驗結(jié)果證明，用配套校準(zhǔn)品校準(zhǔn)一臺性能最佳血細(xì)胞分析儀，再用新鮮血在該儀器上取得參數(shù)后去校準(zhǔn)其他多臺分析儀可取得滿意結(jié)果，該方法既簡便易行又經(jīng)濟實用。
參考文獻
［1］彭明婷,谷小林,等.不同方法校準(zhǔn)血液分析儀結(jié)果比較.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2000,23(1):35-37.
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［3］顧可梁,陳軍浩,谷俊俠,等.醫(yī)學(xué)實驗診斷學(xué)進展.南京:東南大學(xué)出版社,2000:47-53.
【關(guān)鍵詞】 邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀；白細(xì)胞分類；白細(xì)胞復(fù)檢率
WBC的分類計數(shù)具有廣泛的臨床意義， 準(zhǔn)確的WBC分類顯得尤為重要。隨著科學(xué)的不斷發(fā)展， 血細(xì)胞分析儀也應(yīng)運而生。更是因為血細(xì)胞分析儀操作簡便快速、結(jié)果的精密和準(zhǔn)確度比較高， 在擁有少量血液即可為臨床醫(yī)學(xué)研究提供多項、及時、可靠和有效的分析參數(shù)的情況下， 人們更樂意采用這種技術(shù)極大地提高血液檢驗結(jié)果的效率和質(zhì)量， 為人類健康進行服務(wù)。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 收集2014年1月1日～10月31日社區(qū)內(nèi)PLT正?；蛘呤窃龈邷p低的患者標(biāo)本6000例， 其中正常組4000例， 均為2014年1月1日～10月31日中社區(qū)醫(yī)院接待的健康體檢者， 男2007例， 女1993例， 年齡18～66歲。PLT異常組2000例， 增高組500例， 其中男280例， 女220例。PLT減低組1500例， 男750例， 女750例。
1. 2 儀器 邁瑞-3000血細(xì)胞分析儀是2005年邁瑞公司出品的， 具有10.2〃彩色大屏幕LCD同屏顯示所有參數(shù)和直方圖的血細(xì)胞分析儀。主機能自動存儲35000份樣本的全部參數(shù)（包括直方圖）， 歷史數(shù)據(jù)的管理、查詢更便捷。是中國血液細(xì)胞分析儀首家通過CE認(rèn)證的產(chǎn)品。
1. 3 方法 將收集到的6000例血小板計數(shù)值正?；蛘呤窃龈邷p低的患者標(biāo)本根據(jù)Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀、雅培1700血紅細(xì)胞分析系統(tǒng)收集到的數(shù)據(jù)， 同邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀作比較， 對比三部分析儀測定PLT及MPV、PDW、PCT結(jié)果。血小板正常及異常組標(biāo)均為EDTA-K2抗凝血2 ml， 質(zhì)控品恢復(fù)室溫。將標(biāo)本和控制品充分混勻， 但要避免因劇烈震蕩或混勻時間過長造成溶血或產(chǎn)生氣泡， 使血小板及其計數(shù)產(chǎn)生誤差。室內(nèi)質(zhì)控要求血小板計數(shù)每次均在控。
1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P
2 結(jié)果
邁瑞B(yǎng)C-3000檢測系統(tǒng)WBC在極低值醫(yī)學(xué)決定水平處值上， 與目標(biāo)系統(tǒng)不具有任何可比性， 見表1。而Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀和雅培1700血紅細(xì)胞分析與邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀之間在PLT及MPV、PDW、PCT中比較， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
3 討論
血小板計數(shù)是臨床反映患者止血與血栓疾病的一種常用的指標(biāo)， 也是MPV、PDW、PCT等可靠性的基礎(chǔ)。而血細(xì)胞中的白細(xì)胞是一個龐大的血細(xì)胞家族， 其形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能是多樣的， 但是不是相互孤立的， 在機體的防護、免疫和創(chuàng)傷愈治過程中起協(xié)同作用。盡管它們是血液中的一類細(xì)胞成分， 但其功能的發(fā)揮， 更多地體現(xiàn)在循環(huán)管道外的器官組織中[1]。在功能方面它們與這些器官組織中的許多細(xì)胞成分如巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等密切相關(guān)。因此， 每儀器血細(xì)胞標(biāo)本的數(shù)據(jù)都有重要的作用， 可是每一款代器對血小板計數(shù)都存在或多或少的差異， 常常影響臨床對疾病的診斷和治療效果的評估。WBC以前稱為白血球。血液中的一類細(xì)胞， 是人類身體里面與疾病做斗爭的“護衛(wèi)隊”。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒， 可將其分為有粒白細(xì)胞和無粒白細(xì)胞。前者常簡稱為粒細(xì)胞， 根據(jù)其特殊顆粒的染色特性， 又分為中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞。白細(xì)胞也通常被稱為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到， 血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少、具有細(xì)胞核。其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。
本次就邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類及其復(fù)檢率進行研究， 對正常組的研究發(fā)現(xiàn)， 當(dāng)血小板的形態(tài)和數(shù)量基本正常時， 血小板和紅細(xì)胞共同通過計數(shù)閉， 血小板的大小分布能清楚地與紅細(xì)胞區(qū)分開來。由于紅細(xì)胞破壞后形成2.0 fl左右碎片， 容易被誤認(rèn)為血小板， 使血小板及其參數(shù)計數(shù)假性升高， 這種情況在新生兒較多見[2]。由于測血小板與紅細(xì)胞在一個檢測系統(tǒng)， 當(dāng)紅細(xì)胞體積偏小時， 即被誤認(rèn)為是血小板， 從而使血小板計數(shù)假性升高[3]。
綜上所述， 邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞計數(shù)儀測定能夠很好地為臨床醫(yī)學(xué)服務(wù)。
參考文獻
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[關(guān)鍵詞] 血小板；血細(xì)胞計數(shù)儀；散點圖；直方圖；假性血小板減少
[中圖分類號]R446.11+1[文獻標(biāo)識碼]B[文章編號]1673-7210（2008）11（b）-063-02
血細(xì)胞分析儀具有高效、快捷、重復(fù)性好等優(yōu)點，已被各家臨床醫(yī)院廣泛應(yīng)用，但應(yīng)用中血小板計數(shù)時常出現(xiàn)假性血小板減少，令操作者真假難辨，相關(guān)報道甚少，本文就我院2006年中47例假性血小板減少原因分析如下：
1 對象與方法
1.1 研究對象
本院2006年門診及住院患者中47例血小板假性減少者，男27例，女20例。末梢血標(biāo)本17例， EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本30例。
1.2 儀器
美國庫爾特HMX血細(xì)胞分析儀及配套試劑。日本希森美康KX-21血細(xì)胞分析儀及配套試劑。日本OLYMPUS顯微鏡及草酸銨法血小板稀釋液。
1.3 方法
對47例假性血小板減少患者，根據(jù)全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組指定的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，對于儀器計數(shù)血小板偏低、儀器有報警提示、散點圖及直方圖異常時，推片鏡檢血小板形態(tài)及分布情況；重新采血按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版要求進行顯微鏡下草酸銨法血小板復(fù)檢，計數(shù)3次取均值；末梢血預(yù)稀釋后，EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本應(yīng)放置室溫30 min充分混勻后進行血細(xì)胞分析。
2 結(jié)果
10例患者的末梢血標(biāo)本，經(jīng)顯微鏡下草酸銨法血小板計數(shù)結(jié)果得以糾正，同時血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察血小板形態(tài)及分布未見異常。
7例末梢血標(biāo)本，10例EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本經(jīng)室溫30 min后進行血細(xì)胞分析及草酸銨法血小板計數(shù)結(jié)果均得以糾正，血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察血小板形態(tài)及分布未見異常。
8例EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本經(jīng)室溫30 min后進行血細(xì)胞分析結(jié)果仍然減少，草酸銨法血小板計數(shù)結(jié)果得以糾正，血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察發(fā)現(xiàn)血小板大小不等聚集團塊。
5例EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本經(jīng)室溫30 min后進行血細(xì)胞分析血小板計數(shù)結(jié)果仍然減少，草酸銨法血小板計數(shù)結(jié)果糾正，血涂片瑞氏染色后顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”。
7例EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本經(jīng)室溫30 min后進行血細(xì)胞分析結(jié)果仍然減少，草酸銨法血小板計數(shù)結(jié)果得以糾正，血涂片瑞氏染色后鏡檢觀察發(fā)現(xiàn)巨大血小板體積。
3 討論
10例末梢血標(biāo)本假性血小板減少患者，多因穿刺組織損傷、組織凝血因子混入血標(biāo)本中產(chǎn)生肉眼無法見到的凝塊[1]，是造成血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板假性減少的直接原因，對此類末梢血標(biāo)本假性血小板減少患者，應(yīng)該予以閱片，必須重新采血。
7例末梢血標(biāo)本，10例EDTA-K2抗凝靜脈血標(biāo)本經(jīng)室溫30 min后進行血細(xì)胞分析得以糾正的患者，考慮血液離體后血小板產(chǎn)生可逆性聚集，使血小板計數(shù)結(jié)果偏低。末梢血標(biāo)本經(jīng)過預(yù)稀釋隨著與稀釋液作用時間延長血小板均勻離散，抗凝靜脈血標(biāo)本中的EDTA-K2隨著放置時間延長亦能使血小板逐漸離散[2]，因此采取經(jīng)室溫放置30 min充分混勻后進行血細(xì)胞分析可避免血小板假性減少的發(fā)生[3]。
8例血涂片瑞氏染色后顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)血小板呈大小不等聚集團塊。此類患者多見于腫瘤、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥等一些不明原因產(chǎn)生凝集素，使EDTA-K2抗凝血中血小板聚集呈大小不等團塊，血細(xì)胞計數(shù)儀會把這些凝集團塊當(dāng)作白細(xì)胞來計數(shù)，這樣血小板計數(shù)結(jié)果將假性減少，而白細(xì)胞數(shù)量增加；對于此類血小板減少一般儀器可有警報提示和散點圖、直方圖異常，庫爾特HMX血細(xì)胞分析儀會在WBC結(jié)果后面做出[*R]提示，WBC散點圖DF1、DF2圖像下方血小板區(qū)細(xì)胞分布密度向右延伸[4]，提示有血小板凝集的存在；希森美康KX-21血細(xì)胞分析儀會在WBC結(jié)果后面做出WL提示，WBC直方圖上Ghost區(qū)和SCR之間的鑒別線與直方圖交點抬高，提示有大顆粒存在。對此類患者采用草酸銨法血小板計數(shù)。
5例血涂片瑞氏染色后發(fā)現(xiàn)“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”?！把“逍l(wèi)星現(xiàn)象”是偶見于EDTA-K2抗凝血中，血小板黏附、圍繞于中性粒細(xì)胞（或偶爾黏附于單核細(xì)胞）的現(xiàn)象，系EDTA和白細(xì)胞表面的IgG或Fc片段相互作用、非特異性結(jié)合血小板表面的GPⅡb/Ⅲs所致，雖與疾病和藥物無關(guān)，這些黏附、圍繞于中性粒細(xì)胞的血小板被誤計為白細(xì)胞，造成血小板假性減少[5]，由于“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”造成血小板減少，可造成儀器對白細(xì)胞分類不確切，應(yīng)采取草酸銨法血小板計數(shù)糾正，有文獻報道用枸櫞酸鹽抗凝可消除此現(xiàn)象。
7例血涂片瑞氏染色后發(fā)現(xiàn)血小板體積偏大。這類患者多見于腫瘤、白血病、肝病。一般血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板閾值在2～30 fl，因此血小板體積大于30 fl時，超過儀器計數(shù)血小板閾值，不被納入血小板計數(shù)范圍，被誤認(rèn)為是小紅細(xì)胞，因此是血小板計數(shù)結(jié)果偏低[6，7]，對此庫爾特HMX血細(xì)胞分析儀WBC散點圖DF1、DF2圖像下方血小板區(qū)細(xì)胞分布密度向右延伸[4]，MPV值增高，PLT直方圖底部分布較寬，提示有血小板凝集的存在；希森美康KX-21血細(xì)胞分析儀RBC結(jié)果后面出現(xiàn)RL、MPV值增高，PLT直方圖底部分布較寬，鑒別線與直方圖的交點抬高。此時應(yīng)采用草酸胺法血小板計數(shù)糾正其結(jié)果。
綜上所述，根據(jù)全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組制定的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，對于儀器計數(shù)患者血小板偏低時，儀器有報警提示、散點圖及直方圖異常，應(yīng)及時推片鏡檢及采取草酸胺法血小板計數(shù)糾正其結(jié)果，避免假性血小板減少現(xiàn)象發(fā)生，以提高檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
[參考文獻]
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[3]李勝發(fā),程大林.血小板可逆性聚集在全血細(xì)胞分析中的影響[J].臨床檢驗雜志,2003,21(1):37.
[4]王淑娟.現(xiàn)代血細(xì)胞學(xué)圖譜[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004.293.
[5]周小棉,鄒曉.假性血小板減少癥研究進展[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(9):1065.
[6]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007.69.
【關(guān)鍵詞】 白細(xì)胞;細(xì)胞儀分類;手工分類
Reliability analysis of the credibility of WBC by BC-5500 hematology analyzer
XU Jin-hua,HUANG Yu-hui,HUANG Ri-jiao,et al.
Department of Clinical Laboratory,The Fifth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,ZhuhaiGuangdong519000,China
【Abstract】 Objective To analyse the BC-5500 hematology analyzer of the white blood cells to the credibility of the five categories. Methods The classification of the equipment within and between-batch precision measurement,Physical examination were normal people,normal patients and patients with blood diseases diagnosed specimens instruments classified at the same time with the manual classification,and statistical analysis.Results BC-5500 hematology analyzer of the classification of white blood cells good reproducibility and high precision. Conclusion BC-5500 hematology analyzer of the white blood cell classification technology has reached a higher level.
【Key words】 White blood cell; Cytometry classification; Manual classification
作者單位:519000中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院檢驗科
本科于2008年引進了兩臺深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的BC-5500血液細(xì)胞分析儀,在使用了一年的時間里,筆者對該儀器的分類計數(shù)與手工分類進行了對照,以了解該儀器的白細(xì)胞分類情況。
1 對象和方法
1.1 儀器 中國深圳邁瑞公司的BC-5500; OLYMPUS 3100 顯微鏡;改良Neubauer 計數(shù)盤。
1.2 試劑 BC-5500 配套試劑;瑞氏染色液:按《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3 版) 》的方法配置[1]。
1.3 標(biāo)本 本院體檢中心體檢者50例,確診的血液病患者50例,其他患者50例。標(biāo)本均為新鮮EDTA -K2抗凝全血。
1.4 方法 采集受檢者空腹靜脈血2 m l,注入由廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司提供的含EDTA -K2 的真空管內(nèi)立即輕輕顛倒混勻(8～10 次),3 h內(nèi)檢測完畢。BC-5500 型分析儀按要求進行日常保養(yǎng), 確定儀器處于良好的工作狀態(tài), 每天做室內(nèi)質(zhì)控。
1.4.1 準(zhǔn)確度測定 分別采集體檢中心體檢者50例,住院部確診的血液病患者50例,其他住院患者50例,先用BC-5500計數(shù)三次白細(xì)胞的分類百分比,再由2名檢驗技師嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3 版)》用顯微鏡直接計數(shù)法進行分類計數(shù),每人每份標(biāo)本分別計數(shù)三次,并對兩種方法的百分比結(jié)果進行分析。
1.4.2 精密度測定
1.4.2.1 批內(nèi)精密度 取高、中、低三種標(biāo)本分別連續(xù)測定 11 次,2～11 次求出白細(xì)胞分類各項 CV(%)。
1.4.2.2 批間精密度 用深圳邁瑞公司提供的質(zhì)控物連續(xù)測定 20 d,求出白細(xì)胞分類各項 CV(%)。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 11. 0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,比較采用t檢驗,P
2 結(jié)果
2.1 精密度
2.1.1 批內(nèi)精密度,結(jié)果見表1。
表1
高、中、低 3 種標(biāo)本檢測結(jié)果的 CV(%)
項目 高值中值低值
中性粒細(xì)胞4.355.105.67
淋巴細(xì)胞 5.015.986.23
嗜酸性粒細(xì)胞 4.865.235.87
嗜堿性粒細(xì)胞3.564.034.99
單核細(xì)胞 5.235.516.01
2.1.2 批間精密度 中性粒細(xì)胞:4.42,淋巴細(xì)胞:4.05,嗜酸性粒細(xì)胞:5.20,嗜堿性粒細(xì)胞:5.23,單核細(xì)胞:5.71;均在儀器設(shè)定的范圍之內(nèi)。
2.2 準(zhǔn)確度 BC5500 型分析儀分類與手工法鏡檢分類結(jié)果的比較,結(jié)果見表2。
表2
BC5500 型分析儀對白細(xì)胞的分類與手工法鏡檢分類結(jié)果的比較
組別細(xì)胞分類 例數(shù)儀器分類(%)手工分類(%)
體檢中心體檢者中性粒細(xì)胞50 55.9±9.00* 54.3±8.60
淋巴細(xì)胞34.7±9.75* 32.6±9.21
嗜酸性粒細(xì)胞 3.20±2.10* 2.96±2.96
嗜堿性粒細(xì)胞0.40±0.40# 0.21±0.20
單核細(xì)胞5.85±1.75# 3.55±2.20
確診的血液病患者1中性粒細(xì)胞46 49.1±36.5* 50.1±34.6
淋巴細(xì)胞47.5±37.7* 42.1±39.5
嗜酸性粒細(xì)胞 5.80±5.10* 5.30±4.98
嗜堿性粒細(xì)胞 0.25±0.25# 0.12±0.10
單核細(xì)胞17.1±16.4# 13.6±13.2
確診的血液病患者2中性粒細(xì)胞4 51.6±33.5
淋巴細(xì)胞43.2±36.1
嗜酸性粒細(xì)胞2.01±2.68
嗜堿性粒細(xì)胞0.41±0.16
幼稚細(xì)胞23.1±10.7
單核細(xì)胞3.61±2.08
其他患者中性粒細(xì)胞5049.5±33.7*47.9±34.8
淋巴細(xì)胞41.6±33.0*39.7±35.1
嗜酸性粒細(xì)胞8.00±7.90*7.56±8.20
嗜堿性粒細(xì)胞0.40±0.30#0.11±0.15
單核細(xì)胞 9.95±5.15#6.53±5.30
注:兩種方法比較,* P>0.05,#P
3 討論
邁瑞公司生產(chǎn)的BC 5500 型分析儀運用激光, 流式細(xì)胞術(shù), 細(xì)胞化學(xué)染色等多項技術(shù), 利用細(xì)胞內(nèi)顆粒的密度,核分葉對激光的折射等先進手段, 通過1°～ 5°的低角度和8°～20°高角度激光散射對細(xì)胞進行計數(shù)和分類。因此BC 5500型分析儀用于非血液患者的細(xì)胞計數(shù)是可行的。通過批內(nèi)和批間精密度結(jié)果分析,BC-5500血細(xì)胞分析儀分類計數(shù)的CV值均在儀器設(shè)定的范圍之內(nèi),精密度較高,重復(fù)性好。對非特殊性的標(biāo)本,該儀器能夠準(zhǔn)確的作出分類。
由表2 可知:無論普通體檢組還是患者組, 中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞, 儀器分析與手工鏡檢結(jié)果比較差異無顯著性 (P>0.05)且相關(guān)性非常顯著(r= 0.916)?；颊呓M儀器法伴有不同提示的, 鏡檢分類均有不同程度的變化。體檢組和普通患者組單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞, 儀器分類與鏡檢結(jié)果差異有顯著性(P
綜上所述,BC-5500血細(xì)胞分析儀對白細(xì)胞的分類情況已經(jīng)達(dá)到了較高的水平,足以滿足臨床的基本需要。當(dāng)然,作為一種全血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類方法只能作為一種過篩手段進行初檢[3], 對于血液中各種細(xì)胞的多形態(tài), 多變化的特點, 儀器的識別能力不如人工顯微鏡檢查準(zhǔn)確。在使用全自動分析儀時一定要注意, 先進的儀器不能完全替代顯微鏡分類, 當(dāng)血細(xì)胞數(shù)量、比例、分布圖、散點圖有異常時[4], 應(yīng)該做血涂片人工鏡檢, 以免漏診異常形態(tài)細(xì)胞和血液系統(tǒng)疾病。
參 考 文 獻
[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社,2006:136.
[2] 唐滬強, 許凱聲, 揚律.STKS 血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類結(jié)果評價.上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志, 1999, 14(2):82.
【摘要】血細(xì)胞分析儀具有快速、方便、重復(fù)性好、工作效率高等優(yōu)點，但是由于自身檢測原理的限制以及血小板易于粘附、聚集、破壞等特點，血細(xì)胞分析儀測定血小板時常常會出現(xiàn)假性減少現(xiàn)象。為此，現(xiàn)將血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板出現(xiàn)假性減少的原因進行簡單的探討。
【關(guān)鍵詞]】血細(xì)胞分析儀 血小板假性減少 原因分析
近年來，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)的不斷完善，血液分析儀器法檢測已逐漸取代了手工計數(shù)，血細(xì)胞分類的儀器檢測的準(zhǔn)確度也大大提高，全自動血細(xì)胞分析儀在臨床檢驗中的應(yīng)用也越來越廣泛，提高了臨床檢驗的工作效率，然而，儀器檢測受多種因素的影響以及血小板易于粘附、聚集、破壞等特點，血細(xì)胞分析儀測定血小板時常常會出現(xiàn)假性減少現(xiàn)象，致使檢測結(jié)果與實際臨床不符，給醫(yī)生的診斷帶來很大困難，也使檢驗醫(yī)師不敢冒然報告。為此，現(xiàn)將血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板出現(xiàn)假性減少的原因進行簡單的探討。
1 標(biāo)本采集
正確采集血標(biāo)本是獲得準(zhǔn)確、可靠實驗結(jié)果的關(guān)鍵。在樣本采集前， 應(yīng)根據(jù)實驗要求決定采血方法、所需血量及適用抗凝劑。
1.1 皮膚采血：采血不順利、多發(fā)生在老人，兒童及體質(zhì)較差的的患者，因采血不順引起組織損傷，易于凝血、混入組織液，而且局部皮膚揉擦、針刺深度不一、個體皮膚厚度差異等都會影響檢查結(jié)果；凝血因子混入血標(biāo)本造成血小板集聚。所以，采血部位的皮膚應(yīng)完整，無燒傷、凍瘡、水腫或炎癥等。皮膚消毒后，應(yīng)待75%乙醇揮發(fā)后采血，避免流出的血液擴散而不成滴。采血時針刺深度2～3mm。因第一滴血混有組織液，應(yīng)擦去，如血流不暢切勿用力擠壓。
1.2 靜脈采血： 靜脈采血時止血帶結(jié)扎時間應(yīng)小于1分鐘，待消毒液干后再進行穿刺，避免反復(fù)穿刺將組織液抽到注射器內(nèi)，或?qū)馀莼烊?。?yīng)熟練掌握操作方法，抽血不宜過快，避免抽血過快血小板破壞，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。
1.3 抗凝劑EDTA的影響：按照國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)的建議，1.5～2.2mg的EDTA-2K抗凝1ml的全血可以抑制血小板聚集，從而達(dá)到抗凝的目的。但有極少數(shù)人的血小板在用EDTA抗凝時，反而會出現(xiàn)血小板聚集，這種EDTA依賴性假性血小板減少可能與血漿中存在的抗血小板抗體和/或抗心磷脂抗體等自身抗體有關(guān)。另一種現(xiàn)象是血小板粘附于白細(xì)胞上的“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”，它是由于白細(xì)胞表面的IgG或Fc段與血小板表面的GPⅡb/Ⅲa結(jié)合所致，與疾病和藥物也無關(guān)。對于這類標(biāo)本，只能換用非EDTA抗凝劑進行重新計數(shù)，比如枸櫞酸鹽或在EDTA抗凝血中加入肝磷脂1。
1.4 標(biāo)本放置時間不足：在實際工作中，采取標(biāo)本后立即進行檢測，有時會出現(xiàn)血小板計數(shù)假性減少現(xiàn)象。用EDTAK2作為抗凝劑已被國際血液學(xué)標(biāo)本委員會認(rèn)定并廣泛應(yīng)用。EDTAK2會使血小板形態(tài)發(fā)生變化，其外膜形成微小管。游離端向外伸展形成偽足聚集一體。此時測定血小板會假性減低，直方圖呈鋸齒狀異常。但隨著時間延長可逆性聚集體會破壞。因此采取室溫放置30分鐘可以避免這種情況的血小板假性減少。
2 標(biāo)本檢測
2.1 檢測前，對檢測儀器進行檢查、校準(zhǔn)，使其處于最佳工作狀態(tài)。每天堅持做室內(nèi)質(zhì)控，并根據(jù)質(zhì)控結(jié)果判斷當(dāng)日檢測的所有數(shù)據(jù)是否可靠。
2.2 檢測中，注意環(huán)境溫度應(yīng)在18-25°C，低于15°C或高于30°C時均會對結(jié)果產(chǎn)生影響。
2.3 檢測后，對出現(xiàn)明顯異常的標(biāo)本及時查找原因，重新測試，遇到危急值結(jié)果的，及時與臨床醫(yī)師聯(lián)系。
巨大血小板導(dǎo)致血小板計數(shù)假性降低：病人由于某些疾病血小板體積較大，超出了血細(xì)胞分析儀測定血小板的閾值，使血小板計數(shù)假性降低。此種情況可見血小板直方圖底部分布較寬，MPV值較高。
3 小結(jié)
血小板計數(shù)對血栓與出血性疾病的診斷和治療有重要的參考價值。在實際工作中，要排除一些干擾因素，保證血小板檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，作為檢驗人員一定要具有很強的責(zé)任心，加強質(zhì)控管理，不斷提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床提供可靠的診斷和治療依據(jù) 。
參考文獻
［1］ 全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版）
［2］ 李駿淺析血細(xì)胞分析時血小板假性減少原因
關(guān)鍵詞:網(wǎng)織紅細(xì)胞;全自動血細(xì)胞分析儀;瘧原蟲
Evaluation of performance of ADVIA2120blood-counter system for detection of reticulocytes.
Abstract:Objective To evaluate the performance of ADVIA2120for the test of reticulocytes. Methods ADVIA2120was used for detection of high/normal/low reticulocyte samples and the reproducibility，the rate of carrying contamination and stability were observed.The results were compared with manual method. Results Reproducibility:except that the CV of high nucleic acid was13.82%～17.4%，the CV of the other indexes was less than8.19%;linearty:r=0.9979;stability:percentage CV of Ret at4℃in24hwas3.8%;the rate of carrying contamination was0.22%;compared with the manual methods:r=0.9962，P>0.05. Conclusion The srate of carrying contamination by using ADVIA2120blood-counter system in test of reticulocytes is low，stable and showing a nice linear correlation suitable for clinical use.
Key words:Reticulocytes;Automatic blood-counter system;Plasmodium
網(wǎng)織紅細(xì)胞（Reticulocytes，Ret）傳統(tǒng)的人工測定煩瑣而費時，準(zhǔn)確性受操作人員的經(jīng)驗、水平、細(xì)胞計數(shù)量、染色效果及涂片質(zhì)量等因素影響大，重復(fù)性也差。全自動血細(xì)胞分析儀測定網(wǎng)織紅細(xì)胞應(yīng)用逐漸增多，因臨床應(yīng)用時間不長，其性能尚有待觀察。ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀是拜耳公司新推出的五分類機型，配備全自動網(wǎng)織紅細(xì)胞分析功能，可提供14項相關(guān)參數(shù)，因部份指標(biāo)臨床意義尚無確論，故本文僅選擇6項與細(xì)胞數(shù)量相關(guān)的指標(biāo)進行評價。現(xiàn)進行重復(fù)性、線性、攜帶污染率、穩(wěn)定性測試，并與手工百分率分類結(jié)果進行比較，報道如下。
1 資料與方法
1.1 資料
1.1.1 標(biāo)本來源 住院患者，網(wǎng)織紅細(xì)胞按儀器初步測量結(jié)果分為高、中、低三類。
1.1.2 設(shè)備 美國ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀、日本OLYMPUSBX-60多功能光學(xué)顯微鏡、上海醫(yī)療設(shè)備廠HH-W21-600電熱恒溫水育箱、姜堰康健醫(yī)療器具有限公司KJRM-1搖勻器。
1.1.3 ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀原裝配套試劑及全血質(zhì)控品（批號0605204）;珠海貝索公司網(wǎng)織紅細(xì)胞染液和瑞氏染液，按試劑使用說明操作。廣州陽普公司EDTA-K2血常規(guī)抗凝管（批號0602012）。
1.2 方法 按相關(guān)評價原則，ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀重復(fù)測定樣本，評價儀器日內(nèi)精密度、日間精密度、線性、攜帶污染率和穩(wěn)定性，測定前搖勻器正、反向搖動3min。
1.2.1 日內(nèi)精密度 按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NC-CLS）制定的方案 ［1］ ，選擇本院住院患者血樣，網(wǎng)織紅細(xì)胞按儀器初步測量結(jié)果分為高、中、低三類，各1份，每份重復(fù)測定10次，并計算平均值（x）和變異系數(shù)（CV）。
1.2.2 日間精密度 因臨床血標(biāo)本穩(wěn)定性差，故以原廠全血質(zhì)控品每日9:00、12:00、16:30測定三次，取均值，連續(xù)測定10d，并計算平均值（x）和變異系數(shù)（CV）。
1.2.3 線性評價 按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）制定的線性驗證方案EP6-A ［2］ ，選擇一份網(wǎng)織紅細(xì)胞細(xì)胞高值樣本，在技術(shù)指標(biāo)范圍內(nèi)做比例稀釋，儀器測定各濃度2次，取均值，所得數(shù)據(jù)進行回歸分析。
1.2.4 攜帶污染率 按國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會制定的程序 ［3］ ，將高值樣本連續(xù)測定3次（H 1 、H 2 、H 3 ），緊接著連續(xù)測定低值樣本3次（L 1 、L 2 、L 3 ），攜帶污染率結(jié)果為［（L 1 ～L 3 ）/（H 3 -L 1 ）］×100%。
1.2.5 穩(wěn)定性試驗 因血樣皆為低溫保存，考慮溫度為主要影響因素。取一份血樣分為3管，放置于4℃冰箱。分別于0min、15min、30min、45min、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、24h、48h、72h每個時間點測定3次，取均值。
1.2.6 相關(guān)性評價 按NCCLS H20-A1 ［4］ 文件，將30份標(biāo)本制作3張血片，2名有經(jīng)驗的主管技師隨機各選一張，雙盲法計數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率 ［5］ ，取均值后與儀器測定結(jié)果進行相關(guān)性比較。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行配對t檢驗和回歸分析。
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2 結(jié)果
2.1 日內(nèi)精密度測試 高值項目日內(nèi)精密度較好，低值項目高核酸濃度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率（%）日內(nèi)精密度偏大。見表1。
表1 ADVIA2120網(wǎng)織紅細(xì)胞測定日內(nèi)精密度（略）
2.2 日間精密度測試 高值項目日間精密度較好，低值項目高核酸濃度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率（%）日精密度偏大。見表2。
表2 ADVIA2120網(wǎng)織紅細(xì)胞測定日間精密度（略）
2.3 線性評價 初始計數(shù)為0.38×10 12 /L的樣本按比例稀釋后理論結(jié)果為（0.304、0.228、0.152、0.076、0.038）×10 12 /L，實際測定結(jié)果為（0.298、0.231、0.148、0.063、0.033）×10 12 /L，得回歸曲線y=1.0225x-0.0086，相關(guān)系數(shù)r為0.9989，P>0.05。（見圖1）
2.4 攜帶污染率 高值樣本3次測定結(jié)果分別為H 1 =0.64×10 12 /L、H 2 =0.67×10 12 /L、H 3 =0.65×10 12 /L，低值樣本3次測定結(jié)果分別為L 1 =0.03×10 12 /L、L 2 =0.03×10 12 /L、L 3 =0.02×10 12 /L，攜帶污染率0.22%。穩(wěn)定性試驗:4℃冷藏后測定，百分率結(jié)果均值分別為6.42%（0min）、6.18%（15min）、6.27%（30min）、6.19%（45min）、6.33%（1h）、6.22%（2h）、6.34%（3h）、6.28%（4h）、6.21%（5h）、6.35%（6h）、6.37%（7h）、6.25%（24h）、5.68%（48h）、5.21%（72h），結(jié)果顯示24h內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率變化無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），48h后網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率降 低，變化有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。
圖1 ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞線性評估（略）
圖2 網(wǎng)織紅細(xì)胞ADVIA2120測定與手工法測定相關(guān)性（略）
3 討論
網(wǎng)織紅細(xì)胞測定在各種貧血的鑒別診斷、療效觀察、腫瘤患者放、化療后骨髓造血功能評估等有著重要的臨床意義，及時、準(zhǔn)確的網(wǎng)織紅細(xì)胞測定有利于動態(tài)了解骨髓紅系增生情況。ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞測定原理是先用戊二醛和十二烷基硫酸鈉將紅細(xì)胞球形化并固定，氧氮雜芑750使RNA染藍(lán)色，著色程度與RNA含量成正比，細(xì)胞通過FLOWCELL在激光照射下產(chǎn)生散射，應(yīng)用MIE原理，得到網(wǎng)織紅細(xì)胞的14項測量參數(shù)和計算參數(shù)，因?qū)W(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度分布寬度、血紅蛋白含量分布寬度等指標(biāo)臨床意義尚無確論，故僅選擇6項與細(xì)胞數(shù)量相關(guān)指標(biāo)進行評價。
從結(jié)果看，ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞測定具有良好的精密度，除高核酸濃度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率因計數(shù)值較低，故cv值在日內(nèi)和日間偏大外（13.82%～17.4%），其它項目cv值在1.18%～8.19%之間，處于理想范圍之內(nèi)。穩(wěn)定性測試表明4℃24h內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率結(jié)果穩(wěn)定，結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05，CV3.8%），48h后網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率降低。低溫雖能減緩紅細(xì)胞新陳代謝，但網(wǎng)織紅細(xì)胞向成熟紅細(xì)胞的轉(zhuǎn)化未完全停止，時間過長導(dǎo)致RNA降低的比率增高并出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05，圖1），攜帶污染率低（0.22%），達(dá)到臨床應(yīng)用要求。與手工法的百分率結(jié)果比較相關(guān)性佳（r=0.9962，P>0.05，圖2），考慮到儀器法檢測細(xì)胞數(shù)量大，可有效避免細(xì)胞在血片分布上的統(tǒng)計學(xué)誤差，特別是低值測量結(jié)果，因此儀器法應(yīng)更為理想。臨床應(yīng)用中遇1例瘧疾患者樣本，入院儀器查血色素68g/L，RBC2.23×10 12 /L，網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)0.32×10 12 /L，網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率14.35%，經(jīng)外周血片瑞氏染色，感染蟲體之RBC為10.3%（計數(shù)1000個RBC），抗瘧治療3周后查血色素85g/L，RBC3.03×10 12 /L，網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)0.08×10 12 /L，網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率2.64%，外周血片瑞氏染色未查見蟲體和受染RBC。文獻報道受瘧原蟲感染的RBC中RNA含量是增加的 ［6］ ，那受染RBC在RNA增高時是否歸為網(wǎng)織紅及RNA不高時如何區(qū)分則缺乏妥善的處理辦法。在手工煌焦油藍(lán)活體染色、ADVIA2120的氧氮雜芑750染色及sysmex2100的熒光染色不能分辨的情況下，對瘧疾血樣做外周血片瑞氏染色，計數(shù)受染細(xì)胞比例，可大致判定干擾程度。
總體而言，ADVIA2120全自動血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞測定避免了傳統(tǒng)手工法的諸多缺點，如肉眼判讀的主觀性、細(xì)胞的分布誤差、檢測的低效率等問題，在全血分析時可根據(jù)情況隨時選擇加做網(wǎng)織紅分析，無需再取血樣，其便利性和高效性是手工法無可比擬的，加之重復(fù)性、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性及攜帶污染率各指標(biāo)均符合臨床應(yīng)用要求，在有條件的醫(yī)院全自動儀器法測定網(wǎng)織紅細(xì)胞是很好的選擇。
參考文獻
［1］Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A Sta-tistical Approach;Approved Guideline.NCCLS document EP9-A2，2002.
［2］Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A Sta-tistical Approach;Approved Guideline.NCCLS document EP6-A.Vol.23，2003.
［3］ Protocol for evaluation of automated hematology analyzer.ICSH.Clin Lab Heamotal，1984，6:69.
［4］Reference leukocyte differential count（Proportional）and evaluation of in-strument methods，NCCLS document H20-A，vol12，1992.
關(guān)鍵詞：邁瑞B(yǎng)C-2600全自動血球計數(shù)儀 儀器性能 總重復(fù)性
近年來，我鎮(zhèn)進行邁瑞B(yǎng)C-2600全自動血球計數(shù)儀監(jiān)測工作，以手工法檢測結(jié)果的對照研究已取得部分進展，儀器法方便快捷，省時省力，能大批量開展工作，但部分檢測結(jié)果不如手工法可靠，不能完全替代手工法，而且手工發(fā)費時費力，速度慢，但在細(xì)胞低，特別是占百分比較低的細(xì)胞分類方面比儀器法更可信。
血細(xì)胞分析儀所檢測的項目(血紅蛋白測定、紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞體積、血小板計數(shù))是臨床上應(yīng)用最為廣泛的實驗室指標(biāo)，其結(jié)果直接影響對病人的診斷及治療。為了解我們所使用儀器的性能，根據(jù)國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)公布的有關(guān)血細(xì)胞分析儀的評價方案，我們對深圳邁瑞公司BC一2600全自動血細(xì)胞分析儀進行總重復(fù)性評價，結(jié)果報告如下。
1材料和方法
1.1 儀器及試劑BC一2600全自動血細(xì)胞分析儀、配套試劑、校準(zhǔn)品。
1.1 儀器及試劑BC一2600全自動血細(xì)胞分析儀、配套試劑、校準(zhǔn)品。
1.2 樣品臨床就診人員的EDTA―K2抗凝(1.5―2.0mg)、靜脈血2.0ml。
1.3 使用MICROSOFr EXCEL軟件進行統(tǒng)計分析
1.4 項目 WBC、RBC、HGB、MCV、PLT。
1.5 方法隨機抽取按操作規(guī)程正常采集的EDTA―K2抗凝靜脈血液20份，按常規(guī)方法分別測定WBC、RBC、HGB、MCV、P 各三次，每次間隔時間為2小時，從標(biāo)本采集到第三次測定完成累計時間不超過6小時。根據(jù)測定數(shù)據(jù)計算WBC、RBC、HGB、MCV、PLT的總重復(fù)性(即各項目的CV％ )。
1.6 計算公式
1.6.1 組內(nèi)離均差平方和(SSQ)計算：SSQ=∑(各測定值)
2一∑(各標(biāo)本小計) 2／n
n為重復(fù)測定次數(shù)，本實驗重復(fù)測定次數(shù)為3次。
1.6.2 總重復(fù)性計算(用不精密度CV％表示)：
3討論
經(jīng)過對BC一2600五個項目的測定，得出白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白測定(HGB)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、血小板計數(shù)(PLT)的總重復(fù)性(以CV％計分別為1.15％ 、0.86％ 、0.29％ 、3.98％ ，符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。)隨著實驗室全面管理的不斷強化和血細(xì)胞分析儀的普及，對血紅胞分析儀的結(jié)果重復(fù)性提出了更高的要求?？傊貜?fù)性包含了重復(fù)測定的隨機誤差與攜帶污染雙重變異因素，因此能全面評價儀器測定的精密度，良好的重復(fù)性是高精密儀器的重要標(biāo)志，它使我們能為臨床醫(yī)生提供更為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。
參考文獻：
[1] 劉斌；潘秀芳；王玉豐.Sysmex sf-3000血液分析儀白細(xì)胞分類兩種虛假提示及解決方法[J]；檢驗醫(yī)學(xué)與臨床；2007，01
[2] 劉世文，陳佳榮，李彩玉.KX-21血液分析儀兩種操作模式間的精密度差異分析[J]；臨床檢驗雜志；2005，05
【關(guān)鍵詞】 血細(xì)胞分析儀； 白細(xì)胞分類計數(shù)； 人工分類計數(shù)
The results analysis of white blood cells classification count by F-820,KX-21,HC-1022 blood cell analyzer and artificial classification SU Xin.Binzhou Maternal and Child Care Service Center，Binzhou 256600,China
【Abstract】 Objective To explore the differences between the two groups,three group-dividing blood count instrument white blood cells classification count and artificial classification count,and to provide more accurate results and the reference.Methods 18-20 healthy male 72 cases, female 42 patients were selected and taken EDTA-Na2 anticoagulant with 2 ml from venous,and at the same time,white blood cell count were done by the three instruments and artificial classification.Results The instrument classification and artificial classification were significant difference (P
【Key words】 Blood cells analyzer; White blood cells classification count; Artificial classification
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.05.051
血細(xì)胞分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床，代替了繁瑣的手工操作，減少了操作過程的隨機誤差，實驗器材的系統(tǒng)誤差及檢測方法本身的固有誤差，改善了實驗結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性，提高了工作效率，各大醫(yī)院基本都配置了五分群血細(xì)胞分析儀。由于條件所限，有相當(dāng)一部分基層醫(yī)院還在普遍使用兩分群和三分群血細(xì)胞計數(shù)儀，由于三分群或兩分群血細(xì)胞計數(shù)儀采用的是阻抗分析法，其原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎(chǔ)，進行血細(xì)胞計數(shù)分類和體積測定。也就是靠對細(xì)胞體積大小的識別來分類[1]，而不是按照細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)和性質(zhì)分類，因此對分類結(jié)果會有一定的影響。本文對儀器分類結(jié)果與人工分類結(jié)果進行了比較。
1 資料與方法
1.1 一般資料 健康男性72例，女性42例，年齡18～20歲。
1.2 方法 采用日本東亞sysmax F820兩分群血細(xì)胞分析儀，sysmax KX-21、美國邁瑞HC-1022三分群血細(xì)胞分析儀，試劑采用儀器配套進口試劑；奧林巴斯顯微鏡，瑞氏染液。首先用四川通廣公司產(chǎn)的全血質(zhì)控物標(biāo)定儀器，抽取靜脈血2 ml，用EDTA-Na2（1.5 mg/ml）防凝，充分混勻，所有標(biāo)本在4 h內(nèi)完成檢測。同時制備血涂片，用瑞氏染色按全國統(tǒng)一操作規(guī)程行人工分類[1]。
2 結(jié)果
將有細(xì)胞分類報警與無細(xì)胞分類報警的標(biāo)本分別與人工分類做比較，詳見表1～6。
3 討論
從表1、2、3、4可以看出，無報警與有報警結(jié)果三分群血細(xì)胞分析儀與人工分類差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P
參 考 文 獻