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【中圖分類號】R122.1+2【文獻標識碼】A【文章編號】1007-8517(2009)12-0066-01
長期以來，尿液有形成分檢驗是否離心，文獻報道不一[1]~[6]。叢玉隆等認為尿液離心檢查法不適合紅細胞等有形成分定量[5]，馬俊龍等研究發(fā)現(xiàn)離心鏡檢法與不離心鏡檢比較，紅細胞檢測結果僅是不離心鏡檢法的一半[7]。但上述研究都是在尿液紅細胞中高濃度（≥100/μl）以上時得出的。本文使用離心和不離心兩種方法對低濃度紅細胞（≤100/μl）尿液進行紅細胞鏡檢計數(shù)，結果報告如下。
1材料與方法
1.1材料①標本來源：本院門診病人正常尿液；正常人全血。②儀器器材：Olympus顯微鏡（日本）；LDZ5-2低速自動平衡離心機（北京醫(yī)用離心機廠）；FAST-READ10一次性尿沉渣計數(shù)板（意大利）。
1.2方法
1.2.1不同濃度紅細胞成分的尿液標本的制備選擇EDTA-K2抗凝的新鮮正常的全血樣本1份，用血細胞分析儀（使用校準品校準）測量紅細胞數(shù)值，使用正常人混合尿液（收集多人尿液，用高速離心方法去除細胞等有形成分，留取上清夜）將紅細胞含量配制成10/μl、25/μl、50 /μl、100/μl四個濃度。配制好的含紅細胞的尿液標本分別由三位熟練檢驗人員用離心鏡檢法和不離心鏡檢法計數(shù)紅細胞數(shù)量。
1.2.2離心鏡檢法按全國臨床檢驗操作規(guī)程方法[8]進行，取混勻的尿液標本10ml于一次性尿沉渣專用離心管內，以1500r/min,離心5分鐘，吸掉上清夜，留取管底0.2ml沉渣，充分混勻后用一次性塑料吸管滴入FAST-READ10一次性尿沉渣計數(shù)板的計數(shù)池內，稍待片刻，首先用低倍鏡觀察細胞分布情況，再用高倍鏡計數(shù)全池9個大方格內的紅細胞數(shù)。紅細胞含量（細胞數(shù)/μl） =（9個大方格的紅細胞數(shù)/9）×10÷50。
1.2.3不離心鏡檢法將配制好的紅細胞尿液充分混勻，用一次性塑料吸管吸取滴入FAST-READ10一次性尿沉渣計數(shù)板的計數(shù)池內，稍待片刻，首先用低倍鏡觀察細胞分布情況，再用高倍鏡計數(shù)全池9個大方格內的紅細胞數(shù)。紅細胞含量（細胞數(shù)/μl） =(9個大方格的紅細胞數(shù)/9)×10
以上兩種方法，每管都重復充液計數(shù)6次，取平均值。所有檢測均在樣本配制后2h內完成。
1.3統(tǒng)計學方法用配對t檢驗。
2結果
不離心鏡檢計數(shù)與理論定值比較接近，平均偏差-5.82%；但離心法鏡檢計數(shù)結果是理論定值的一半左右，平均偏差達-46.15%。見表1。兩法相比，t=2.52，P
3討論
尿沉渣的顯微鏡檢查是識別尿有形成分的“金標準”，主要有離心鏡檢法和不離心鏡檢法兩種，我國多建議采用離心法[9]。在實際工作中，當尿液紅細胞較多時，離心沉淀反而不利鏡檢計數(shù)，尿沉渣檢驗實際無需離心，這已為檢驗人員所公認[4，6，7]。況且，許多研究顯示，在尿紅細胞中高濃度時，離心法結果與真實結果存在明顯的差異，離心法結果明顯低于不離心法，不離心直接計數(shù)與真實值更加接近[5，7 ，0]。離心的目的是濃縮有形成分，防止漏檢，在尿有形成分濃度較低時，比如在正常參考值的上限9/μl[11]以上，到100/μl這個濃度范圍內，將尿液離心，濃縮有形成分后再鏡檢計數(shù)似乎理所當然，但本研究顯示即使在低濃度下離心法的計數(shù)結果仍然明顯低于真實值，而不離心法與真實值較為接近，與叢玉隆等[5]在高濃度下的研究結果一致。
離心使紅細胞計數(shù)偏低的原因主要可能有以下幾個方面：①離心后紅細胞沉淀不完全，上清夜還有紅細胞；②離心過程中部分紅細胞受到破壞；③離心管管壁有細胞的粘附；④計算時除于50這個濃縮倍數(shù)，放大了上述效應。本研究方法參考叢玉隆等的研究方法是在沒有干擾物的情況下進行的，在實際工作中是否適用，馬俊龍等通過研究已經(jīng)得到了肯定，認為采用新鮮尿液直接計數(shù)（擴大計數(shù)范圍）是尿液有形成分計數(shù)的理想方法，而離心鏡檢法不適合有形成分定量分析[7]。綜上所述，可以認為，不離心法尿液直接鏡檢計數(shù)紅細胞（擴大計數(shù)范圍）在決定性水平上（高于參考值上限的低濃度）比離心鏡檢法更為敏感，更為準確，檢出率更高；且該法操作簡便，結果快速，無須昂貴儀器，值得基層醫(yī)院推廣。至于數(shù)到多少細胞的數(shù)量接近泊松分析能夠達到準確定量計數(shù)的標準，尚需探討。
參考文獻
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【關鍵詞】 黃芪多糖；力竭游泳；紅細胞數(shù)；血紅蛋白
文章編號：1004-7484（2013）-12-7071-02
疲勞是一種常見的有損于身體健康的生命現(xiàn)象，可獨立引發(fā)臨床疾病及慢性疲勞綜合癥等，因此已成為國內外關注的病癥和研究的熱點。多種中藥具有抗疲勞及耐缺氧作用，現(xiàn)代藥理學研究表明傳統(tǒng)補益中藥黃芪具有增強機體免疫功能、耐缺氧及應激能力，促進機體代謝，強心，降低血壓，保護肝臟，調節(jié)血糖等藥理作用[1-4]。其中有效成分即是黃芪多糖。因此，應用現(xiàn)代科學技術探討黃芪作用機制，可使其更好地為人類服務。黃芪多糖是否具有增強機體運動負荷能力、抵抗疲勞產(chǎn)生的作用目前尚不明確。本研究即探討黃芪多糖對小鼠的抗疲勞作用，測定小鼠血紅細胞數(shù)及紅蛋白含量的變化。
1 資料與方法
1.1 材料
1.1.1 主要試劑和儀器 黃芪多糖（純度70%，批號：20130310，長沙駿宏生物科技有限公司）；血紅蛋白試劑盒（南京建成生物研究所）；Morris水迷宮（西班牙Panlap公司生產(chǎn)，產(chǎn)自上海光譜儀器有限公司）；722型分光光度計（上海光譜儀器有限公司）；紅細胞計數(shù)板；光學顯微鏡；電子恒溫不銹鋼水浴鍋（上海市南陽儀器有限公司）；壓力蒸汽滅菌器（上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠）；101-1AB型電熱鼓風干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；單道手動可調移液器（蘇州百得實驗室儀器有限公司）；JB760-68比色皿（江蘇新力科技實業(yè)有限公司）。
1.1.2 動物 40只SPF級昆明小鼠，雄性，體重（22±2）g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，批號43004700000750，長沙醫(yī)學院湖南省重點建設學科標準動物室飼養(yǎng)。
1.2 方法
1.2.1 動物給藥及游泳力竭實驗 40只SPF級昆明小鼠分兩次實驗，每次取小鼠20只，隨機分為4個組，即對照空白組、黃芪多糖高、中、低劑量組，每組各為5只?？瞻捉M小鼠灌胃給予5ml/kg蒸餾水，黃芪多糖高、中、低劑量組小鼠分別灌胃給予0.2，0.05，0.0125g/kg黃芪多糖。每天一次，連灌28天，第28天給藥后3h，在小鼠尾部縛大約為體重5%的鐵絲，然后放入水深50cm、直徑為50cm的Morris水迷宮內，水溫維持在（35±1）℃，直至游泳力竭，力竭的時間根據(jù)從游泳實驗開始直至沉入箱底后10s不浮出水面進行計算。第29天，無負重游泳30min，撈出小鼠擦干，30min后，摘眼球（并擠壓心臟區(qū)域）取血，放入EP管中。測定運動后小鼠血中紅細胞數(shù)和血紅蛋白的含量。
1.2.2 紅細胞計數(shù) 迅速吸取全血10ul，0.95g/100ml生理鹽水稀釋10000倍至100ml，取1至2滴在于蓋好干燥蓋玻片的紅細胞計數(shù)板一端，在光學顯微鏡下記錄紅細胞數(shù)目，再根據(jù)以下公式計算紅細胞總數(shù)。
紅細胞數(shù)/mm3=4個大方格總數(shù)/4×100×稀釋倍數(shù)
1.2.3 血紅蛋白測定 迅速吸取全血10ul，蒸餾水稀釋1000倍，按照試劑盒說明進行處置，于510nm光徑下測定各管OD值。
血紅蛋白（mg/ml）=126.03×（測定OD值-空白OD值）+3.5041。
1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19軟件進行數(shù)據(jù)分析處理，數(shù)據(jù)以χ±s表示。多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較方法采用LSD法，P
2 結 果
2.1 游泳力竭實驗 由表1可知，低劑量組與高劑量組小鼠的游泳力竭時間較對照空白組小鼠的游泳力竭時間明顯延長（P
2.2 黃芪多糖對小鼠紅細胞數(shù)的影響 由表1可知，實驗組小鼠的紅細胞數(shù)量均數(shù)較對照空白組小鼠的紅細胞數(shù)量有增多趨勢，但無統(tǒng)計學意義。
2.3 黃芪多糖對血紅蛋白量的影響 由表1可知，中劑量組與高劑量小鼠的血紅蛋白含量較對照空白組小鼠的血紅蛋白含量有明顯升高趨勢（P
3 討 論
疲勞的最直接和最客觀的表現(xiàn)是運動耐力的下降，而力竭游泳時間是反映運動耐力的重要指標[5]。實驗結果表明，黃芪多糖可以延長大鼠負重游泳至力竭的時間，其中以低劑量組和高劑量組最為明顯，與對照組比較有差異。實驗證明，黃芪多糖可以提高小鼠的運動持久力。
用黃芪提取的有效成分黃芪多糖（≥70%），按不同劑量給小鼠連續(xù)灌胃4周，測量小鼠血紅蛋白的含量和紅細胞數(shù)目。結果表明，灌胃黃芪多糖可增加小白鼠血紅蛋白的含量和紅細胞數(shù)目，血紅蛋白的含量有明顯升高的趨勢，以中劑量組最為明顯，因而能顯著增加小鼠每次呼吸對氧的利用程度[6]。由于黃芪多糖能增加Hb含量和紅細胞數(shù)目，而血紅蛋白是運輸O2和CO2的主要分子，血紅蛋白含量增高既有利于在劇烈運動中向肌組織提供更多的氧，加強有氧代謝供能，乳酸產(chǎn)生減少，同時加速乳酸的清除，還能及時將肌組織中產(chǎn)生的CO2轉運到肺排出，避免由于pH下降造成的肌肉疲勞。這對延緩運動性疲勞的發(fā)生和加速疲勞的消除有積極作用[7]。
有關疲勞的研究已經(jīng)不斷深入，黃芪抗疲勞作用的機制也將被全面揭示，在臨床應用等各領域也將有廣闊的發(fā)展前景。
參考文獻
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【關鍵詞】 巨幼細胞貧血；骨髓增生異常綜合征；紅細胞參數(shù)；病態(tài)巨核細胞
巨幼細胞貧血（MA）是由于維生素B12和（或）葉酸缺乏， 細胞DNA合成障礙， 導致細胞發(fā)育障礙所致的骨髓三系細胞核漿發(fā)育不平衡及無效造血性貧血。骨髓增生異常綜合征（MDS）是一組獲得性的、造血功能嚴重紊亂的造血干細胞克隆性疾病。兩者在實驗室檢查和血細胞形態(tài)學上有許多相似之處， 如均表現(xiàn)為不同程度貧血， 同時伴有血小板和（或）白細胞減少， 兩者的骨髓粒、紅、巨三系均可見病態(tài)造血等形態(tài)學改變等。為了提高對MA和MDS的診斷和鑒別診斷， 作者對遼寧省朝陽市第二醫(yī)院確診的66例MA及30例MDS的紅細胞參數(shù)和骨髓病態(tài)巨核細胞計數(shù)和分類分別作了對比觀察， 結果總結如下。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 收集本院2011年1月～2012年12月收治的66例MA患者， 其中男性35例， 女性31例， 年齡14～78歲， 中位年齡58歲， 設為MA組， 選取2009年1月～2012年12月確診的MDS患者30例， 其中男性17例， 女性13例， 年齡28～72歲， 中位年齡53歲， 設為MDS組， 全部符合MA和MDS診斷標準[1]。
1. 2 儀器和試劑 HMX全自動血細胞分析儀及其配套試劑和質控物， OLYMPUS公司雙目顯微鏡， 瑞氏姬姆薩復合染色液， EDTA-K2抗凝真空采血管。
1. 3 方法
1. 3. 1 紅細胞參數(shù)檢測 EDTA—K2真空采血管靜脈采血2 ml， BECKMAN COULTER HMX全自動血細胞分析儀在使用前用廠家提供的質控品進行校正， 嚴格按照儀器操作規(guī)程， 于2 h內對樣本進行檢測。
1. 3. 2 骨髓病態(tài)巨型細胞計數(shù)和分類 在用藥前對患者進行骨髓穿刺， 取出骨髓液常規(guī)制作骨髓涂片（血膜面積不小于1.5×2.0 cm2）， 干后經(jīng)瑞氏姬姆薩復合染色液染色， 用低倍鏡以“弓”字形依次來回不重復不遺漏計數(shù)全片病態(tài)巨核細胞， 并用高倍顯微鏡或油鏡將所有病態(tài)巨核細胞按淋巴樣小巨核細胞、單圓核巨核細胞、多圓核巨核細胞、多分葉巨核細胞以及其它畸形巨核細胞進行分類并進行形態(tài)學觀察。
1. 4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)整理和分析， 計量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 組間比較采用t檢驗， P
表2 MA與MDS病態(tài)巨核細胞檢出率及其形態(tài)類型的比較
項目 MA（n=66） MDS（n=30）
病態(tài)巨核細胞[n（%）] 30（59.2%） 20（66.6%）
淋巴樣小巨核細胞[n（%）] 0a 16（53.3%）
單圓核巨核細胞[n（%）] 11（16.8%）ab 17（56.3%）
多圓核巨核細胞[n（%）] 30（42.3%） 15（50%）
多分葉巨核細胞[n（%）] 31（48.5%） 12（40.0%）
其他畸形巨核細胞[n（%）] 10（15.2%） 5（16.6%）
注：a與MDS比較 P
2 結果
2. 1 MA與MDS紅細胞參數(shù)比較 由表1可見， MA除MCV高于MDS， 差異有統(tǒng)計學意義外（P0.05）。
2. 2 MA與MDS病態(tài)巨核細胞檢出率及其形態(tài)類型的比較由表2可見， MA病態(tài)巨核細胞陽性檢出率低于MDS， 但差異無統(tǒng)計學意義。MA與MDS主要差異為淋巴樣小巨核細胞（P
3 討論
3. 1 綜合MA和MDS紅細胞參數(shù)檢查結果， 兩者除MCV有意義增高外， 其他參數(shù)比較差異均無統(tǒng)計學意義。因此， 在大紅細胞高色素貧血的類型中， 紅細胞參數(shù)具有明顯的重疊性[2]， 雖然MCV有一定差異， 但此差異并不具有特異性， 不能作為鑒定依據(jù)， 只有結合臨床， 才具有重要參考價值。
3. 2 MA和MDS骨髓象都有異常造血的形態(tài)變化， 常會帶來兩者鑒別上的困難[3]。MDS骨髓可見各種類型病態(tài)巨核細胞， 但以淋巴樣小巨核細胞和單圓核巨核細胞為主。 MA中淋巴樣小巨核細胞未檢出， 單圓核巨核細胞明顯低于MDS， 這對于MA與MDS的診斷與鑒別診斷具有十分重要的意義。MA中， 病態(tài)巨核細胞主要為多圓核巨核細胞及多分葉巨核細胞， 是由于缺乏葉酸和（或）維生素B12引起細胞DNA合成障礙， 造成部分血細胞核腫大結果。淋巴樣小巨核細胞與單圓核巨核細胞是MDS的主要病態(tài)巨核細胞， 這兩種病態(tài)細胞的形成與巨核細胞本身不能進行胞核的復制或復制次數(shù)減少有關。單圓核巨核細胞的形態(tài)標準是：直徑>20 μm， 胞體圓形或不規(guī)則形， 胞漿較豐富， 核圓或橢圓， 核膜光滑無切跡， 核染色質粗， 可見核仁。淋巴樣小巨核細胞在惡性血液病中陽性率最高， 除偶見于良性血液病外， 都出現(xiàn)于惡性血液病， 因此， 特異性極高， 是MDS和AML病態(tài)巨核細胞的主要類型， 也是巨核細胞無效造血的主要形態(tài)學類型。淋巴樣小巨核分化極差， 倍體數(shù)較低， 其形態(tài)特征主要為：大小、外觀與成熟淋巴細胞相似， 核漿比大， 核圓形或凹陷， 染色質致密粗糙， 結構模糊， 無核仁或偶見1～2個模糊的小核仁， 胞漿強嗜堿， 不透明而呈云霧狀， 周邊不整齊或有泡狀突起， 可有血小板形成現(xiàn)象。由于淋巴樣小巨核細胞光學顯微鏡下查找相對較為困難， 必要時要借助小巨核酶標或流式細胞儀進行免疫表型檢測， 以提高其檢出率。
綜上所述， MCV只能作為MA與MDS的輔助篩查指標， 淋巴樣小巨核與單圓核巨核細胞的檢出是MA與MDS等其他惡性血液病臨床診斷與鑒別診斷的重要依據(jù)之一， 同時對判斷疾病的預后也有一定的臨床意義。
參考文獻
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為探討環(huán)狀紅細胞(RBC)對UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測尿RBC的影響以及儀器相關參數(shù)的變化，采用UF-100尿沉渣分析儀、US-2100R尿干化學儀對隨機留取新鮮尿液檢測后離心作顯微鏡檢查，對RBC平均熒光強度(RBC-MFI)、RBC熒光強度分布寬度(RBC-FI-DWSD)這兩種相關參數(shù)進行研究。結果，UF-100檢測血尿的結果受環(huán)狀RBC的影響，當RBC-MFI、RBC-FI-DWSD降低到某一閾值(＜18ch)，會產(chǎn)生假陰性結果。認為環(huán)狀RBC可以使UF-100檢測血尿結果產(chǎn)生假陰性；顯微鏡檢查可彌補UF-100的這一檢測盲區(qū)，有必要根據(jù)顯示的相關參數(shù)選擇顯微鏡進行鏡檢校正。
【關鍵詞】 尿分析；血尿；RBC計數(shù)
血尿是某些疾病病理變化的初始信號，因此無癥狀血尿的檢測對疾病的早期診斷顯得十分重要。目前臨床主要采用干化學法、UF-100尿沉渣聯(lián)合分析的方法對尿液進行篩選，然后進行顯微鏡檢查，而在實踐中發(fā)現(xiàn)，當尿液中存在環(huán)狀紅細胞(RBC)時，干化學法與UF-100尿沉渣分析法的檢查結果往往不一致，為進一步提高檢驗質量，用US-2100R干化學儀、UF-100全自動尿沉渣分析儀、顯微鏡三者交叉互檢觀察潛血、RBC計數(shù)、RBC-MFI、RBC-FI-DWSD等相關指標，通過對這些指標的研究，提高尿液檢測的準確性。
1 資料與方法
1.1 標本來源
用一次性尿杯留取701例住院患者的新鮮晨尿標本。
1.2 儀器和試劑
UF-100全自動尿沉渣分析儀及配套試劑(日本Sysmex公司生產(chǎn))，US-2100R尿干化學分析儀及配套試紙條(日本Sysmex公司生產(chǎn))，Olympus相差顯微鏡。
1．3 方法
1．3．1 儀器法
先用UF-100作尿沉渣分析，然后用US-2100R作干化學分析。
1．3．2 顯微鏡法
根據(jù)尿沉渣和干化學分析結果，選取干化學分析潛血試驗陽性的尿樣并根據(jù)尿沉渣紅細胞計數(shù)＜25個/μL和紅細胞計數(shù)＞25個/μL將這些患者的剩余尿液分為兩組，再按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》以1500r/min離心5min，留取0.2mL沉渣混勻涂片鏡檢，根據(jù)鏡檢結果將潛血陽性、RBC計數(shù)＜25個/μL且含環(huán)狀RBC的尿液設為環(huán)狀RBC血尿I組；將潛血陽性、RBC計數(shù)＞25個/μL且鏡下所見RBC形態(tài)正常的血尿設為正常RBC血尿組；將潛血陽性、RBC計數(shù)＞25個/μL且鏡下未見環(huán)狀RBC的混和型血尿設為混合血尿組；將潛血陽性、RBC計數(shù)＞25個/μL且經(jīng)鏡檢確認以大量環(huán)狀RBC為主的血尿設為環(huán)狀RBC血尿II組，環(huán)狀RBC血尿I組和環(huán)狀RBC血尿II組視為環(huán)狀RBC血尿組。UF—100檢測尿沉渣與鏡檢之間以雙盲方式判讀。標本不染色，不作防腐及其他處理，尿樣所有實驗均在2h內完成。每天用Sysmex公司提供的尿沉渣質控物進行質控。
1.4 統(tǒng)計學方法
組間比較用兩樣本的均數(shù)t檢驗。
2 結果
2.1 潛血呈陽性標本鏡檢結果
382例干化學測定潛血呈陽性，且UF-100檢測RBC＜25個/μL者63例，經(jīng)顯微鏡檢查含環(huán)狀RBC者有48例(環(huán)狀紅細胞血尿I組，假陰性)，15例鏡下未見RBC。潛血陽性并且UF-100檢測RBC＞25個/μL者319例，其中22例含環(huán)狀RBC(環(huán)狀紅細胞血尿II組)，剩余297例為無環(huán)狀RBC血尿(124例為正常形態(tài)RBC血尿，173例為混合型RBC血尿組)。
2.2 正常形態(tài)RBC血尿、環(huán)狀RBC血尿和混合血尿相關參數(shù)的比較結果，見表1。表1 正常形態(tài)RBC血尿、環(huán)狀RBC血尿和混合血尿相關參數(shù)的比較（略）
3 討論
環(huán)狀RBC又稱面包圈樣RBC，因血紅蛋白大量丟失或胞漿向四周集中形成，多見于腎小球腎炎和燒傷病人。當血尿中無環(huán)狀RBC時，基本不會出現(xiàn)假陰性誤報；血尿中含有環(huán)狀RBC時，會出現(xiàn)假陰性誤報，可能由于環(huán)狀RBC所含的血紅蛋白量不同，對熒光染料的親和力也就不同，當血紅蛋白低到一定程度，其對熒光染料著色減弱或幾乎不著色，當與熒光染料結合后的熒光強度弱到不足以被儀器檢測到時，其BC-MFI、BC-FL-DWSD為低于18ch，會出現(xiàn)紅細胞計數(shù)錯誤，產(chǎn)生誤報［1］。本文RBC形態(tài)正常的血尿BC-MFI為(20.5±2.07)ch，BC-FL-DWSD為(18.82±1.58)ch；環(huán)狀RBC BC-MFI為(14.90±1.47)ch，BC-FL-DWSD為(15.26±1.79)ch。當標本為無環(huán)狀RBC的血尿時，UF-100顯示的相關參數(shù)RBC-MFI、RBC-FI-DWSD均大于18ch；而當標本為含有環(huán)狀RBC血尿時，無論UF-100分析結果大于或小于25個/μL，其相關參數(shù)均低于18ch。因此，要注意尿沉渣中環(huán)狀RBC對結果影響，潛血陽性時用UF-100檢測RBC＜25個/μL，RBC BC-MFI＜18ch或RBC BC-FL-DWSD＜18ch時，務必離心鏡檢，以達到提高尿液標本檢驗質量的目的。此外，尿路感染時某些細菌產(chǎn)生過氧化酶可致尿干化學假陽性，也應加以注意［2］。
參考文獻
[摘要] 目的 探討塌漬照射法對肝硬化腹水患者血清腹水白蛋白梯度（SAAG）、血小板參數(shù)及紅細胞參數(shù)的影響。 方法 選取2011年10月～2012年5月60例肝硬化腹水患者為研究對象，將其隨機分為對照組（常規(guī)治療組）和觀察組（塌漬照射法組），每組各30例；對照組給予常規(guī)治療，觀察組在常規(guī)治療基礎上給予塌漬照射法治療，對兩組患者治療前及治療后5、10、20 d的SAAG、血小板參數(shù)及紅細胞參數(shù)水平進行比較。 結果 治療后5、10、20 d觀察組SAAG值和≥11 g/L者比例均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P < 0.05）；治療后5、10、20 d觀察組血小板計數(shù)（PLT）、血小板壓積（PCT）、平均血小板體積（MPV）及血小板分布寬度（PDW）均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P < 0.05）；治療后5、10、20 d觀察組平均紅細胞血紅蛋白（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞體積分布寬度（RDW）及平均紅細胞容積（MCV）均低于對照組，血細胞比容（HCT）高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P < 0.05）。 結論 塌漬照射法在改善肝硬化腹水患者SAAG、血小板參數(shù)及紅細胞參數(shù)方面的效果較佳，對于改善患者的疾病狀態(tài)發(fā)揮著積極的臨床作用。
[關鍵詞] 塌漬照射法；肝硬化腹水；血清腹水白蛋白梯度；血小板參數(shù)；紅細胞參數(shù)
[中圖分類號] R657.31 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2013）02（c）-0004-03
肝硬化腹水是由于肝臟疾病導致肝臟反復炎癥，纖維化及肝硬化形成后由于多種病理因素引起的腹腔內積液，其在發(fā)生發(fā)展的過程中機體較多指標隨之波動，臨床認為血清腹水白蛋白梯度（SAAG）是較為有效地反映疾病狀態(tài)及嚴重程度的有效指標[1]，另外較多血液指標也有較高的臨床檢測價值，對于監(jiān)測疾病的發(fā)展轉歸有較高的臨床價值[2]。本文采用塌漬照射法對肝硬化腹水患者SAAG、血小板參數(shù)及紅細胞參數(shù)的影響進行研究，以了解其在本病治療中的應用價值，現(xiàn)將結果分析如下：
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2011年10月～2012年5月治療的60例肝硬化腹水患者為研究對象，將其隨機分為對照組（常規(guī)治療）和觀察組（常規(guī)治療+塌漬照射法治療），每組各30例。對照組的30例患者中，男19例，女11例；年齡39～69歲，平均（48.7±4.3）歲；病程5.5～42.5個月，平均（12.7±2.1）個月；乙肝后肝硬化腹水21例，酒精性肝硬化腹水9例。觀察組的30例患者中，男20例，女10例；年齡39～68歲，平均（48.8±4.1）歲；病程6.0～43.0個月，平均（12.8±1.9）個月；其中乙肝后肝硬化腹水22例，酒精性肝硬化腹水8例。兩組患者的年齡、性別構成、病程及種類構成等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，兩組患者均簽署知情同意書。
1.2 方法
1.2.1 治療方法 兩組患者均進行常規(guī)治療，主要為給予患者低鹽高蛋白飲食，并給予復方氨基酸15AA注射液250 mL/次，1次/d，靜脈滴注，螺內酯片100 mg口服，2次/d，呋塞米片40 mg口服，1次/d。對照組在此基礎上以面粉10 g加食用色素10 g溫水調成糊狀，進行備用。觀察組則以大腹皮、車前子、桑白皮、茯苓、豬苓各15 g，丹紅、桃仁、紅花及赤芍各5 g，將其研成細末，以蜂蜜食醋調成糊狀，再加入桂氮唑酮透皮促進劑。兩組均以制成藥膏紗布，囑患者排尿平臥后，將藥膏紗布置于臍中央的神闕穴，以CQ-B電磁波治療器置于神闕穴上方大約30 cm處，20 min/次，連續(xù)治療20 d。后將兩組患者治療前及治療后5、10、20 d的SAAG值、血小板參數(shù)及紅細胞參數(shù)水平進行比較。
1.2.2 檢測方法 取患者治療前1、5、10、20 d的晨起空腹外周靜脈血5.0 mL及腹水送檢，其中SAAG采用M305593全自動生化分析儀進行檢測，統(tǒng)計其≥11 g/L者比例；血小板參數(shù)及紅細胞參數(shù)則采用XFA6000Intelligent智能化全自動血液細胞分析儀進行檢測，其中血小板參數(shù)檢測項目包括血小板計數(shù)（PLT）、血小板壓積（PCT）、平均血小板體積（MPV）及血小板分布寬度（PDW），紅細胞參數(shù)檢測項目包括平均紅細胞血紅蛋白（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞體積分布寬度（RDW）、紅細胞壓積（HCT）及平均紅細胞容積（MCV），后將統(tǒng)計結果進行分析及比較。
1.3 統(tǒng)計學方法
采用統(tǒng)計軟件SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
2.1 兩組患者治療前及治療后5、10、20 d的SAAG情況比較
兩組患者治療前SAAG水平和≥11 g/L者比例比較，差異均無統(tǒng)計學意義（均P >0.05），而治療后5、10、20 d觀察組均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P < 0.05）。見表1。
2.2 兩組患者治療前及治療后5、10、20 d血小板參數(shù)比較
治療前兩組患者的PLT、PCT、MPV及PDW比較，差異均無統(tǒng)計學意義（均P > 0.05），而治療后5、10、20 d觀察組均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P < 0.05）。見表2。
2.3 兩組患者治療前及治療后5、10、20 d紅細胞參數(shù)比較
治療前兩組患者的MCH、MCHC、RDW、HCT及MCV比較，差異均無統(tǒng)計學意義（均P >0.05），而治療后5、10、20 d觀察組MCH、MCHC、RDW及MCV均低于對照組，HCT高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P < 0.05）。見表3。
論文關鍵詞 福田紅樹林;功能;資源保護;生態(tài)系統(tǒng);廣東深圳
論文摘要 紅樹林是具有獨特結構與功能的生態(tài)系統(tǒng)，在各方面發(fā)揮著重要的功能。福田紅樹林自然保護區(qū)是深圳市得天獨厚的一塊生態(tài)資源寶地，對其基本狀況、環(huán)境變化及其資源保護進行探討與分析得出，為了維護紅樹林濕地的生態(tài)平衡，保護寶貴的生態(tài)資源，必須做到開發(fā)建設與生態(tài)保護的有機結合。
紅樹林是熱帶、亞熱帶濱海泥灘上特有的常綠灌木或喬木的植物群落，其大部分樹種屬于紅樹科，生態(tài)學上統(tǒng)稱為紅樹林?！凹t樹”的名稱主要來源于紅樹科植物，由于這些植物多富含丹寧，樹皮韌皮部和木材顯紅褐色而得名。紅樹林的根系十分發(fā)達，從樹干或枝干各部位呈放射狀，懸垂向下插入軟泥中，形成一個穩(wěn)固的支架，使紅樹林在沿海灘涂中固定下來。紅樹林的葉子具有脫鹽的功能，能將多余的鹽分排除體外，使紅樹林能適應在鹽分較多的海潮中生存。
1紅樹林的功能
紅樹林全身是寶，按人類對紅樹林濕地的利用現(xiàn)狀，可把紅樹林濕地的功能分為物質生產(chǎn)功能、景觀美學功能和環(huán)境生態(tài)功能。
1.1物質生產(chǎn)功能
所謂的物質生產(chǎn)功能其實就是指紅樹林濕地的經(jīng)濟價值。實際上，紅樹林的經(jīng)濟價值是不可忽視的。大多數(shù)種類的紅樹植物樹皮含有豐富的丹寧，可用做染料和提煉栲膠，是制革、墨水、電工器材、照相材料、醫(yī)療制劑的原料;木材紋理細微，顏色鮮艷美觀，抗蟲蛀，易加工，可供為建材、柱材、家具用材及薪炭材;紅樹四季開花，果實豐碩，果實富含淀粉，是釀造啤酒的重要原料;紅樹林內的海鮮比海灘的更肥美，而且無污染，故在紅樹林下進行合理的海產(chǎn)養(yǎng)殖具有很高的經(jīng)濟效益;同時如果能充分利用紅樹林的枯枝落葉作為食物來源還可以節(jié)省飼養(yǎng)成本。
1.2景觀美學功能
景觀美學功能則側重于紅樹林濕地的旅游功能的開發(fā)。紅樹林是重要的旅游資源，素有“海上森林”之稱，為熱帶海岸獨有的地理景觀，與其他海岸風光比較具有截然不同的別致風情。另外，紅樹林濕地生物多樣，景觀亦多樣，潮漲潮落，紅樹林濕地展示不同的色彩美與動態(tài)美，鳥類在其間飛翔與棲息。其旅游功能主要體現(xiàn)在新、奇、曠、野等特點上。紅樹林的旅游功能有助于把紅樹林濕地內從事水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、加工業(yè)、林業(yè)等人員轉化安置為保護和管理濕地的工作人員，減輕人類對紅樹林濕地的開發(fā)、利用、污染、破壞的壓力。
1.3環(huán)境生態(tài)功能
紅樹林濕地在維護海岸帶水生生物物種多樣性方面具有舉足輕重的作用。國內外的大量研究表明，與其他生態(tài)系統(tǒng)相比，紅樹林濕地生態(tài)系統(tǒng)中的動植物種類更加豐富，水生生物的物種多樣性遠遠高于其他海岸帶水域生態(tài)系統(tǒng)。紅樹林內部產(chǎn)生的凋落物不僅為近海海洋動物提供了豐富的餌食，而且經(jīng)微生物分解后又變成紅樹林植物的營養(yǎng)物質，促進紅樹林群落的良性發(fā)展;再加上河口、海灣近岸富含營養(yǎng)的水體，為大量的藻類、無脊椎海洋動物和魚類等提供了理想的生境。
紅樹林還是海洋鳥類最理想的天然棲息地，凡紅樹林分布的區(qū)域，均保持了較高的鳥類種群和其他生物物種的多樣性。尤其對于候鳥，紅樹林廣闊的灘涂和豐富的底棲動物為遷徙鳥類提供了落腳歇息、覓食、恢復體力的一切優(yōu)厚條件。
另外，紅樹植物能產(chǎn)生胎生幼苗，它們從母樹上脫落下來，在紅樹林帶的前沿定植生長、成熟，胎生苗再定植，逐漸擴大林區(qū)的面積;紅樹植物的根系不斷向海延伸，淤泥不斷增加，土壤逐漸形成，使沼澤不斷升高，于是林區(qū)的土壤逐漸變干，土質變淡，最終成為陸地。紅樹林所具備的這一使滄海變陸地的生態(tài)功能，使人類從難以抵御全球溫室效應帶來的海平面上升和海水吞噬陸地的困惑中看到了希望。
紅樹林濕地又被譽為“地球之腎”，其在凈化水源、保護環(huán)境中的作用非常大。紅樹植物抗污染機制是多方面的，其中很重要的一個方面就是其體內富含丹寧，使得紅樹林在較嚴重污染的環(huán)境下仍能生存。當紅樹吸收重金屬離子后，體內大量的丹寧分子能與其發(fā)生化學反應，使其失去毒性。紅樹林生態(tài)系統(tǒng)是一個紅樹林-細菌-藻類-浮游動物-魚類等生物群落構成的兼有厭氧-需氧的多級凈化系統(tǒng)，紅樹林通過吸附沉降、植物的吸收等作用降解和轉化污染物從而使水體質量得到改善;而林下的多種微生物能分解林內污水中的有機物和吸收有毒的重金屬，釋放出來的營養(yǎng)物質可供給紅樹林生態(tài)系統(tǒng)內的各種生物，從而起到凈化環(huán)境的作用。
2福田紅樹林保護區(qū)基本狀況
深圳福田紅樹林自然保護區(qū)，位于東經(jīng)113°45′，北緯22°32′，地處深圳灣東北岸，茂密的紅樹林東起深圳河口，西至車公廟，呈帶狀分布，長約9km，直線距離約為7km。1984年4月29日廣東省批準由深圳市創(chuàng)建，1988年5月晉升為國家級自然保護區(qū)，成為全國5個國家級紅樹林自然保護區(qū)之一;1993年加入我國人與生物圈保護區(qū)網(wǎng)絡，成為全國唯一加入該網(wǎng)絡的紅樹林自然保護區(qū)。經(jīng)1986年、1989年和1997年先后3次對保護區(qū)進行紅線范圍界定，最后確定為現(xiàn)在的紅線范圍，面積為367.64hm2，其中陸域面積139.92 hm2，灘涂面積227.72hm2。
福田紅樹林保護區(qū)是我國惟一地處城市腹地的國家級自然保護區(qū)，這里是重要的國際候鳥停歇站，每年有100多種10萬只以上從西伯利亞至澳大利亞南北遷徙的候鳥在此停歇或過冬。此外，位于南亞熱帶海岸水陸交錯地帶的這一紅樹林濕地生態(tài)系統(tǒng)具有極高的生物多樣性，該保護區(qū)有高等植物41科98種，其中紅樹林植物12科22種，鳥類18目44科189 種，列入我國重點保護的鳥類有23種。兩棲爬行動物31種，哺乳動物15種，大型底棲動物86種，昆蟲96種，藻類117種。因此，福田紅樹林保護區(qū)在全球生態(tài)系統(tǒng)中占有重要位置，被世界自然保護聯(lián)盟列為國際重點保護區(qū)。
3福田紅樹林生態(tài)環(huán)境的變化
深圳經(jīng)濟特區(qū)經(jīng)過20多年的建設發(fā)展，已成為一座高度人工化的現(xiàn)代化城市。伴隨著城市的開發(fā)建設和人口的急劇增長，福田紅樹林及其周邊生態(tài)環(huán)境發(fā)生了巨大變化。主要表現(xiàn)在:①人樹相爭，保護區(qū)面積不斷縮小;②生境景觀發(fā)生巨大變化;③水體受到嚴重污染;④紅樹林遭受嚴重破壞;⑤鳥類數(shù)量減少，生境惡化;⑥物種減少，生物多樣性受到威脅。
4福田紅樹林資源保護對策
紅樹林生態(tài)環(huán)境的變化及其對紅樹林生態(tài)系統(tǒng)的影響已引起社會各界的關注，深圳的開發(fā)建設不能以犧牲環(huán)境為代價。要保護福田紅樹林濕地的生態(tài)資源，保持生物多樣性，就要保護這些生物賴以生存的生態(tài)環(huán)境。主要采取以下措施:①引種造林，創(chuàng)造多樣生境，擴大生態(tài)空間;②對水污染進行控制;③科學規(guī)劃，依法管理。規(guī)劃是保護工作的基礎和依據(jù)，保護區(qū)規(guī)劃必須解決好自然保護與城市開發(fā)的關系，解決好保護與資源合理利用的關系。新的保護區(qū)規(guī)劃劃定了保護區(qū)的核心區(qū)(占總面積46.0%)、緩沖區(qū)(占13.8%)、實驗區(qū)(占38.7%)和行政管理區(qū)(占1.5%)范圍;在生態(tài)環(huán)境設計中，對各種生境進行了合理分布，體現(xiàn)了生態(tài)效益、經(jīng)濟效益和社會效益的三統(tǒng)一。
另外，福田紅樹林保護區(qū)地處城市腹地，緊靠城市生活區(qū)。因此，建議深圳市有關部門對該保護區(qū)必須加大管理力度，充分搞好協(xié)調合作，制定專門法律和規(guī)章，依法管理;或對保護區(qū)實行封閉或半封閉的管理， 避免和減少人類活動對紅樹林整個生態(tài)環(huán)境及其中生物的干擾，以實現(xiàn)紅樹林濕地生態(tài)保護的的科學化、法制化、規(guī)范化，確保保護區(qū)規(guī)劃的執(zhí)行和實現(xiàn)。
參考文獻
[1] 王如心.紅樹林的生態(tài)功能與可持續(xù)利用[J].海洋環(huán)保，2001(3):71-73.
[2] 謝瑞紅，周兆德. 紅樹林生態(tài)系統(tǒng)及功能研究綜述[J].華南熱帶農(nóng)業(yè)大學學報，2005(4):48-52.
[3] 莫竹承，范航清.紅樹林生態(tài)防護功能研究[J].南海研究與開發(fā)，2000(1):33.
[關鍵詞] 新生兒；紅細胞；血紅蛋白；疾病
中圖分類號：R457 文獻標識碼：B 文章編號：2055-5200（2014）02-079-04
輸血是臨床醫(yī)療工作中非常重要的治療措施，也是搶救和治療新生兒和某些疾病的一種特殊、基本手段。及時、合理的血液輸入可延長或挽救一些垂危生命，有著藥物不可替代的作用，輸血效果較為肯定，但不是輸注后都能達到臨床效果和預期臨床期望值，應注意疾病本身對輸血效果的影響，及時檢測Hb，避免盲目輸注，既浪費血液資源又擔當輸血風險甚至擔誤病情。本研究對新生兒疾病對輸血效果的影響進行研究，報告如下。
1 資料和方法
1.1 一般資料
本院2011年1～9月住院日齡一個月內輸注懸浮紅細胞并于輸注后24h內檢測Hb值的新生兒共160人次（不含術中輸血及出血性疾病患兒）。男101例，女59例。伴敗血病貧血病例24例，伴肺炎貧血病例28例，ABO溶血病28例，單純新生兒貧血72例，血小板減少性紫癜，雙胎輸血綜合征，缺血缺氧性腦病，肺透等其它疾病共8例
1.2 試劑及儀器
抗-A、抗-B，抗-D，ABO標準紅細胞、抗篩Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型細胞等由上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司生產(chǎn)；低離子/抗人球蛋白卡、孵育器及卡式離心機、由達亞美公司生產(chǎn)；久保田配血專用離心機。貝克曼全自動分析儀及其配套試劑檢測Hb值。
1.3 方法
1.3.1 分組 按疾病主要診斷分為敗血病組，肺炎組，ABO溶血病組，單純新生兒貧血病組共152例，其他病種因病例少，本文不討論。
1.3.2 配血及相關的血液檢測 采用EDTA（乙二胺四乙酸）24h內抗凝靜脈血進行血型鑒定（鹽水試管法或微柱凝膠法）、抗體篩選（微柱凝膠法）、配血（鹽水試管法和達亞美微柱凝膠法）。 實驗操作均嚴格按試劑說明書和《臨床輸血技術規(guī)范》操作。
1.3.3 血液選擇及輸注 同型配血主、次側無凝集、無溶血相合者或次側有凝集時，再做直接抗人球蛋白試驗，選用較其直接抗人球蛋白試驗凝集弱的血液進行輸注；ABO溶血病患者選用同型配血相合紅細胞或選用‘O’型紅細胞配血主側無凝集無溶血相合者，其他同型配血主側凝集時選用‘O’型紅細胞配血主側無凝集無溶血相合者。劑量按20mL/kg，血液離開儲存冰箱0.5h內輸注。輸前輕搖血袋使血液均勻后用注射器抽取所需的血液，接上專用輸血管，用輸液泵泵進，速度為0.25-0.75mL/min。
1.3.4 觀察指標 新生兒輸注紅細胞后在24h檢測Hb值，Hb值大于輸血前的為上升，小于或等于的為紅細胞輸注無效。檢測Hb值允許誤差為3%-4%。
1.4 統(tǒng)計學處理
PEMS 3.1軟件包兩樣品均數(shù)及兩樣品率兩兩比較，P
2 結果
所有患兒鹽水和微柱凝膠法交叉配血相合，抗體篩選陰性，輸注紅細胞后無輸血不良反應。輸血后24h內檢測Hb，結果152例患兒輸血后Hb均值111.0329±20.7557，較輸血前Hb均值97.2105±18.5232提高14.22%，P
3 討論
新生兒輸血有許多獨特性，如新生兒各器官發(fā)育不成熟，不能耐受過多的液體，對缺氧敏感，不能耐受冷，機體調節(jié)能力差，因此新生兒輸血應嚴格掌握臨床輸血指征。目前新生兒需要輸血指征為 [1]：（1）新生兒出生24 h內靜脈血Hb
本組病例輸血前Hb均值為97.2105±18.5232，并有相應貧血癥狀出現(xiàn)，符合上述臨床輸血指征。多數(shù)（107/152）患兒輸注紅細胞后Hb值得到不同程度提高，平均提升27.47g/L，較張長虹等[2]報道的平均提升35.56g/L低。敗血病、ABO溶血病，肺炎等均可不同情度影響紅細胞輸注效果，以敗血病、ABO溶血病影響較大，肺炎較小。嚴重感染，由于毒素的作用紅細胞被破壞[3]，肝脾腫大，血液重新分配，故敗血病組輸血后Hb上升不理想或反降；ABO溶血病組Hb升幅較小，可能與患兒從母體帶來的血型抗體有關，血型抗體繼續(xù)破壞紅細胞，使Hb升幅不理想。紅細胞輸注無效率比較，以敗血病組最高。文獻報道：輸血次數(shù)達到6次以上者，其抗體產(chǎn)生率高達87.9%[4]，紅細胞無效輸注率為50%[5]，敗血病紅細胞輸注無效與輸血次數(shù)無關，本文敗血病無效輸血共13例，10例第一次輸血即發(fā)生無效輸血，也說明敗血病可影響紅細胞輸注效果。這與文獻報道相符。但是新生兒紅細胞抗原點位少（為成人1/4）早產(chǎn)兒更少，其產(chǎn)生抗體相對也少，不易檢測，本人在實踐工作中，新生兒多次輸血甚至10次以上，但很少發(fā)現(xiàn)因輸血次數(shù)多而檢出抗體陽性的病例，即使是主次側配血不合，抗體篩選也是陰性，很少因為配血不合[6]抗篩陽性，新生兒配血不合，最多出現(xiàn)的是次側不合且多是用微柱凝膠技術才能發(fā)現(xiàn)。因此新生兒輸注紅細胞出現(xiàn)免疫破壞也不易被發(fā)現(xiàn)。本文輸注紅細胞后Hb不升的病例輸血前Hb均值（121.4±33.4361）較上升病例（92.2523±14.5486）高，輸血后反而下降，說明輸入的紅細胞破壞迅速，自身的紅細胞也加速破壞。劉凌等[7]報道，無效組與有效組輸血后，兩組均無輸血不良反應，但輸血后間接膽紅素兩組相比無效組明顯增高，也說明輸入的紅細胞或自身的紅細胞破壞明顯。
紅細胞主要功能是攜帶氧、釋放氧和運輸二氧化碳，以供機體需要，因此輸注紅細胞主要是利用其Hb攜氧，如果輸注紅細胞后循環(huán)血液中Hb值得不到提高，輸血就達不到目的。文獻報道輸注紅細胞無效見于各科，占總用血量14.10%[5]～15.47 %[8]，較本文病例低（30.63%）。劉金菊[9]、夏榮[10]報道紅細胞輸注無效多與多次輸血、患有自身免疫系統(tǒng)疾病及紅細胞制品的貯存時間長等因素相關，鄭萍等[11]報道紅細胞輸注效果與患兒有無輸血反應、輸血次數(shù)、既往輸血量有密切關系，特別是有輸血反應史、輸血次數(shù)≥3次、既往輸血量≥8U的無效輸注病例明顯高于其他組別。經(jīng)常合并有感染發(fā)熱肝睥腫大，需要使用抗生素或進行造血肝細胞移植，紅細胞無效輸注的發(fā)生率更高，這與本文嚴重感染性病例敗血病相符，敗血病患兒多有發(fā)熱，應用抗生素；呂運來等[12-13]報道輸血無效與輸血次數(shù)、原發(fā)病癥以及妊娠次數(shù)有關，其中兒科輸注無效達36.4%，本文紅細胞輸注無效病例見于肺炎、敗血病、單純新生兒貧血病、血小板減少性紫癜，雙胎輸血綜合征，缺血缺氧性腦病，肺透等多個病種，雖然樣本量小，無法進行統(tǒng)計學分析，但紅細胞輸注無效或效果欠佳確實存在。
綜上所述影響紅細胞輸注效果有多種原因，如疾病、妊娠次數(shù)、輸血次數(shù)、輸血不良反應、抗篩陽性、紅細胞貯存時間、感染等都可影響紅細胞輸注效果。本文影響紅細胞輸注效果主要是敗血病、ABO溶血病。因此新生兒貧血伴敗血病及ABO溶血病輸注紅細胞時更應注意檢測Hb，及時調整治療方案，以提高治療效果。
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【摘要】
摘要：目的研究芎湯不同提取部位對小鼠急性心肌缺血的保護作用。方法分別制備芎湯乙醇提取液過大孔吸附樹脂柱的20%，40%，60%，95%乙醇洗脫部位（EE20，EE40，EE60，EE95部位）。用腹腔注射異丙腎上腺素造成小鼠急性心肌缺血模型，觀察不同洗脫部位對心電圖、紅細胞膜流動性的影響。 結果EE20，EE40，EE60部位對異丙腎上腺素引起的心肌損傷小鼠，可拮抗S-T段異常變化；EE20，EE40部位可顯著性降低熒光探劑DPH標記的小鼠紅細胞膜熒光偏振度，增強紅細胞膜流動性。 結論芎湯EE20和EE40部位對實驗性心肌缺血有明顯的保護作用。
【關鍵詞】 芎湯 急性心肌缺血 心電圖 紅細胞膜流動性
Abstract：ObjectiveTo explore the protective effect on acute experimental ischemic myocardium in mice by different elutes from macroporous resin for separation of Xiongqiong decoction. MethodsThe ethanol extract from Xiongqiong Decoction was obtained firstly. Then 20， 40， 60 and 95 percent ethanol elute (EE20， EE40， EE60 and EE95) were prepared by using the column stuffed with absorbent macroporous resin. Acute myocardial ischemic model induced by intraperitoneal administration of isoproteronol (ISO) in mice was adopted to observe the effects of the different elutes on the electrocardiogram and the membrane fluidity of erythrocytes. ResultsCompared with the model group， EE40 and EE60 could reduce the elevation of ST segment induced by ISO. EE20 and EE40 could decrease the fluorescence polarization which demonstrated the effect of increasing the cell membrane fluidity in the inactive state. ConclusionThe extracts of EE20 and EE40 have protective effect against ISO-induced acute myocardial ischemia in mice.
Key words： Xiongqiong decoction; Acute myocardial ischemia;
Eelectrocardiogram; Membrane fluidity of akaryocyte
中藥復方芎湯出自《千金方》，由當歸Angelica sinensis (Oliv.) Diels.和川芎Ligusticum chuanxiong Hort.等份組成，具有養(yǎng)榮活血的功效?，F(xiàn)代藥理研究證明，川芎、當歸可以抗血栓形成，抑制血管平滑肌細胞增生，顯著增加腦血液流動性，保護、減輕腦缺血造成的腦部病理損害，緩解由此引起的行為障礙［1～3］。本課題采用大孔吸附樹脂柱對芎湯乙醇提取物分離純化，制備不同濃度乙醇洗脫部位，考察其對急性心肌缺血小鼠心電圖及紅細胞膜流動性的影響，評價芎湯不同提取部位在活血方面的活性。
1 儀器與試藥
1.1 動物昆明種小鼠，SPF級，體質量18～22 g，雌雄各半，購于山東中醫(yī)藥大學實驗動物中心，許可證號SCXK（魯）20070004。
1.2 儀器BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng)（成都泰盟），RF-540型熒光分光光度計（日本島津公司）；RE-52C型旋轉蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。
1.3 藥材和試劑當歸、川芎藥材（購自濟南市建聯(lián)藥店）；大孔吸附樹脂HP20（日本三菱化學公司）；鹽酸異丙腎上腺素（Isoproterenol， ISO）注射液（上海禾豐制藥有限公司，批號6E20003，規(guī)格0.5 mg·ml-1）；熒光探劑DPH(1，6-二苯基-1，3，5-己三烯；Sigma公司，批號109F3518)；PBS磷酸鹽緩沖溶液（北京中杉金橋生物技術有限公司，批號ZLI-9062）；生理鹽水（山東長富潔晶藥業(yè)有限公司）；戊巴比妥鈉（中國醫(yī)藥集團上海化學試劑公司，批號F20021216）；肝素鈉注射液（江蘇萬邦生化醫(yī)藥股份有限公司，批號0512104）。
2 方法與結果
2.1 芎湯大孔樹脂柱洗脫物灌胃溶液的制備當歸、川芎藥材粉碎，過20目篩，分別取500g，混合，加12倍量70%的乙醇回流提取3次，1.5h/次，合并提取液，回收乙醇，濃縮至2 000 ml。以1∶3的比例（藥材質量與樹脂體積比）過HP20大孔樹脂柱，分別用10倍量的水、20%，40%，60%和95%的乙醇洗脫，收集不同濃度的醇洗脫部位，減壓回收乙醇，濃縮至每毫升溶液相當于1 g當歸、川芎的生藥量。分別取各醇洗脫部位提取液200 ml，水浴60℃濃縮至近干，加少許吐溫80使成混懸液，轉移至50ml量瓶中，加水定容至刻度（分別簡稱EE20，EE40，EE60和EE95）。
2.2 鹽酸異丙腎上腺素劑量的選擇取36只小鼠，隨機分為4組，每組9只，分別為空白對照組及腹腔注射異丙腎上腺素4 ml·kg-1組，6 ml·kg-1組和8 ml·kg-1組。給小鼠稱重，0.05%戊巴比妥鈉（8 ml·kg-1）麻醉，用BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng)分別記錄空白對照組和腹腔注射鹽酸異丙腎上腺素不同劑量組的小鼠S-T段在30 s、1，5，10，20 min的偏移值，從預試結果來看，注射鹽酸異丙腎上腺素6 ml·kg-1的劑量在5，10，20 min時間點有顯著性差異，注射8 ml·kg-1的劑量雖然也有顯著性差異，但容易導致小鼠死亡，故選擇鹽酸異丙腎上腺素的劑量為小鼠體重注射6 ml/kg，連續(xù)注射2 d，監(jiān)測的時間點為5，10，20 min。
2.3 對異丙腎上腺素致小鼠急性心肌缺血心電圖的影響
2.3.1 分組及給藥實驗前在麻醉下記錄小鼠正常心電圖1次，對心電圖異常者予以剔除。用于實驗的小鼠隨機分為6組，每組10只，各組分別為空白組，模型對照組，EE20組，EE40組，EE60組，EE95組。空白組和模型對照組均給蒸餾水，剩余組均給予藥30 ml·kg -1，連續(xù)給藥9 d。
2.3.2 造模及指標檢測空白組在給藥的第8，9天腹腔注射生理鹽水6 ml·kg-1，其余組分別在給藥的第8，9天注射異丙腎上腺素6 ml·kg-1，在注射之前用0.05%的戊巴比妥鈉對小鼠進行麻醉，并記錄肢體ECGⅡ導聯(lián)心電圖1次，末次注射異丙腎上腺素之后在麻醉狀態(tài)下即刻記錄5，10，20 min的肢體ECGⅡ導聯(lián)心電圖，測量S-T段的偏移值（即S-T）。
數(shù)據(jù)采用SPSS 11.0版統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，多組間比較用方差分析和p-LSD(最小顯著差)法檢驗。以P
由表1可見，空白對照組與模型對照組在不同時間點相比均有非常顯著性差異（P
2.4 對紅細胞膜流動性的影響在“2.3”項實驗完成后，小鼠摘眼球取血于0.1%的肝素抗凝的試管中，將抗凝血離心5 min（800 r·min-1）；取壓積紅細胞0.1 ml，加入2 ml生理鹽水，混勻，2 500 r·min-1離心5 min；吸去上清液，再用2 ml生理鹽水洗滌紅細胞一次；吸去上清液，加入0.4 ml PBS液；取上述PBS液0.1 ml，用PBS稀釋至6 ml，均分為3等份，其中兩只管為標記管，一只管為空白管；在標記管中加入2 ml濃度為2×10-6 mol·L-1 DPH標記液，空白管中加入2 ml PBS緩沖液，混勻；25℃恒溫水浴中避光溫育30 min，溫育畢，離心（2 500 r·min-1）5 min后棄去上清液，再用4 ml PBS緩沖液洗滌兩次，用4 ml PBS緩沖液將紅細胞懸起。上機測定，激發(fā)波長（EX）364 nm，發(fā)射波長（EM）457 nm，根據(jù)公式①計算熒光偏振度P［4］，激發(fā)光光軸呈垂直方向時測得的水平以及垂直方向的熒光強度為IVH和IVV。
P=IW-GIVHIW+GIVH①
式中，P為熒光偏振度；G為儀器校正因子，校正由于單色器所產(chǎn)生的附加偏振。
IW=IW1+IW22-IW空白
IVH=IVH1+IVH22-IVH空白
IW-起偏器和檢偏器光軸均在垂直方向時的熒光強度。
IVH-起偏器光軸在垂直方向上，檢偏器光軸在水平方向上時的熒光強度。根據(jù)公式 η=2P0.46-P，P為所測的熒光偏振度，計算微黏度η。
數(shù)據(jù)采用SPSS 11.0版統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，多組間比較用方差分析和p-LSD(最小顯著差)法檢驗。以P
由表2可知，模型對照組與空白對照組相比，熒光偏振度P有降低的趨勢，即紅細胞膜流動性或變形能力增強。與模型對照組相比，EE20組和EE40組的熒光偏振度P降低，微黏度降低，有非常顯著性差異（P
3 討論
心肌持續(xù)缺血將導致心肌組織損害， 并出現(xiàn)S-T段缺血性改變，腹腔注射ISO誘發(fā)小鼠急性心肌缺血損傷模型是研究抗心肌缺血藥物的經(jīng)典模型。本課題采用該模型后發(fā)現(xiàn)，模型對照組小鼠ip ISO后其ECGⅡ導聯(lián)S-T段出現(xiàn)了明顯的缺血表現(xiàn)。EE20組、EE40組和EE60組對此異常S-T段變化具有顯著抑制作用；可拮抗ISO引起的S-T段異常變化，可使小鼠異常變化的DS-T明顯降低。說明芎湯抗急性心肌缺血的作用，其機制可能涉及到冠脈擴張和冠脈流量的增加。EE20組在5，10，20 min時間段都有較強的抗心肌缺血作用，EE40組在10 min、EE60組在20 min有較強的抗心肌缺血作用，這可能與各洗脫部分活性物質組成不同，在體內的吸收及代謝速度不同有關。
本實驗所用熒光探劑DPH是疏水性的，用以標記膜脂雙層的碳氫鏈區(qū)，測量這兩種探針與膜結合的熒光偏振度并計算出微粘度，能定量地說明膜蛋白與膜脂分子的運動情況，從而了解膜的流動性。熒光偏振度可反映膜脂區(qū)的微黏度，P值越大，微黏度越大，膜流動性愈?。环粗?，值越小，微黏度越小，膜流動性愈大。實驗結果顯示，EE20組、EE40組可顯著性降低DPH標記的小鼠紅細胞膜熒光偏振度，增強紅細胞膜流動性。
紅細胞是主要的氣體交換單元，其變形性是改善血液狀態(tài)、發(fā)揮紅細胞攜氧功能、保證微循環(huán)灌注、完成氣體交換任務的必備條件。本實驗表明，小鼠ip ISO所造成的急性心肌缺血模型的心電圖DS-T已有顯著性改變，表明心肌細胞已經(jīng)受損。而此時紅細胞膜熒光偏振度P值較空白組卻下降，提示紅細胞膜流動性增強，亦即紅細胞流動性增強。焦曉慧等［5］也發(fā)現(xiàn)大鼠心肌缺血時紅細胞膜熒光偏振度P值下降，膜流動性也增強，故缺血時紅細胞膜流動性增強可能也是代償性反應。EE40組中抗血栓有效成分阿魏酸含量較高［6］，可能也促進模型小鼠的紅細胞膜流動性代償性增高，以改善其心肌缺血癥狀，具體機制還有待進一步研究。
對芎湯不同部位抗急性心肌缺血實驗發(fā)現(xiàn)，芎湯醇提物經(jīng)大孔吸附樹脂分離的EE20、EE40和EE60部位可拮抗ISO引起的DS-T升高，可使小鼠升高的DS-T明顯降低，能夠保護心肌細胞，起到抗急性心肌缺血的作用，增加細胞的抗缺血缺氧能力；通過紅細胞膜流動性實驗發(fā)現(xiàn)，EE20、EE40部位可增強紅細胞膜的流動性，改善急性期缺血的能量代謝障礙的狀態(tài)，防止心肌的進一步壞死。該研究對篩選芎湯活血活性部位、進一步發(fā)現(xiàn)其活血活性成分具有重要的指導意義。
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韓國農(nóng)振廳發(fā)表消息稱，開發(fā)了一定比例混合氣體來置換包裝容器內空氣的新技術，使用該技術包裝的小西紅柿的新鮮度可延長2倍。
該技術核心是包裝小西紅柿時，充填能保持新鮮度的氣體，所使用氣體為氮氣、氧氣及二氧化碳的混合氣體。
具體方法是容器內裝入750克小西紅柿，抽出空氣形成真空狀態(tài)之后充填氮、氧及二氧化碳的混合氣體，混合氣體比例為氮氣91%、氧氣6%、二氧化碳3%。包裝所使用塑料膜為10℃- 20℃的流通環(huán)境下氣體濃度變化最小的塑料膜，其氧氣透過率為25000 0TR (OxygenTransmission Rate,cc/24hr-nf)。
使用該技術，在15℃流通環(huán)境下，與普通真空包裝相比小西紅柿的呼吸速度降低1/3，小西紅柿保持新鮮狀態(tài)的時間也由3天延長到6天。
另外，使用該技術后，除了降低蔬果的呼吸速度之外，還有保持果實表面顏色與果肉硬度的效果和保持蒂部新鮮度的作用。